專利名稱：一種提高菊花自交親和性的方法
技術領域：
本發明屬于花卉育種技術領域，具體涉及一種提高菊花自交親和性的方法。

背景技術：
菊花(Dendranthema morifolium)是世界四大鮮切花之一，享譽世界，又是我國傳統名花，深受我國人民青睞，在我國至少已經有1600年的栽培歷史，具有重要的人文、經濟和社會價值。
自交方法可以使雜合基因型植物的后代發生性狀分離，通過連續自交方法可以獲得遺傳上不同的若干純合基因型，使后代群體的遺傳組成趨于純合和穩定，繼而獲得純合體。純合基因型的獲得是研究生物遺傳性狀的根本，只有獲得純合基因型，才能對菊花的各性狀進行遺傳研究，掌握主要經濟性狀的遺傳規律，服務于菊花的新品種選育工作。
然而，菊花為典型的異花授粉作物，栽培菊花的多倍性起源使其染色體高度雜合，并存在非整倍體，這使得栽培菊花自交親和性較低，自交難以結實。菊花的自交親和障礙主要發生在雌蕊柱頭，在常規授粉條件下，表現為同種基因型的菊花花粉不能粘附于雌蕊柱頭，花粉不能在柱頭表面正常萌發或萌發率極低，花粉管難以進入花柱而停滯在柱頭乳突細胞表面，并誘導產生胼胝質，最終無法完成雙受精過程，不能自交結實。
綜上可見，如果能找到克服菊花自交不親和性障礙的方法，對于獲得純合的菊花遺傳分離群體具有重大的理論和實踐意義。目前尚未見到能夠有效克服菊花自交親和性的方法。


發明內容
本發明的目的是提供一種提高菊花自交親和性的方法，使菊花自交能夠結實，以便通過自交方法獲得純合的栽培菊花遺傳群體。
本發明提供的技術方案如下 A.通過手持式放大鏡鏡檢，選定柱頭發育的特定授粉時期“I”型晚期； B.花粉選取選擇未受污染的新鮮花粉，選自授粉花序或同種基因型其他花序； C.對柱頭進行處理溶液噴霧和授粉利用噴霧器將配制好的處理溶液向柱頭噴霧；噴霧后10-15分鐘，將采集的新鮮花粉涂抹在雌蕊柱頭上； D.對授粉的頭狀花序套袋、標記授粉后，用硫酸紙袋套袋隔離，掛牌標記；授粉后8-10天去袋； E.授粉后管理、收獲、考種將未授粉的花蕾及花序摘除；授粉后45-60天，用剪刀剪取頭狀花序，置于通風處晾干、考種。
上述的處理柱頭溶液包括下述組分150mg·L-聚乙二醇6000、20mg·L-硼酸、200mg·L-槲皮素。
本發明的積極效果是克服了菊花自交障礙，提高了菊花自交的親和性，能很好實現菊花自交結實，通過自交方法獲得純合的栽培菊花遺傳群體。

具體實施例方式 實施例1 成功提高了菊花‘S0291’的自交親和性 A、菊花‘S0291’的特征特性。
菊花‘S0291’為地被菊類型，舌狀花1輪，26-31枚，淺粉色；筒狀花平均165-190個。在沈陽地區自然花期為9月上旬至10月中旬。采用常規人工授粉時，菊花‘S0291’的自交親和指數為0。
B、實施具體方法如下 1、手持式放大鏡鏡檢，鑒定柱頭發育時期，選擇小花舌狀花雌蕊柱頭成I型柱頭晚期進行處理和授粉。
根據解剖觀察，依據菊花柱頭的自然成熟順序，將柱頭劃分為“I型”早期、“I型”晚期、“Y型”期和“T型”期。
I型早期指花柱白色，細弱而短小，柱頭頂端未分叉； I型晚期指花柱乳白色，成熟豐滿，柱頭頂端尚未自然分叉，兩柱頭保持直立平行狀態； Y型期指花柱乳白至乳黃色，成熟豐滿，兩分叉間成小于45°的銳角； T型期指花柱乳黃色，成熟，柱頭頂端兩分叉間排成小于45°的銳角或近于平角。
2、配制柱頭處理溶液。柱頭處理溶液中含有如下配方 聚乙二醇6000 150mg·L-， 硼酸20mg·L-， 槲皮素200mg·L-。
制備方法 (1)稱取100mg槲皮素(C15H10O7·2H2O)，溶于50ml沸騰的無水乙醇。
(2)稱取75mg聚乙二醇6000(PEG6000)，溶于50ml蒸餾水。
(3)稱取10mg硼酸(H3BO3)，溶于50ml蒸餾水。
(4)將上述各溶液混合，通過蒸餾水定容于500ml容量瓶，即成處理液配方。
3、舌狀花需要在處理及授粉前2天剪瓣。
于9月中上旬，選取顯色后期的花蕾掛牌，待外緣舌狀花初展時，若采用單性(雌性)邊緣舌狀花作為授粉對象的，需提前2天剪短舌狀花花瓣，注意勿傷及幼嫩柱頭。
4、選取花粉?；ǚ圻x擇當天開放的新鮮花粉，花粉的選取有兩種方法 (1)選擇同一個頭狀花序的花粉，即單花序授粉，為最嚴格意義上的自花授粉，即以周緣筒狀花的花粉授以中心筒狀花上。須提前對目標花序進行套袋，以防花粉污染。授粉時，用毛筆直接在花序上刷抹即可。
(2)或選擇同株其他頭狀花序或同一個基因型其他植株上的花粉。均為遺傳學上的自花授粉，或稱自交。也須提前對目標花粉進行套袋隔離。在處理前用鋁盒提前收取花粉，也可以在授粉時直接用毛筆刷取。
5、處理溶液柱頭噴霧。
利用200-500ml微型細嘴噴霧器，將配制好的處理液向舌狀花柱頭噴液處理。
6、授粉、套袋。
噴液后10-15分鐘，將事先采集的新鮮花粉涂抹在雌蕊柱頭上，用硫酸紙袋對整個授粉花序套袋隔離。
7、掛牌標記，授粉后8-10天去袋。
8、授粉后管理。授粉后進行常規管理，為集中營養以促進種子發育，將未受粉的花蕾及花序摘除。
9、收獲、考種 授粉后約45-60天后，用剪刀剪取頭狀花序，置于通風處晾干、考種。
處理后自交結籽率統計。
僅選擇外緣舌狀花考種，計數結籽數，并根據公式親和指數＝結籽數/授粉舌狀小花數，計算親和指數(表1)。4個頭狀花序間自交親和指數差異不顯著，平均自交親和指數上升為0.14。
表1菊花‘S0291’常規自交與克服處理自交的親和性比較 Table 1Comparison in common and treated selfing of‘S0291’
實施例2 成功提高了菊花‘C038’的自交親和性 A、菊花‘C038’特征特性。
菊花‘C038’為多頭切花菊類型，舌狀花3輪，84-97枚，玫瑰色；筒狀花平均115-136個。在沈陽地區自然花期為10月中旬至11月上旬。采用常規人工授粉時，菊花‘C038’的自交親和指數為0。
B、實施具體方法如下 因‘C038’舌狀花3輪，每層舌狀花的柱頭發育不一致，根據每層舌狀花柱頭發育的實際，剪瓣、噴施處理液和授粉需要分3次進行。于10月中旬，選取顯色后期的花蕾掛牌，待最外層舌狀花初展時，剪除最外層的舌狀花花瓣，第二天剪除外數第2層舌狀花的花瓣，同時為最外層舌狀花柱頭噴施處理液，此時最外層舌狀花雌蕊柱頭為“I”型晚期。第三天剪除外數第3層舌狀花的花瓣；同時為外數第2層舌狀花柱頭噴施處理液。以此類推。噴液處理、授粉及套袋的具體方法同實例1。
最后一次授粉后45-60天，取授粉的頭狀花序于通風處晾干，細心選擇所有舌狀花考種，計數結籽數和親和指數(表2)。3個頭狀花序間親和指數差異不顯著，平均自交親和指數上升為0.10。
表2菊花‘C038’常規自交與克服處理自交的親和性比較 Table 2Comparison in common and treated selfing of‘C038’
以上在兩個代表性菊花品種上的實施應用結果表明，本發明方法是一種有效提高菊花自交親和性的方法，能很好地實現菊花自交結實，通過自交方法獲得純合的栽培菊花遺傳群體。
權利要求
1.一種提高菊花自交親和性的方法，其特征在于
A、通過手持式放大鏡鏡檢，選定柱頭發育的特定時期Ⅰ型晚期；
B、花粉選取選擇未受污染的新鮮花粉，選自授粉花序或同種基因型其他花序；
C、對柱頭進行處理溶液噴霧和授粉利用噴霧器將配制好的處理溶液向柱頭噴霧；噴霧后10-15分鐘，將采集的新鮮花粉涂抹在雌蕊柱頭上；
D、對授粉花序套袋、標記授粉后，用硫酸紙袋套袋進行隔離，掛牌標記；授粉后8-10天去袋；
E、授粉后管理、收獲、考種將未受粉的花蕾及花序摘除；授粉后45-60天，用剪刀剪取頭狀花序，置于通風處晾干、考種。
2.根據權利要求1所述的提高菊花自交親和性的方法，其特征在于處理柱頭溶液的配方包括下述組分
聚乙二醇6000150mg·L-，
硼酸20mg·L-，
槲皮素 200mg·L-。
全文摘要
本發明屬于花卉育種技術領域，具體涉及一種提高菊花自交親和性的方法。本發明的目的是尋找有效手段克服菊花自交障礙，從而攻克菊花自交不能結實的難關，以便通過自交方法獲得純合的栽培菊花遺傳群體，為研究菊花重要經濟性狀的遺傳規律提供素材。A.通過放大鏡鏡檢，選定柱頭發育的特定時期；B.選擇未受污染的新鮮花粉，選自授粉花序或同種基因型其他花序；C.對柱頭進行處理溶液噴霧和授粉；D.對授粉花序套袋、標記授粉后8-10天去袋。E.將未受粉的花蕾及花序摘除；授粉后約45-60天，用剪刀剪取授粉的頭狀花序，置于通風處晾干、考種。本發明克服菊花自交障礙，提高了菊花自交的親和性，從而實現菊花自交能結實，通過自交方法獲得純合的栽培菊花遺傳群體。
文檔編號A01H1/02GK101828522SQ201010178920
公開日2010年9月15日 申請日期2010年5月21日 優先權日2010年5月21日
發明者祝朋芳, 吳月亮, 周廣柱, 毛洪玉, 段玉璽 申請人:沈陽農業大學