專利名稱：千日紅試管花及其培養方法
技術領域：
本發明涉及一種組培花卉及其培養方法，具體涉及千日紅試管花及其培養方法。
背景技術：
千日紅WoAiosa)別名火球花、紅光球、千年紅,是覓科千日紅屬一年生草木花卉，原產亞洲熱帶，現我國及世界各地廣為栽培。千日紅花期可由6月直到11月霜前，且花色艷麗具光澤。其球狀花序主要由膜質苞片組成，花干后不凋，經久不變，故得名千日紅。千日紅植株低矮，花繁色濃，是配置秋季花壇、種植缽和花鏡的好材料，干后花朵群集一株，宛如繁星點點燦爛多姿。因其花期長，花色與花形經久不變，所以又是作鮮切花的良好材料。此外，其花序及全草皆可入藥，具有清肝、散結、止咳和定喘之效。千日紅多用種子繁殖，由于其種子體積太小，采收不易，即使采收到的種子再進行播種繁殖也很難保證其具有母株原有的優良性狀。因此，利用組培技術對千日紅進行快繁，不僅可在短期內大量繁殖，加速推廣應用，還可對其進行種質保存，是行之有效的途徑。鑒于千日紅花色艷麗、花期長且其花序觀賞及應用價值均較高，可作為試管開花研究及應用開發的優良植物材料，且目前尚未有對其進行試管開花研究的相關文獻報道。為此，研究探討千日紅種子離體快繁和成花誘導的適宜條件，為千日紅的大量繁殖推廣及其試管開花提供培養技術，具有較高的商業開發價值。在自然條件下，植物必須達到某種成熟階段時才能開花。雖然對于花芽的煥醒及開花誘導已進行了不少研究，但至今其機理還不是很清楚。自從1946年羅士韋首次報道田野菟絲子在試管中開花以來，植物組織培養技術已用于植物離體開花研究。利用現代植物離體培養技術，使植物開花過程在密閉的培養容器內完成，這就叫植物試管開花。目前國內外已報道了約30多個科的近百種植物可誘導試管開花，研究對象包括藥用植物和田間雜草等，其中以花卉研究得最多。試管開花由于具有生長條件相對可控、重復性強、組織培養的周期短等特點，可為研究植物由營養生長向生殖發育的轉變以及開花生理機制研究，提供更精準的研究手段和良好的實驗系統。由于試管開花不受季節限制，可以隨時誘導并且能縮短從瓶苗到成花的時間，因而可以大大降低栽培設施的投入和生產管理費用。此外，植物試管開花還是促使植物生物技術與育種結合的另一條途徑，通過該途徑，打破了植物在自然條件下的生活周期，縮短植物營養生長時間，使植物開花提前，從而縮短育種年限，更加有利于雜交選育出新的品系，加快品種改良進程。另外，將開花的試管苗接種到裝有色彩艷麗的果凍狀營養液的密封玻璃瓶中，只要給予一定的光照和溫度，就能正常生長，因而可開發成時尚禮品直接進入消費市場，豐富試管花卉種類，為這一產業注入新鮮血液，并為人們日益增長的鮮花需求開辟廣闊的市場前景。目前，在國內外，試管花卉很流行，并且已形成一定產業，但可以大量穩定開花的試管花卉商品還很少。

發明內容
本發明的目的是提供一種千日紅試管花及其培養方法。利用植物組織培養方法，通過對培養基成分的調控，提供一種培育千日紅試管花的培養基及組培苗試管內開花的培養方法。本發明的目的是通過以下方法實現的
本發明的千日紅試管花的培養方法，包括無菌苗培養、增殖培養、生根培養、瓶苗開花培養，其特征在于
(1)無菌苗培養將千日紅的種子用體積比為75%的酒精表面消毒30S，再用重量比為
O.1%的升汞消毒lOmin，無菌水沖洗3 5次后，接種到無菌苗培養基上；所述無菌苗培養基為改良 MS+0. 5 I. 5 mg/L 6-BA +0. I O. 4 mg/L NAA +5-20 mg/L PP333 +20 g/L 蔗 糖+ 6 g/L瓊脂粉；MS培養基為1962年，Murashige和Skoog公開的MS培養基；所述改良MS培養基在MS培養基中，將KNO3的用量改為950mg/L、NH4NO3的用量改為500mg/L，其余成分及用量不變；改良MS培養基的全部成分及用量如表I所示；所述6-BA，指6 —芐氨基嘌吟；所述KT，指6 —糠氨基嘌吟；所述PP333指重量比為15%的多效唑；
(2)增殖培養取步驟(I)無菌苗切成帶芽莖段，接種到增殖培養基中增殖培養，培養溫度為23 27 °C，光照強度為1000 1500 LX，光照時間為12 16 h/d ;所述增殖培養基為 MS+0. I I. O mg/L 6-BA +0. I O. 8 mg/L NAA +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L 瓊脂粉；
(3)生根培養將步驟(2)增殖的芽苗，接到生根培養基上誘導生根。培養溫度為23 27 °C，光照強度為1000 1500 LX，光照時間為12 16h/d ;所述生根培養基為1/2 MS+0. 5mg/L NAA +20 g/L 蔗糖 + 6 g/L 瓊脂粉；
(4)瓶苗開花培養從步驟(3)培養的植株中，切取3cm含頂芽和/或含腋芽的莖段，接種到瓶苗開花培養基中，在培養溫度為25°C 28°C，光照強度為1000 1500 LX,光照時間為12 16 h/d的培養條件下培養不少于60d ;所述瓶苗開花培養基為改良MS+4 10 mg/L亞精胺+20 g/L蔗糖+6 g/L瓊脂粉。本發明還保護由上述培養方法得到的千日紅試管花。表I:改良MS培養基成分及用量
權利要求
1.一種千日紅試管花的培養方法，包括無菌苗培養、增殖培養、生根培養、瓶苗開花培養，其特征在于 (1)無菌苗培養將千日紅的種子用體積比為75%的酒精表面消毒30S，再用重量比為O.1%的升汞消毒lOmin，無菌水沖洗3 5次后，接種到無菌苗培養基上；所述無菌苗培養基為改良 MS+0. 5 I. 5 mg/L 6-BA +0. I O. 4 mg/L NAA +5-20 mg/L PP333 +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L瓊脂粉；MS培養基為1962年，Murashige和Skoog公開的MS培養基；所述改良MS培養基在MS培養基中，將KNO3的用量改為950mg/L、NH4NO3的用量改為500mg/L，其余成分及用量不變；所述6-BA，指6 —芐氨基嘌吟；所述KT，指6 —糠氨基嘌吟；所述PP333指重量比為15%的多效唑； (2)增殖培養取步驟(I)無菌苗切成帶芽莖段，接種到增殖培養基中增殖培養，培養溫度為23 27 °C，光照強度為1000 1500 LX，光照時間為12 16 h/d ;所述增殖培養基為 MS+0. I I. O mg/L 6-BA +0. I O. 8 mg/L NAA +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L 瓊脂粉； (3)生根培養將步驟(2)增殖的芽苗，接到生根培養基上誘導生根；培養溫度為23 27 V，光照強度為1000 1500 LX,光照時間為12 16h/d ;所述生根培養基為1/2 MS+0. 5mg/L NAA +20 g/L 蔗糖+ 6 g/L 瓊脂粉； (4)瓶苗開花培養從步驟(3)培養的植株中，切取3cm含頂芽和/或含腋芽的莖段，接種到瓶苗開花培養基中，在培養溫度為25°C 28°C，光照強度為1000 1500 LX,光照時間為12 16 h/d的培養條件下培養不少于60d ;所述瓶苗開花培養基為改良MS+4 10 mg/L亞精胺+20 g/L蔗糖+6 g/L瓊脂粉。
2.根據權利要求I所述的一種千日紅試管花的培養方法，其特征在于所述瓶苗開花培養基為改良MS+7mg/L亞精胺+ 20 g/L蔗糖+ 6 g/L瓊脂粉。
3.根據權利要求I或2所述的一種千日紅試管花的培養方法，其特征在于所述瓶苗開花培養中，選擇的接種材料為健壯植株的頂部，切取長度為3cm含頂芽的莖段，接種到瓶苗開花培養基中。
4.由權利要求1、2、3所述的方法培養的千日紅試管花。
全文摘要
本發明涉及一種千日紅試管花及其培養方法。千日紅試管花的培養方法，包括無菌苗培養、增殖培養、生根培養、瓶苗開花培養。本發明的千日紅試管花培養方法，由于不受季節限制，隨時可以誘導千日紅試管苗開花，并且能夠縮短其營養生長時間使之提前開花，可用于千日紅雜交育種，從而加快了千日紅品種改良進程；本發明的千日紅試管花培養方法，首次解決了千日紅試管內難開花的問題，接種到工藝瓶內，可以制成試管花卉投放消費市場，開花率可以達到86%，為花卉愛好者提供了一種新的試管花；操作簡單，實用性強、推廣性好。
文檔編號A01H4/00GK102630568SQ20121012768
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月27日 優先權日2012年4月27日
發明者林慶良, 鄒娜 申請人:江西農業大學