專利名稱：一種細腳擬青霉的液體栽培方法
技術領域：
本發明涉及一種細腳擬青霉的栽培方法，更具體涉及一種細腳擬青霉的液體栽培方法。
背景技術：
細腳擬青霉tenuipes(Peck) Samson)是高雄山蟲草(Cbr辦ce/751takaomontana Yakushijiet Kumazaw)的無性型，以天然冬蟲夏草作對照分析表明，細腳擬青霉的主要化學組分如留醇類、糖醇類、生物堿、有機酸類和微量元素與前者十分相似，所含氨基酸種類亦相同，但多種氨基酸含量卻高于冬蟲夏草。在日本和韓國該菌已被成功作為冬蟲夏草替代品進行了開發利用。藥理作用方面的研究表明細腳擬青霉具有抗腫瘤、抗菌、抗氧化和免疫調節功能。據已報道的相關文獻，細腳擬青霉一般采用固體栽培的方式進 行，液體栽培的方式還未報道。
發明內容
本發明的目的在于提供一種細腳擬青霉的液體栽培方法，該方法相較于固體栽培，具有操作簡單，菌種的流動性好，接種后容易分散等優點。本發明采取的技術方案如下
將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，于25-28 °C搖瓶培養7-10d，制備液體菌種；取液體菌種，以5 - 20%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，培養條件為20-25 °C，培養30-40 d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基的組成為馬鈴薯5 - 30%，葡萄糖0. 5 - 5%，蛋白胨0. I - 2%，余量為水。本發明采用液體栽培，相較于固體栽培，其操作簡單，菌種的流動性好，接種后容易分散，不易污染及生長速度快等優點。
具體實施例方式實施例I
細腳擬青霉的液體栽培步驟如下
I)配制液體培養基。所述的液體培養基為馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基(200 g馬鈴薯去皮，切成小塊，加水煮沸20 min,八層紗布過濾，收集馬鈴薯濾液,加入葡萄糖20 g,蛋白胨10 g，用水定容至I L)，121°C，高壓蒸汽滅菌30 min。2)液體菌種制備。將細腳擬青霉斜面菌種活化，將活化的斜面菌種挑出按0. 5 I. Ocm2菌塊接種到裝有150 ml的所述液體培養基的三角瓶中，于28 °C, 230 rmp/min的搖床中培養7d，制備液體菌種。3)細腳擬青霉的液體靜置栽培。將液體菌種以10%接種量，接種到裝有4 L馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基的培養瓶中，于25°C培養35d。4)采收。經過35天培養，細腳擬青霉子實體可以采收，子實體干重的收率為2. 50gA子實體的長度可達到52mm左右(圖I)。待細腳擬青霉生長成熟后，不僅可采收子實體，而且其發酵液中含有大量具有生理活性的物質，如含有具有降膽固醇作用的葵內酯結構類似物等活性化合物。發酵液用旋轉蒸發儀真空濃縮，而后用乙酸乙酯萃取，真空濃縮成膏狀，再應用反相硅膠、凝膠和正相硅膠等層析技術可分離提取葵內酯等各類活性化合物。因此采用液體栽培細腳擬青霉具有良好的經濟效益。實施例2
細腳擬青霉的液體栽培步驟如下
將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，于25°C搖瓶培養10d，制備液體菌種；取液體菌種，以5%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，培養條件為23 °C，培養30d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基的組成為馬鈴薯5%，葡萄糖5%，蛋白胨2%，余量為水。實施例3
細腳擬青霉的液體栽培步驟如下
將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，于22°C搖瓶培 養8d，制備液體菌種；取液體菌種，以20%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，培養條件為20°C，培養40d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基的組成為馬鈴薯30%，葡萄糖0. 5%，蛋白胨0. 1%，余量為水。
權利要求
1.一種細腳擬青霉的液體栽培方法，其特征在于將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，于25-28 °〇搖瓶培養7-10d，制備液體菌種；取液體菌種，以5 — 20%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，培養條件為20-25°C，培養30-40 d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基的組成為馬鈴薯5 - 30%，葡萄糖0.5 - 5%，蛋白胨0. I - 2%，余量為水。
全文摘要
本發明具體涉及一種細腳擬青霉的液體栽培方法。該方法通過將液體菌種，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基中，培養條件為20-25℃，培養30-40d；所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養基的組成為馬鈴薯5－30%，葡萄糖0.5－5%，蛋白胨0.1－2%，余量為水。本發明采用液體栽培，相較于固體栽培，其操作簡單，菌種的流動性好，接種后容易分散，不易污染及生長速度快等優點。
文檔編號A01G1/04GK102657030SQ201210162110
公開日2012年9月12日 申請日期2012年5月24日 優先權日2012年5月24日
發明者鄭永標, 黃建忠 申請人:福建師范大學