專利名稱：一種高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法
技術領域：
本發明涉及ー種水稻中間材料的選育方法，具體說明了通過分子標記輔助選擇、花藥培養加速穩定，選育高抗稻瘟病水稻中間材料的方法。
背景技術：
當前，稻瘟病是危害粳稻最嚴重的病害之一，由稻瘟病引起的糧食損失占全世界糧食損失的11% 30%，而品種抗病性的利用研究則被公認為是病害綜合防治的根本策略。很多育種工作者通過各種方法想要選育高抗稻瘟病品種，但都收效甚微，其主要原因在于用于雜交配組的親本材料對稻瘟病的抗性不強，很難起到高抗稻瘟病的效果
發明內容
·本發明的目的在于提供一種高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，通過現有的一些水稻品種和種質資源，創造出ー批富含稻瘟病抗性基因的水稻中間材料。為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案為一種高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，通過不同基因位點之間稻瘟病抗性基因的雜交，然后通過花藥培養、分子標記輔助選擇加速穩定，快速高效選育高抗稻瘟病的水稻中間材料。具體的操作步驟如下
(1)抗稻瘟病材料收集根據現有的水稻品種和種質資源所攜帯的稻瘟病抗性基因進行分類，構建最原始的抗稻瘟病親本材料圃；
(2)根據分類的結果，選擇具有不同稻瘟病抗性基因的材料作為親本雜交，通過花藥培養打破連鎖，完成同一染色體抗性基因的聚合，然后再通過分子標記輔助選擇，從中選擇同時聚合了父母本稻瘟病抗性基因的中間材料；
(3)以聚合了稻瘟病抗性基因的中間材料為母本，以攜帶新的稻瘟病抗性基因的水稻資源為父本，將母本與父本進行雜交，從中選擇聚合更多稻瘟病抗性基因的中間材料。其中所述攜帶新的稻瘟病抗性基因的水稻資源包括攜帯新的稻瘟病抗性基因的現有水稻品種和中間材料，本實施例中使用的是中間材料。作為本發明的進ー步改進，重復循環步驟(3)，不斷實現新稻瘟病抗性基因的聚合，選育出高抗稻瘟病的水稻中間材料。這樣可以達到更好的效果。與現有技術相比，本發明的有益效果如下
I、本發明的技術方案是通過不同基因位點之間稻瘟病抗性基因的雜交，不斷聚合稻瘟病抗性基因，選育出的中間材料對稻瘟病抗性極強。2、本發明的技術方案選育出的中間材料，稻瘟病抗性極為突出，可以廣泛用于綜合性狀優良但稻瘟病抗性不足水稻品種的改良。3、本發明的技術方案是通過花藥培養打破稻瘟病抗性基因與其他基因位點上感稻瘟病基因之間的連鎖，聚合稻瘟病抗性基因。當選抗稻瘟病中間材料的基因遺傳背景極為豐富，作為親本配制的雜交后代對稻瘟病的抗性極為突出，更易選到高抗稻瘟病的水稻新品種。


圖I為本發明中第6染色體稻瘟病抗性基因的重組聚合流程 圖2為本發明中第12染色體稻瘟病抗性基因的重組聚合流程 圖3為本發明中高抗稻瘟病水稻中間材料的抗性基因聚合流程 圖4為本發明中重復循環步驟(3)的高抗稻瘟病水稻中間材料的抗性基因聚合流程圖。
具體實施方式
·下面結合具體實施例對本發明作進ー步的詳細說明。綜述，一種高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，包括如下步驟
(1)抗稻瘟病材料收集根據現有的水稻品種和種質資源所攜帯的稻瘟病抗性基因進行分類，構建最原始的抗稻瘟病親本材料圃；
(2)根據分類的結果，選擇具有不同稻瘟病抗性基因的材料作為親本雜交，通過花藥培養打破連鎖，完成同一染色體抗性基因的聚合，然后再通過分子標記輔助選擇，從中選擇同時聚合了父母本稻瘟病抗性基因的中間材料；
(3)以聚合了稻瘟病抗性基因的中間材料為母本，以攜帶新的稻瘟病抗性基因的水稻資源為父本，將母本與父本進行雜交，從中選擇聚合更多稻瘟病抗性基因的中間材料。上述攜帯新的稻瘟病抗性基因的水稻資源包括攜帯新的稻瘟病抗性基因的現有水稻品種和中間材料，本發明中攜帯新的稻瘟病抗性基因指的是與母本具有不同的抗性基因。下面實施例I和實施例2中均使用的是中間材料。實施例I:以下結合附圖(圖1，圖2，圖3)進ー步說明攜帯5個稻瘟病抗性基因(表I)的高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法
表I本發明所述抗性基因來源
I抗性基因I盛 TETEP Pi-4 12
魔王谷 Pi-13 6_
IR24 Pi-20 12谷梅2號Pi-25 6谷掩4號Pigm 6
I、如圖I所示，同一染色體上的基因以及它們所控制的性狀存在ー種連鎖現象，重組合類型明顯低于親組合類型，基因間距離越近，連鎖強度越強。要想實現稻瘟病抗性基因的聚合，首先要打破連鎖，完成同一染色體抗性基因的聚合。通過魔王谷(Pi-13，chr6)與谷梅2號(Pi-25，chr6)雜交得到F1代，借助花藥培養打破基因連鎖、加速穩定，使用分子標記鑒定后代是否含有稻瘟病抗性基因，選留聚合了 Pi-13、Pi-25稻瘟病抗性基因的中間材料KDW001，然后再與谷梅4號(Pigm，chr6)雜交得到F1代將雜交后代再經過花藥培養、分子標記輔助選擇，選留同時聚合了 Pi_13、Pi-25、Pigm稻瘟病抗性基因的中間材料KDW101，實現第6染色體稻瘟病抗性基因的重組聚合。2、如圖 2 所示，以 IR24 (Pi-20, chrl2)為母本，以 TETEP (Pi-4, chrl2)為父本，將母本與父本雜交配組，通過花藥培養、分子標記輔助選擇，選留聚合了 Pi-4、Pi-20稻瘟病抗性基因的中間材料KDW102，實現第12染色體稻瘟病抗性基因的重組聚合。3、如圖3所示，以當選的中間材料KDWlOl為母本，以KDW102為父本，將母本與父本雜交配組，選留聚合了 Pi-4、Pi-13、Pi-20、Pi-25、Pigm五個稻瘟病抗性基因的中間材料KDW201。KDW201田間鑒定苗稻瘟0級，穗莖瘟0級；
KDW201接種鑒定接種鑒定稻瘟病6個生理小種分別為0、0、0、0、
0、0，穗莖瘟0-1級。抗性鑒定結果表明，當選的聚合5個稻瘟病抗性基因的水稻中間材料KDW201對稻瘟病的抗性表現為高抗。實施例2:與實施例I基本相同，所不同的是增加了重復循環步驟(3)，以下結合附·圖4進ー步說明重復循環步驟(3)，不斷實現新稻瘟病抗性基因的聚合，選育出高抗稻瘟病水稻中間材料的例子。新稻瘟病抗性基因來源窄葉青8號，第8染色體含有抗性基因Pi-11。以KDW201 (Pi-13、Pi-25, Pigm, chr6 ;Pi_4、Pi-20, chrl2)為母本，以窄葉青 8號(Pi-11，chr8)為父本，將母本與父本雜交得到F1代，通過花藥培養、分子標記輔助選擇，選留聚合了 6個稻瘟病抗性基因的中間材料KDW301。KDW301田間鑒定苗稻瘟0級，穗莖瘟0級；
KDW301接種鑒定接種鑒定稻瘟病6個生理小種分別為0、0、0、0、
0、0級，穗莖瘟0級。抗性鑒定結果表明，通過重復循環步驟(3)，選育出的中間材料KDW301聚合了新的稻瘟病抗性基因Pi-II，稻瘟病的抗性得到進ー步提高，表現為高抗稻瘟病。
權利要求
1.一種高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，其特征在于，通過不同基因位點之間稻 瘟病抗性基因的雜交，然后通過花藥培養、分子標記輔助選擇加速穩定，快速高效選育高抗稻瘟病的水稻中間材料。
2.根據權利要求I所述的高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，其特征在于，該方法 包括如下步驟 (1)抗稻瘟病材料收集根據現有的水稻品種和種質資源所攜帶的稻瘟病抗性基因 進行分類，構建最原始的抗稻瘟病親本材料圃； (2)根據分類的結果，選擇具有不同稻瘟病抗性基因的材料作為親本雜交，通過 花藥培養打破連鎖，完成同一染色體抗性基因的聚合，然后再通過分子標記輔助選擇，從中選擇同時聚合了父母本稻瘟病抗性基因的中間材料； (3)以聚合了稻瘟病抗性基因的中間材料為母本，以攜帶新的稻瘟病抗性基因的水 稻資源為父本，將母本與父本進行雜交，從中選擇聚合更多稻瘟病抗性基因的中間材料。
3.根據權利要求2所述的高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，其特征在于，重復循 環步驟(3)，不斷實現新稻瘟病抗性基因的聚合，選育出高抗稻瘟病的水稻中間材料。
4.根據權利要求2所述的高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，其特征在于，步驟(3)中所述的新的稻瘟病抗性基因的水稻資源指的是具有與步驟(3)中所述母本中的稻瘟病抗性基因不同的中間材料或者水稻品種。
全文摘要
本發明公開了一種高抗稻瘟病水稻中間材料的選育方法，具體說明了通過分子標記輔助選擇、花藥培養加速穩定，選育高抗稻瘟病水稻中間材料的方法。本發明優點在于通過不同基因位點之間稻瘟病抗性基因的雜交，不斷聚合稻瘟病抗性基因，選育出的中間材料對稻瘟病抗性極強。當選聚合稻瘟病抗性基因的中間材料，稻瘟病抗性極為突出，可以廣泛用于綜合性狀優良但稻瘟病抗性不足水稻品種的改良。通過花藥打破了稻瘟病抗性基因與其他基因位點上感稻瘟病基因之間的連鎖，聚合了稻瘟病抗性基因。當選的稻瘟病抗性材料基因遺傳背景極為豐富，作為親本配制的雜交后代對稻瘟病的抗性極為突出，更易選到高抗稻瘟病的水稻新品種。
文檔編號A01H1/02GK102783407SQ20121028998
公開日2012年11月21日 申請日期2012年8月15日 優先權日2012年8月15日
發明者余波, 刁立平, 周義文, 景德道, 曾生元, 李闖, 林添資, 盛生蘭, 錢華飛, 龔紅兵 申請人:江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所, 江蘇豐源種業有限公司