專利名稱：一種河蜾蠃蜚的室內(nèi)培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海洋底棲生物培養(yǎng)，具體為一種端足類河蜾贏蜚的室內(nèi)培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
端足目鉤蝦亞目蜾贏蜚屬為世界性分布的大屬，是底棲生物的重要組成部分，是海洋魚、蝦、蟹類的優(yōu)質(zhì)餌料。蜾贏蜚首先應(yīng)用于養(yǎng)殖魚類，由于對蝦養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)蜾贏蜚也是對蝦稚、幼蝦生活階段的優(yōu)質(zhì)活餌料。蜾贏蜚屬生物還是毒性檢測的優(yōu)選受試生物，部分種類已應(yīng)用于生物毒性檢測，其中對于COTophium valutator的研究較全面，加拿大環(huán)境部已將其作為沉積物毒性生物檢測的標準受試生物。Corophium orientale、Corophium colo、Corophium multisetosum和Corophium insidiosum作為受試生物的研究也在進行中。河蜾贏蜚(corophium acherusicum)為中國海蜾贏蜚屬發(fā)現(xiàn)的20種生物之一,棲息于潮間帶軟泥和泥沙底質(zhì)，在中國、日本、澳大利亞、新西蘭等國家均有分布。無論作為餌料生物還是毒性檢測的受試生物，對于該種生物實驗室培養(yǎng)方法的研究均十分必要。本發(fā)明具體為一種端足類河蜾贏蜚的室內(nèi)培養(yǎng)方法，培養(yǎng)得到的河蜾贏蜚可作為優(yōu)質(zhì)餌料，用于海洋魚、蝦、蟹類等經(jīng)濟生物養(yǎng)殖，提高經(jīng)濟生物的產(chǎn)量；培養(yǎng)得到的河蜾贏蜚也可作為環(huán)境污染生態(tài)毒理診斷的受試生物，保證河蜾贏蜚的周年供給，滿足海洋沉積物、海洋疏浚物和海水樣品生物毒性檢測工作的開展，解決環(huán)境污染生物檢測受試生物在獲取時間、數(shù)量、生物品質(zhì)等方面存在的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的問題，目的在于提供一種端足類河蜾贏蜚的室內(nèi)培養(yǎng)方法，為海洋魚、蝦、蟹類等提供優(yōu)質(zhì)餌料，為毒性檢測工作提供數(shù)量充足和品質(zhì)優(yōu)良的受試生物。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:本發(fā)明的一方面在于:一種端足類河蜾贏蜚的室內(nèi)培養(yǎng)方法，其包括下述步驟:a.河蜾贏蜚采集采集河蜾贏蜚棲息地5cm左右的表層沉積物，放入網(wǎng)目為0.5mm的篩子中，篩出沉積物，收集端足類，將其放入盛有現(xiàn)場海水的容器中，運輸過程中避光充氧；b.河蜾贏蜚培養(yǎng)基質(zhì) 培養(yǎng)容器盛裝2-3cm的潔凈沉積物，添加海水體積為沉積物體積的3倍；c.河蜾贏蜚馴化條件挑選河蜾贏蜚個體，置于備好的培養(yǎng)容器中，投喂單胞藻餌料，充氧；隔一天換水，換水后投喂單胞藻餌料，充氧；每日升或降的溫度不超過3°C，升或降的鹽度不超過3，逐漸馴化到實驗室長期培養(yǎng)條件；d.河蜾贏蜚培養(yǎng)條件
溫度15 25°C，鹽度22 26，投喂單胞藻餌料，充氧；隔一天換水，換水后投喂單胞藻餌料；30 50d更換沉積物，分離成體和幼體。具體的，在上述的培養(yǎng)方法中，步驟b所述的培養(yǎng)容器，清潔后，用濃度為10% HCl溶液至少浸泡6小時,用水沖洗干凈。具體的，在上述的培養(yǎng)方法中，步驟b所述的:培養(yǎng)沉積物:采集自河蜾贏蜚的采集地，經(jīng)0.5mm的篩子篩分，去除石子和大顆粒物，過篩后的沉積物盛放在容器中，置于冰箱中_20°C凍存至少24h，去除沉積物中的其他生物；將凍存的沉積物放入烘箱中60°C至干燥或自然風干，碾碎后備用；培養(yǎng)海水:其鹽度是將近岸海水經(jīng)砂濾、沉淀和20 μ m篩絹過濾與經(jīng)曝氣后的自來水調(diào)配所得。具體的，在上述的培養(yǎng)方法中，步驟c或d中所述的換水的體積為原添加海水體積的 2/3。具體的，在上述的培養(yǎng)方法中，步驟c或d中所述的單胞藻餌料為下述的一種:6 X IO6CelΙ/ml 的新月菱形藻；6X 105cell/ml 的青島大扁藻；新月菱形藻(6X106cell/ml)和青島大扁藻(6X 105cell/ml)以等體積混合溶液；
新月菱形藻(6 X IO6CelΙ/ml)和青島大扁藻(6 X IO5ceIΙ/ml)以等體積混合溶液，附加合成餌料(0.lmg/ml);所述的合成餌料為對蝦蚤狀幼體階段或糠蝦期所用合成餌料。本發(fā)明是室內(nèi)培養(yǎng)河蜾贏蜚，使其經(jīng)馴化后在實驗室培養(yǎng)條件下能夠生長和繁殖，達到該種生物能夠在實驗室內(nèi)長期培養(yǎng)，為海洋魚、蝦、蟹提供優(yōu)質(zhì)活餌料，為毒性檢測工作提供數(shù)量充足和生物品質(zhì)優(yōu)良的受試生物。
具體實施例方式下述非限制性實施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例1a.河蜾贏蜚采集于早晨或午后低潮期，選擇河蜾贏蜚棲息密度較高處，用鐵鍬輕輕刮取5cm左右表層沉積物，放入網(wǎng)目為0.5mm的不銹鋼篩子中，篩出沉積物，收集端足類，將其放入盛有現(xiàn)場海水的塑料桶中，避免光照，迅速帶回實驗室；如需長途運輸，需充氧，以保證海水中氧氣充足。b.河蜾贏蜚培養(yǎng)基質(zhì)實驗室內(nèi)，選用30 X 20 X 15cm的方形塑料水槽；清洗培養(yǎng)容器后，用濃度為10%HCl溶液浸泡至少6小時，然后用淡水沖洗干凈。在容器中添加潔凈沉積物、潔凈海水，備用；培養(yǎng)沉積物:為采集自河蜾贏蜚的采集地，經(jīng)0.5mm的篩子篩分，去除石子和大顆粒物，過篩后的沉積物盛放在容器中，置于冰箱中-20°C凍存至少24h，去除沉積物中的其他生物。將凍存的沉積物放入烘箱中60°C至干燥或自然風干，碾碎后用于生物培養(yǎng)。
培養(yǎng)海水:其鹽度是將近岸海水經(jīng)砂濾、沉淀和20 μ m篩絹過濾與經(jīng)曝氣后的自來水調(diào)配所得。培養(yǎng)容器盛裝潔凈沉積物為2-3cm厚，添加海水體積為沉積物體積的3倍。c.河蜾贏蜚馴化條件挑選河蜾贏蜚個體，置于備好的培養(yǎng)容器中，投喂餌料，充氧；隔一天換水，隔天換水的體積為原添加海水體積的2/3。換 水后投喂餌料，充氧。每日升(降)溫度不超過:TC，升(降)鹽度不超過3，逐漸馴化到實驗室長期培養(yǎng)條件。所述餌料為:新月菱形藻(6X 106cell/ml)和青島大扁藻(6X 105cell/ml)組成的1:1溶液，附加合成館料(0.lmg/ml)。d.河蜾贏蜚培養(yǎng)條件實驗室長期培養(yǎng)條件為:溫度15 25°C，鹽度22 26，投喂餌料，充氧；隔一天換水，換水后投喂餌料；30 50d更換沉積物，分離成體和幼體。所述餌料為:新月菱形藻(6X 106cell/ml)和青島大扁藻(6X 105cell/ml)組成的I: I溶液，附加合成餌料(0.lmg/ml)。所述的合成餌料為對蝦蚤狀幼體階段或糠蝦期所用合成餌料。實施例2基本培養(yǎng)方法同實施例1，不同之處在于:所述步驟b的培養(yǎng)容器為20-25L圓形塑料盆。所述步驟c或d中，投喂餌料為:6X106Cell/ml的新月菱形藻。實施例3基本培養(yǎng)方法同實施例1，不同之處在于:所述步驟b的培養(yǎng)容器為20-25L圓形塑料盆。所述步驟c或d中,投喂館料為:6X 105cell/ml的青島大扁藻。實施例4基本培養(yǎng)方法同實施例1，不同之處在于:所述步驟b的培養(yǎng)容器為20-25L圓形塑料盆。所述步驟c或d中，投喂餌料為:青島大扁藻(6X105cell/ml)和新月菱形藻(6X106cell/ml) 二者等體積的混合液。
權(quán)利要求
1.一種端足類河蜾贏蜚的室內(nèi)培養(yǎng)方法，其特征在于，包括下述步驟: a.河蜾贏蜚采集 采集河蜾贏蜚棲息地5cm左右的表層沉積物，放入網(wǎng)目為0.5mm的篩子中，篩出沉積物，收集端足類，將其放入盛有現(xiàn)場海水的容器中，運輸過程中避光充氧； b.河蜾贏蜚培養(yǎng)基質(zhì) 培養(yǎng)容器盛裝2-3cm的潔凈沉積物，添加海水體積為沉積物體積的3倍； c.河蜾贏蜚馴化條件 挑選河蜾贏蜚個體，置于備好的培養(yǎng)容器中，投喂單胞藻餌料，充氧；隔一天換水，換水后投喂單胞藻餌料，充氧；每日升或降的溫度不超過:TC，升或降的鹽度不超過3，逐漸馴化到實驗室長期培養(yǎng)條件； d.河蜾贏蜚培養(yǎng)條件 溫度15 25°C，鹽度22 26，投喂單胞藻餌料，充氧；隔一天換水，換水后投喂單胞藻餌料；30 50d更換沉積物，分離成體和幼體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟b所述的培養(yǎng)容器，清潔后，用濃度為10% HCl溶液至少浸泡6小時，用水沖洗干凈。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟b所述的: 培養(yǎng)沉積物:采集自河蜾贏蜚的采集地，經(jīng)0.5mm的篩子篩分，去除石子和大顆粒物，過篩后的沉積物盛放在容器中，置于冰箱中_20°C凍存至少24h，去除沉積物中的其他生物；將凍存的沉積物放入烘箱中60°C至干燥或自然風干，碾碎后備用； 培養(yǎng)海水:其鹽度是將近岸海水經(jīng)砂濾、沉淀和20 μ m篩絹過濾與經(jīng)曝氣后的自來水調(diào)配所得。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟c或d中所述的換水的體積為原添加海水體積的2/3。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟c或d中所述的單胞藻餌料為下述的一種: 6X106cell/ml的新月菱形藻； 6X105cell/ml的青島大扁藻； 新月菱形藻(6X106cell/ml)和青島大扁藻(6X 105cell/ml)以等體積混合溶液； 新月菱形藻(6X106cell/ml)和青島大扁藻(6X 105cell/ml)以等體積混合溶液，附加合成餌料(0.lmg/ml);所述的合成餌料為對蝦蚤狀幼體階段或糠蝦期所用合成餌料。
全文摘要
本發(fā)明公開一種端足類河蜾蠃蜚的培養(yǎng)方法。具體步驟如下野外采集河蜾蠃蜚個體及采樣地海水；清洗培養(yǎng)容器后，在容器中添加潔凈沉積物、潔凈海水；挑選河蜾蠃蜚個體，置于準備好的培養(yǎng)容器中，每日升(降)溫度不超過3℃，升(降)鹽度不超過3，逐漸馴化到實驗室長期培養(yǎng)條件溫度15～25℃，鹽度22～26，投喂單胞藻餌料，附加合成餌料；隔一天換水，換水后投喂餌料；充氧；30-50d更換沉積物，分離成體和幼體。本發(fā)明培養(yǎng)得到的河蜾蠃蜚，可作為魚、蝦、蟹等經(jīng)濟生物的活餌料生物，也可作為海洋沉積物、海洋疏浚物和海水樣品毒性檢測的受試生物，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號A01K61/00GK103202245SQ20121001448
公開日2013年7月17日 申請日期2012年1月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月17日
發(fā)明者王睿睿, 閆啟侖, 關(guān)道明, 梁軍輝, 林志浩, 王超 申請人:國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心