專利名稱：茯苓乙醇提取物用于生物農(nóng)藥的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及茯苓乙醇提取物的一種新用途，具體涉及茯苓乙醇提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
棉鈴蟲(Heliothis armigera)為鱗翅目夜蛾科昆蟲，寄主范圍廣，繁殖能力強，是亞洲、大洋洲、非洲及歐洲各地為害棉花及其他作物的主要害蟲之一，是世界性的農(nóng)作物害蟲。自上個世紀90年代以來，棉鈴蟲在我國黃河、長江、遼河流域及新疆等主要棉產(chǎn)區(qū)大發(fā)生年頻率明顯增加，致棉花減產(chǎn)率高達35 50%，有些地區(qū)的部分田地甚至絕收。
小麥穎枯病菌(Septoria nodorum)是引發(fā)小麥穎枯病的主要病原菌之一,主要為害小麥未成熟穗部和莖桿，也為害葉片和葉鞘。穗部染病后，先在頂端或上部小穗上發(fā)生， 穎殼上開始為深褐色斑點，后變?yōu)榭莅咨U展到整個穎殼，其上長滿菌絲和小黑點(分生孢子器)；莖節(jié)染病后呈褐色病斑，能侵入導(dǎo)管并將其堵塞，使節(jié)部畸變、扭曲，上部莖桿折斷而死；葉片染病后，初為長梭形淡褐色小斑，后擴大成不規(guī)則形大斑，邊緣有淡黃暈圈， 中央灰白色，其上密生小黑點，劍葉被害扭曲枯死。葉鞘發(fā)病后變黃，使葉片早枯。小麥穎枯病危害較大，已成為我國小麥生產(chǎn)上的一類重要病害，多雨年份和潮濕地區(qū)發(fā)生尤其嚴重。
早疫病菌(Alternaria solani)是引發(fā)茄科植物早疫病的病原菌，主要為害西紅柿、馬鈴薯、辣椒、茄子等蔬菜。多在苗期發(fā)病，葉尖或頂芽產(chǎn)生暗褐色水潰狀病斑，引起腐爛，手感滑溜，幼苗上部腐爛后，形成無頂苗，甚至爛到床土面，致使苗期就死亡，危害很大。
為了防治病害，人們一方面通過選育抗病品種來增加抗性，一方面進行化學(xué)防治。 前者有一定的局限性，后者會帶來環(huán)境污染。因此開發(fā)高效、低毒、低殘留的新型農(nóng)藥尤其是生物源農(nóng)藥越來越受到重視。
茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw. ) Wolf的干燥菌核，別名茯菟、茯靈、 茯奪、伏苓、伏菟、松腴、絳晨伏胎、云苓、茯兔、松薯、松木薯、松苓，性味甘、淡、平，歸心經(jīng)、 肺經(jīng)、脾經(jīng)、腎經(jīng)，主治小便不利、水腫脹滿、痰飲咳逆、嘔吐、脾虛食少、泄瀉、心悸不安、失眠健忘、遺精白濁，現(xiàn)代研究表明其具有利尿、抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、變形桿菌、 抗腫瘤、使環(huán)磷酰胺所致大白鼠白細胞減少加速回升、提高免疫等作用。但未有其在農(nóng)藥方面的應(yīng)用。發(fā)明內(nèi)容
為了開發(fā)新的生物源農(nóng)藥，本發(fā)明提供了茯苓乙醇提取物在農(nóng)藥方面的用途，主要涉及毒殺棉鈴蟲(Heliothis armigera)、抗小麥穎枯病(Septoria nodorum)及抗植物早疫病(Alternaria solani)。
茯苓乙醇提取物在應(yīng)用時，先用DMSO溶解制備成母液。
當(dāng)應(yīng)用在防治棉鈴蟲時，將上述母液用O. 025%吐溫20稀釋至茯苓乙醇提取物的濃度為60 μ g/cm2。
當(dāng)應(yīng)用在防治茄科植物早疫病和小麥穎枯病時，將上述母液用O. 025%吐溫20稀釋至獲茶乙醇提取物的濃度為20 200ppm(mg/L)。
本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點利用茯苓乙醇提取物作為殺蟲、抗菌劑，能有效殺蟲、抑制植物病原菌；茯苓乙醇提取物來源廣泛；茯苓乙醇提取物對人畜無毒，易降解，不會產(chǎn)生化學(xué)農(nóng)藥使用過程中產(chǎn)生的“三R”，對環(huán)境的污染較小。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明茯苓乙醇提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用進行詳細說明。
供試樣品茯苓藥材購于南京藥業(yè)股份有限公司。
實驗儀器高速萬能粉碎機；立式自動壓力蒸汽滅菌器；搖床；超聲波震蕩儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；恒溫水浴鍋；電子天平；智能人工氣候箱；真空泵。
提取方法茯苓藥材用8倍量70%乙醇(W/V)回流提取2小時后過濾，濾渣再用8 倍量70%乙醇回流提取2小時后過濾，濾液合并，減壓濃縮，60°C下干燥，得褐色浸膏。
母液配置取茯苓乙醇提取物(褐色浸膏)用DMSO溶解，制備成濃度為10mg/mL 的母液。
測試溶液的配置使用時將母液用O. 025% Tween 20稀釋至適當(dāng)濃度。
實施例一
供試昆蟲棉鈴蟲(Heliothisarmigera)、小菜蛾(Plutella xylostella)和豆蟲牙(Aphis craccivora),由湖北省農(nóng)科院提供。
試驗方法以小菜蛾和棉鈴蟲為試蟲時，卵用10%的甲醛溶液消毒15min，采用經(jīng)改進的北京農(nóng)科 院梁革梅的飼料配方，室內(nèi)人工飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件溫度25°C，相對濕度為 755^-855"^將樣品稀釋至一定濃度后涂布于人工飼料表面。米用96孔細胞培養(yǎng)板,每孔加入人工飼料300 μ L和稀釋藥液20 μ L，一周后檢查實驗結(jié)果。初篩時藥液濃度為1. Omg/ mL,復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進行調(diào)整。
以豆蚜為試蟲時采用浸泡法。初篩濃度為1. Omg/mL，直接將長有豆蚜的豆苗浸泡在藥液中，一周后檢查結(jié)果。復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進行調(diào)整。
試驗結(jié)果茯苓乙醇提取物在濃度為60 μ g/cm2時對棉鈴蟲有100%毒殺作用，對小菜蛾和豆蚜無毒殺作用。
實施例二
供試菌終極腐霉菌(Pythium ultimum)、灰霉菌(Botrytis cinerea)、小麥穎枯病原菌(Septoria nodorum)、早疫病病原菌(Alternaria Solani)、小麥赤霉病原菌 (Fusarium culmorum)、立枯病病原菌(Rhizoctonia solani),由湖北省農(nóng)科院提供。
試驗方法半固體培養(yǎng)基法。采用96孔細胞培養(yǎng)板，每孔加入90 μ L培養(yǎng)基和待測真菌的菌絲體或孢子的混合物，每孔加入藥液量為 ο μ L。初篩濃度為20ppm，復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進行調(diào)整。
試驗結(jié)果茯苓乙醇提取物在濃度為20ppm時對小麥穎枯病原菌和早疫病病原菌有較強的抑制作用，抑制率為77%。
權(quán)利要求
1.茯苓乙醇提取物在農(nóng)藥方面的用途。
2.權(quán)利要求1所述的茯苓乙醇提取物為茯苓藥材用60% 100%乙醇回流提取后過濾、濃縮所得的褐色浸膏。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物用于毒殺棉鈴蟲。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物在應(yīng)用時，先采用DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用O. 025%吐溫20溶液稀釋至茯苓乙醇提取物的應(yīng)用濃度為60 μ g/cm2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物可以抑制小麥穎枯病原菌，用于防治小麥穎枯病。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物可以抑制早疫病病原菌，用于防治茄科植物早疫病。
7.根據(jù)權(quán)利要求5-6所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物在應(yīng)用時，先采用DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用O. 025%吐溫20稀釋至茯苓乙醇提取物的應(yīng)用濃度為20ppm。
全文摘要
本發(fā)明公開了茯苓乙醇提取物在農(nóng)藥方面的用途，尤其涉及茯苓乙醇提取物在毒殺棉鈴蟲、抗小麥穎枯病和植物早疫病方面的用途。本發(fā)明所述茯苓乙醇提取物能有效毒殺棉鈴蟲、抑制小麥穎枯病及植物早疫病病原菌，擴大了生物農(nóng)藥的選擇范圍。
文檔編號A01P3/00GK102986738SQ20121054993
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月18日
發(fā)明者馬麗, 李維林, 王開梅, 顧玉誠, 劉玲玲 申請人:江蘇省中國科學(xué)院植物研究所