專利名稱：10億/克高抗苯并咪唑類殺菌劑木霉分生孢子可濕性粉劑及制備方法
技術領域：
本發明屬于微生物農藥技術領域，尤其涉及高抗苯并咪唑類殺菌劑微生物孢子粉可濕性粉劑的制備。
背景技術：
木霉菌生長快，產孢量大，抑制多種植物病原菌，但對苯并咪唑類殺菌劑敏感，在 田間施用這類殺菌劑時不能發揮生物防治作用。目前單獨使用生防因子來控制作物病害， 往往受到環境條件等因素的干擾，造成田間防治效果不穩定，由于對化學農藥的敏感性問 題長期以來未能解決，使它們不能與化學農藥同時應用于植物病害的綜合防治。因此，為 解決生防菌應用中所面臨的問題，實現化學農藥與木霉菌的聯合使用，提高生防制劑的防 治效果，減少化學農藥的使用劑量及農藥殘留。哈爾濱工業大學楊謙等采用基因工程的方 法，利用苯并咪唑類殺菌劑抗性基因改造木霉菌，獲得了能夠穩定遺傳的、具有對苯并咪唑
I^iilTsi (Min Li, Qian Yang. Isolationand characterization of a β -tubulin gene from Trichodermaharzianum. Biochemical genetics,2 007,45: 529-534.)，將苯并咪唑類殺菌劑抗性基因導入菌株中，可以與苯并咪唑類殺菌劑同時應用 于植物病害的綜合防治，有利于病害的防治和減少化學藥劑的使用量，有效地減少環境污 染。但是，目前急需解決的就是要研發出高效、經濟且具備商業化生產與化學殺菌劑同時使 用的復合劑型，以提高菌株的生防效果，解決當今我國農業生產中的迫切需求。

發明內容
本發明目的是制備一種具備商業化生產條件的高抗苯并咪唑類殺菌劑生防木霉， 并能用于田間方便使用的可濕性粉劑劑型，使木霉菌劑型化有利于生產應用，同時可延長 菌劑孢子的貨架期。本發明技術方案是10億/克木霉分生孢子可濕性粉劑是采用木霉分生孢子粉再加上適當助劑復配 而成，其組分及其重量百分含量為①木霉菌分生孢子粉2%;②潤濕劑DY-ETE301 3-5%； ③分散劑木質素磺酸鈉4-6% ；④紫外保護劑核黃素0. 5-1. 0% ；⑤殘米粉20-30% ；⑥其余 由硅藻土補足到100%。本發明的制備方法采用分離式加工技術，其方法步驟如下第一步將分散劑、紫外保護劑、殘米粉、硅藻土按上述組分的重量百分含量配比 要求進行氣流粉碎后加入到混合器中，混合均勻；第二步按組分的重量百分含量配比分別向混合器中加入潤濕劑DY-ETE301、木 霉菌分生孢子，充分攪拌均勻；第三步對以上粉劑裝入塑料包裝袋中，貯藏溫度不超過20°C。制備后的木霉分生孢子可濕性粉劑可以與苯并咪唑類殺菌劑(1 1比例)混合，應用于植物病害的綜合防治，既有利于病害的防治，又減少化學藥劑的使用量，有效地減少 了環境污染。本發明經試驗證明可用于多種大田作物及蔬菜的灰霉病、立枯病、猝倒病、枯萎病 等病害的防治。其防治效果80%以上；對環境無污染、對人畜無害、投入低、易于商品化；使 用方便、貨架期長，保質期一年其孢子萌發率80%以上。同時具有持效期長，并有明顯的增 產作用，使用量少，化學農藥殘留量低等特點。本粉劑的制備工藝能夠在生產、儲存、應用中 保證孢子的生物活性和防治效果。
具體實施方式

1、可濕性粉劑組分的重量配比10億/克木霉分生孢子可濕性粉劑制備采用木霉分生孢子孢子粉再加上適當助 劑復配而成，其組分及其重量百分含量為①木霉菌分生孢子2% ；②潤濕劑DY-ETE301 3-5% ；③分散劑木質素磺酸鈉4-6% ；④紫外保護劑核黃素0. 5-1. 0% ；⑤殘米粉20-30% ； ⑥其余由硅藻土補足到100%。2、固體助劑粉碎將分散劑木質素磺酸鈉、紫外保護劑、殘米粉、硅藻土按上述配比要求進行氣流粉 碎后加入到混合器中，混合均勻。3、填加液體助劑及孢子粉按配比分別向混合器中加入潤濕劑DY-ETE301、木霉菌分生孢子；4、混拌包裝將以上混合器里助劑充分攪拌均勻、裝入包裝袋中，20°C以下溫度貯藏，貯藏期為一年。5、質量檢測①含孢量的測定將0. 01克樣品加入IOmL 0. 5% Tween 80溶液中，磁力攪拌30min，用血球計數板 測定孢子懸液濃度，計算樣品的含孢量，重復5次。②活孢率的測定將樣品加入含2%蔗糖和0.5%蛋白胨的萌發液中，使其終濃度為100萬孢子/mL。 將孢子液在28 士 1°C下振蕩(120r/min)培養20h，取樣用血球計數板計數萌發液中萌發與 未萌發的孢子數，計算孢子萌發率，重復5次。③潤濕性的測定參照GB/T 5451-2001農藥可濕性粉劑潤濕性測定方法④孢子懸浮率的測定參照GB/T 14825-2006農藥懸浮率測定方法⑤粉劑細度測定參照GB/T16150-1995農藥粉劑、可濕性粉劑細度測定方法中濕篩法⑥水分的測定參照GB/T1600-2001共沸蒸餾法經以上檢測樣品的含孢量10億/克；活孢率82% ；潤濕時間53秒；孢子懸浮率79% ；細度325目篩通過率98. 5% ；水分1.82%。生產應用將制備后的木霉分生孢子可濕性粉劑與苯并咪唑類殺菌劑(1 1)混合，應用于植物病害的綜合防治，使用方法可以拌種、苗床處理、灌根等。其具體的施用的辦法是噴 施要稀釋500-800倍應用、拌種要以種子量的0. 3%進行拌種或穴施要稀釋500-800倍，即 200毫升/穴。
權利要求
一種10億/克高抗苯并咪唑類殺菌劑木霉分生孢子可濕性粉劑，其特征是該可濕性粉劑是采用木霉分生孢子粉再加上適當助劑復配而成，其組分及其重量百分含量為①木霉菌分生孢子粉2％；②潤濕劑DY-ETE301 3-5％；③分散劑木質素磺酸鈉4-6％；④紫外保護劑核黃素0.5-1.0％；⑤殘米粉20-30％；⑥其余由硅藻土補足到100％。
2.一種10億/克高抗苯并咪唑類殺菌劑木霉分生孢子可濕性粉劑制備方法，其特征 是本發明的制備方法采用分離式加工技術，其方法步驟如下第一步將分散劑、紫外保護劑、殘米粉、硅藻土按上述組分的重量百分含量配比要求 進行氣流粉碎后加入到混合器中，混合均勻；第二步按組分的重量百分含量配比分別向混合器中加入潤濕劑DY-ETE301、木霉菌 分生孢子，充分攪拌均勻；第三步對以上粉劑裝入塑料包裝袋中，貯藏溫度低于20°C。
3.一種實施權利要求1和2所述的可濕性粉劑的應用方法，其特征是將制備后的木 霉分生孢子可濕性粉劑與苯并咪唑類殺菌劑(1 1)混合，應用于植物病害的綜合防治；使 用方式為可以拌種、苗床處理、灌根或穴施。
4.根據權利要求3所述的可濕性粉劑的應用方法，其特征是苗床處理具體的施用 的辦法可以進行噴施，使用時要稀釋本發明的可濕性粉劑與苯并咪唑類殺菌劑混合劑 500-800倍后，進行噴施。
5.根據權利要求3所述的可濕性粉劑的應用方法，其特征是應用于拌種具體的施用 的辦法可以以本發明的可濕性粉劑與苯并咪唑類殺菌劑混合劑以種子量的0. 3%進行拌 種。
6.根據權利要求3所述的可濕性粉劑的應用方法，其特征是應用于灌根或穴施具 體的施用的辦法，使用時要稀釋本發明的可濕性粉劑與苯并咪唑類殺菌劑混合劑500-800 倍，即以200毫升/穴數量進行實施。
全文摘要
10億/克高抗苯并咪唑類殺菌劑木霉分生孢子可濕性粉劑及制備方法屬于生物農藥技術領域，10億/克木霉分生孢子可濕性粉劑其組分為木霉菌分生孢子、潤濕劑DY-ETE301、分散劑木質素磺酸鈉、紫外保護劑核黃素、殘米粉、硅藻土等。本方法采用分離式加工技術，加工制成可濕性粉劑。可以與苯并咪唑類殺菌劑同時應用于多種大田作物及蔬菜的灰霉病、立枯病、猝倒病、枯萎病等植物病害的防治。其防治效果80％以上；對環境無污染、對人畜無害、使用方便、保質期一年其孢子萌發率80％以上。同時具有持效期長，并有明顯的增產作用，使用量少，化學農藥殘留量低，有效地減少環境污染等特點。
文檔編號A01G13/00GK101861879SQ20101020564
公開日2010年10月20日 申請日期2010年6月22日 優先權日2010年6月22日
發明者周傳余, 宋金柱, 張金棟, 楊謙 申請人:哈爾濱工業大學