專利名稱：地衣芽孢桿菌ts-01對蛋雞脂肪肝出血綜合征的預防作用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種地衣芽孢桿菌TS-01及其在蛋雞生產中的應用，特別涉及地衣芽孢桿菌TS-Ol對蛋雞脂肪肝出血綜合征的預防作用。
背景技術：
蛋雞脂肪肝出血綜合征(FattyLiver Hemorrhagic Syndrome,FLHS)是一種營養代謝性疾病，常見于產蛋高峰期的籠養蛋雞。其典型特征是產蛋高峰期蛋雞群體死亡率的上升和產蛋率的突然下降。近年來，在養殖追求高效生產的情況下，該病的發生呈逐年升高的趨勢，給蛋雞養殖帶來了巨大的經濟損失。蛋雞脂肪肝出血綜合征的產生是由多方面的原因造成的，包括營養、環境、遺傳、內分泌和有毒物質等。目前，對蛋雞脂肪肝出血綜合征的防治尚無理想的方法，因此尋找一種經濟、安全、有效的防治方法是當務之急。
近年來，動物微生態制劑在畜禽生產中得到了廣泛的應用。微生態制劑是由許多有益微生物及其代謝物構成，可直接飼喂動物，能夠在數量或種類上補充腸道內減少或缺乏的有益微生物，調節或維持腸道內微生態平衡。地衣芽孢桿菌作為農業部規定允許使用的飼料級微生物添加劑之一，主要應用于防病治病、增強機體免疫力、促進生長、提高飼料利用率，從而達到提高畜禽生產性能之目的。有研究表明，地衣芽孢桿菌應用于蛋雞生產中，可以降低血清中總膽固醇和總甘油三酯的水平。發明人受此啟示進行研究，將其應用范圍擴大到預防蛋雞脂肪肝出血綜合征的發生領域。發明內容
本發明提供地衣芽孢桿菌TS-Ol的一種新的用途，特別是用地衣芽孢桿菌預防蛋雞脂肪肝出血綜合征的發生。
本發明的主要內容是應用微生物飼料添加劑地衣芽孢桿菌TS-Ol預防蛋雞脂肪肝出血綜合征。
本發明的有益效果是所述的菌株培養條件簡單、容易保存，易于工業化生產，對蛋雞脂肪肝出血綜合征有良好的預防效果，具 有良好的開發應用前景。
為證明本發明的實驗效果，下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細的描述。
實驗目的
探討地衣芽孢桿菌TS-Ol對蛋雞脂肪肝出血綜合征的預防作用。
I材料和方法
1.1日糧與試劑
基礎日糧:玉米62. 00%，豆柏23. 70%，石粉9. 00%，食鹽O. 30%，預混料5. 00% (代謝能10. 74兆焦每千克，粗蛋白15.82%);處理日糧玉米61. 99%，豆柏23. 70%，石粉9. 00 %，食鹽O. 30 %，地衣芽孢桿菌0.01% (含地衣芽孢桿菌7. 60 X IO9每千克配合日糧)，預混料5. 00% (代謝能10. 74兆焦每千克，粗蛋白15. 82%)。β -雌二醇(純度> 98% )、玉米油均為sigma(中國，上海)產品，地衣芽孢桿菌7. 60X IOltl菌落單位每克(菌種為中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所飼料添加劑研究室制備，并經過中國科學院微生物研究所鑒定為地衣芽孢桿菌，保藏于中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所飼料添加劑研究室，保藏號為TS-01)。
1. 2試驗動物及分組
40只54周齡海蘭褐蛋雞，隨機平均分為4個處理，每個處理10只雞，每個重復I 只雞。對照組和處理一飼喂基礎日糧，處理二和處理三飼喂處理日糧。均自由采食和飲水， 單籠飼養。6周后，對照組和處理二肌肉注射玉米油，處理一和處理三肌肉注射β -雌二醇， 試驗第42、45、48、51和54天各肌肉注射一次，共注射5次，每次肌肉注射劑量為玉米油O. 5 毫升每千克體重，β -雌二醇7. 5毫克每O. 5毫升玉米油每千克體重。試驗期共8周。
1. 3檢測指標與方法
剖檢變化剖檢所有試驗雞，觀察肝臟顏色、肝臟是否增大及出血狀況。
肝脂脂肪含量測定分別取同一部位肝臟樣品約30克左右，置于冷凍干燥管中_80°C冷凍保存用于肝臟脂肪含量的測定。將_80°C下保存的肝臟樣品于常溫下解凍，用生理鹽水清洗外周血潰，濾紙吸干后勻漿，電子天平稱取2克左右的肝臟，記錄肝濕重，濾紙包好在105°C下烘干至恒重，用電子天平稱出抽提前的濾紙樣包重，放入索氏抽提器中用乙醚提取12小時，控制乙醚的回流速度在10次每分鐘，然后再在105°C烘箱中烘至恒重， 稱出其脫脂后濾紙樣包重，脂肪含量的計算公式如下肝臟脂肪含量(％)=(脫脂前樣包重-脫脂后樣包重)/ (脫脂前樣包重-絕干濾紙重)X 100 %
肝臟出血指數根據該試驗中的肝臟出血情況，將出血程度劃分為4級0 =沒有出血，1 =有少數出血點或斑，2 =有明顯的出血區或血腫,3 =有廣泛的局灶性出血區或大出血。2級以上判為脂肪肝出血綜合征雞，其余為亞臨床雞。Vx
肝臟出血指數=k，x =出血級數，N =每組雞數。N
脂肪肝發生率的測定將肝臟脂肪含量25%以上且出血指數2級以上判為脂肪肝出血綜合征雞，其余為亞臨床雞。
肝臟組織切片大脂滴性脂肪變性觀察肝細胞內是否存在大脂滴空泡。
1. 4理據處理
采用SAS8. 2軟件進行數據處理，檢驗方法為單因素方差分析，均值的多重比較用 Duncan法進行，以P < O. 05作為差異顯著性判斷標準。
2試驗結果
2.1剖檢變化
剖檢可見正常肝無出血點及彌散性出血區。異常肝出血多見于肝臟邊緣，尤其是右肝下緣和左肝右邊緣，多呈彌散性出血區或出血斑，出血肝多呈棕褐色、質脆、面泥狀。
大體剖檢變化如圖所示。
2. 2肝臟出血指數雞和肝臟脂肪含量
由表I可知，肝臟出血指數在處理二和處理三組分別比處理一組降低了 66. 47% 和52. 1% (P < O. 05);肝臟脂肪含量在處理三組比處理一組降低了 26. 40% (P < O. 05)； 脂肪肝出血綜合征發生率處理二和處理三分別比處理一降低了 50%%和50%。
表I地衣芽孢桿菌TS-Ol對蛋雞脂肪肝出血綜合征預防作用試驗結果
權利要求
1.地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)TS-Ol在預防蛋雞脂肪肝出血綜合征中的應用，其特征在于在蛋雞配合飼料中加入地衣芽孢桿菌。
2.根據權力要求I所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)TS-Ol在預防蛋雞脂肪肝出血綜合征中的應用，其特征在于地衣芽孢桿菌在蛋雞配合飼料中含量為O. 01%。
3.根據權力要求I或2所述的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis) TS-01,其特征是地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)TS-01粉劑。
4.根據權力要求3所示的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis) TS-O粉劑I,其特征在于活菌7.6Χ1(Γ菌落單位每克。
5.一種如權力要求I所述蛋雞，其特征在于50周齡后產蛋雞。
全文摘要
本發明涉及一株地衣芽孢桿菌及其新的用途，特別涉及地衣芽孢桿菌對蛋雞脂肪肝出血綜合征中的預防作用。該地衣芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)TS-01。本發明公開的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)TS-01可直接應用于蛋雞飼料生產。本發明試驗數據表明，地衣芽孢桿菌TS-01可以有效預防蛋雞脂肪肝出血綜合征的發生。
文檔編號A23K1/16GK102987100SQ201110247179
公開日2013年3月27日 申請日期2011年8月26日 優先權日2011年8月26日
發明者董曉芳, 佟建明, 徐鵬 申請人:中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所