專利名稱：一種有效解除重樓種子休眠的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種有效解除重樓種子休眠的方法。
技術(shù)背景
重樓植物隸屬百合科重樓屬，是多種中成藥如云南白藥、宮血寧、熱毒清等的主要原料。隨著其用途的不斷拓寬，重樓資源的需求量也迅速增加。據(jù)資料統(tǒng)計(jì)顯示，目前，可用的重樓資源將近80%已被開發(fā)殆盡，剩余的20%資源按照目前的國(guó)際國(guó)內(nèi)需求分析，可能維持3 5年。因此，大規(guī)模開展重樓藥用植物的栽種有非常重要的意義。
目前制約重樓植物規(guī)模化栽種生產(chǎn)的主要問題是重樓種苗的短缺；由于重樓植物在果實(shí)成熟時(shí)種子的胚尚發(fā)育不全，其種胚內(nèi)胚芽、胚軸、胚根和子葉都還沒有發(fā)育形成， 以及胚乳堅(jiān)硬，內(nèi)種皮表層角質(zhì)化等形態(tài)后熟和生理休眠的特性，使得重樓種子在常規(guī)田間播種后通常需要經(jīng)歷兩冬一夏才能萌發(fā)出苗，種子萌發(fā)所需要的時(shí)間較長(zhǎng)，是典型的“二年生種子”；并且在自然狀態(tài)下，即使經(jīng)歷了長(zhǎng)時(shí)間休眠的重樓種子其出苗率也較低。
目前已有人就打破重樓種子休眠的技術(shù)申請(qǐng)了專利，如專利申請(qǐng)?zhí)枮?8118955. 5 的專利申請(qǐng)文件公開了一種“滇重樓種子發(fā)芽及其快速繁殖技術(shù)”，該技術(shù)是先將重樓種子用20-80ppm的赤霉素浸泡，然后再采用4°C與22°C變溫交替培養(yǎng)，同時(shí)在培養(yǎng)基中添加激素和滇重樓寡糖素，以使種子最早能在2個(gè)月萌發(fā)，該技術(shù)雖然能有效打破重樓種子的休眠期，縮短種子萌發(fā)時(shí)間，但變溫操作過程復(fù)雜，且最后需接入含有激素和滇重樓寡糖素的培養(yǎng)基中，生產(chǎn)成本高。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種操作簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本較低的能有效解除重樓種子休眠的方法，該方法能大大縮短種子形態(tài)后熟及生理休眠的時(shí)間，使重樓種子在較短時(shí)間內(nèi)萌發(fā)。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的解決方法包括下列步驟
(1)去除外種皮選擇在重樓果實(shí)成熟、果皮開裂時(shí)采收種子，將新鮮重樓種子與濕沙子混合，以相互揉搓的方式及時(shí)清除重樓種子的外種皮，并用清水沖洗干凈；
(2)雙氧水處理將除去外種皮的重樓種子用濾紙吸干水分后，放入1 3%的雙氧水中浸泡5 10h，浸泡過程在0 8°C遮光條件下進(jìn)行；
(3)赤霉素處理將雙氧水處理后的重樓種子先用濾紙吸干表面，然后在18 25°C放置12 24h晾干，再將晾干后的種子放入200 400mg/L的赤霉素溶液中浸泡12 48h，浸泡過程在18 25°C遮光條件下進(jìn)行；
(4)萌發(fā)培養(yǎng)取出在赤霉素溶液中浸泡后的種子，用濾紙吸干水分后，放在超凈臺(tái)上先用70 % 75 %的乙醇消毒30s，再用0. 1 % 0. 2 %的升汞消毒4 lOmin，然后用無菌水清洗三次后接種到1/2MS培養(yǎng)基中，在光照強(qiáng)度為1000 18001x、每天光照8 12h、 溫度為16 25°C的培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
本發(fā)明針對(duì)重樓種子所具有的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，首先將抑制重樓種子萌發(fā)的外種皮及時(shí)地清除干凈，接著用適宜濃度的雙氧水處理重樓種子角質(zhì)化程度較高、質(zhì)地堅(jiān)硬的內(nèi)種皮， 以增強(qiáng)內(nèi)種皮的通透性；然后再將種子放入適宜濃度的赤霉素溶液中浸泡處理，以加速重樓種胚內(nèi)各器官的形態(tài)建成和發(fā)育成熟，同時(shí)進(jìn)一步促進(jìn)重樓種子中貯藏物質(zhì)胚乳轉(zhuǎn)化為可利用狀態(tài)，及時(shí)地供給種子萌發(fā)初期胚細(xì)胞分裂和器官形成的需要，完成重樓種子的形態(tài)和生理后熟，最終有效地打破重樓種子的休眠，使重樓種子從自然條件下需要2年左右才能萌發(fā)縮短到最快只需3個(gè)月左右的時(shí)間，大大地縮短了重樓種子的萌發(fā)時(shí)間。此外，本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本較低，易于推廣。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅限于此。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
(1)去除外種皮選擇在重樓果實(shí)成熟、果皮開裂時(shí)采收種子，將新鮮重樓種子與濕沙子混合，以相互揉搓的方式及時(shí)清除重樓種子外面紅色多汁的外種皮，并用清水沖洗干凈；
(2)雙氧水處理將除去外種皮的重樓種子用濾紙吸干水分后，放入2%的雙氧水中浸泡8h，整個(gè)浸泡過程在4°C遮光條件下進(jìn)行；
(3)赤霉素處理將雙氧水處理后的重樓種子先用濾紙吸干表面水分后，然后在 20°C放置18h晾干，再將晾干后的種子放入300mg/L的赤霉素溶液中浸泡36h，浸泡過程在 20°C遮光條件下進(jìn)行；
(4)萌發(fā)培養(yǎng)取出在赤霉素溶液中浸泡后的種子，用濾紙吸干水分后，放在超凈臺(tái)上先用70 %的乙醇消毒30s，再用0. 1 %的升汞消毒8min，然后用無菌水清洗三次后接種到1/2MS培養(yǎng)基中，在光照強(qiáng)度為15001x、每天光照10h、溫度為20°C的培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng)， 培養(yǎng)3個(gè)月左右后，重樓種子長(zhǎng)出胚根，開始萌發(fā)。
實(shí)施例2
將實(shí)施例1步驟O)中雙氧水溶液的濃度改為采用1%，其它步驟同實(shí)施例1，重樓種子在培養(yǎng)5個(gè)月后長(zhǎng)出胚根，開始萌發(fā)。
實(shí)施例3
將實(shí)施例1步驟(3)中赤霉素溶液的濃度改為400mg/L，其它步驟同實(shí)施例1，重樓種子在培養(yǎng)4個(gè)月后長(zhǎng)出胚根，開始萌發(fā)。
權(quán)利要求
1. 一種有效解除重樓種子休眠的方法，其特征在于包括如下步驟(1)去除外種皮選擇在重樓果實(shí)成熟、果皮開裂時(shí)采收種子，將新鮮重樓種子與濕沙子混合，以相互揉搓的方式及時(shí)清除重樓種子的外種皮，并用清水沖洗干凈；(2)雙氧水處理將除去外種皮的重樓種子用濾紙吸干水分后，放入1 3%的雙氧水中浸泡5 10h，浸泡過程在0 8°C遮光條件下進(jìn)行；(3)赤霉素處理將雙氧水處理后的重樓種子先用濾紙吸干表面水分后，然后在18 25°C放置12 24h晾干，再將晾干后的種子放入200 400mg/L的赤霉素溶液中浸泡12 48h，浸泡過程在18 25°C遮光條件下進(jìn)行；(4)萌發(fā)培養(yǎng)取出在赤霉素溶液中浸泡后的種子，用濾紙吸干水分后，放在超凈臺(tái)上先用70 75%的乙醇消毒30s，再用0. 1 0. 2%的升汞消毒4 lOmin，然后用無菌水清洗三次后接種到1/2MS培養(yǎng)基中，在光照強(qiáng)度為1000 18001x、每天光照8 12h，溫度為 16 25°C的培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種有效解除重樓種子休眠的方法，該方法采用適宜濃度的雙氧水與赤霉素溶液相結(jié)合的處理方式，有效地打破重樓種子的休眠，縮短了其種子后熟期，使重樓種子從自然條件下需要2年左右才能萌發(fā)縮短到只需3個(gè)月左右的時(shí)間，大大地縮短了重樓植物的栽培時(shí)間。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102487627SQ20111040852
公開日2012年6月13日 申請(qǐng)日期2011年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月9日
發(fā)明者劉勇, 周杰, 張玨, 張紅玉, 李文光, 江明殊, 王躍華, 田夢(mèng)良, 薛惠玲, 藏薇, 陳燕 申請(qǐng)人:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)