專利名稱：一種橡皮樹組培快繁方法
技術領域：
本發明涉及一種植物的繁殖方法，尤其是一種橡皮樹組培快繁方法。
背景技術：
橡皮樹原產印度和馬來西亞，因其革質葉片寬厚，觀賞價值極高，栽培管理容易而深受人們的喜愛，是著名的室內觀葉及園林綠化樹種。橡皮樹常采用扦插或高壓，成活率較高，但繁殖速度慢，所需母本材料較多，造成資源的極大浪費。2005年《甘肅農業科技》第I期陳韜等撰寫的《橡皮樹的組織培養和快速繁殖》以橡皮樹莖段為試驗外植體材料，其誘導叢生芽及叢生芽增殖系數相對較低，生根培養方法較復雜。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種橡皮樹組培快繁方法，可以克服現有技術中外植體誘導叢生芽增殖系數較低及生根培養方法復雜的缺點，簡化了生根煉苗程序，達到繁殖速度快、節約生產成本并適用于工廠化規模育苗的目的。為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是一種橡皮樹組培快繁方法，該方法包括以下步驟
1)選取外植體取橡皮樹莖尖為外植體，消毒后備用；
2)莖尖誘導培養將 橡皮樹莖尖最外層去除苞葉后消毒，剝去莖尖苞葉及至第4片葉片，將下切口至節處留O. 5cm并切成45度角后，接種在莖尖誘導培養基上，將接種的外植體置于溫度22土1°C、光照14h/d、光照強度1500-20001x的培養室內，培養10天后橡皮樹莖尖下切口處周圍形成團狀黃色愈傷組織，連續培養20天后愈傷組織逐漸膨大，培養至愈傷組織長至F2-3cm ；
3)叢生芽誘導培養將長至F2-3cm的愈傷組織切除基部疏松的愈傷組織后，轉接到叢生芽誘導培養基上，置于溫度25土 1°C、光照12h/d、光照強度2000-30001x的培養室內，30天后愈傷組織上分化叢生芽(通過30天培養誘導單芽平均誘導叢生芽增殖系數達到20. 2)，橡皮樹組培苗開始形成；
4)叢生芽增殖繼代將叢生芽接入叢生芽增殖繼代培養基上，置于溫度25土1°C、光照12h/d、光照強度2000-30001x的培養室內，每30-40天繼代轉管一次，繼代5次生成生長健壯的試管苗(在繼代第5次時其叢生芽增殖系數平均達到28. 5)；
5)壯苗生根將生長健壯的試管苗采用MS培養基進行生根培養，30天后長成帶根的橡皮樹幼苗；
6)煉苗移栽將帶根的橡皮樹幼苗進行煉苗移栽，即培養成橡皮樹組培苗。步驟2)的莖尖誘導培養基為MS基本培養基+6-BA1. O mg/L +ΝΑΑ0.1 mg/L +蔗糖30g/L+瓊脂粉6g/L。步驟3)所用的叢生芽誘導培養基和步驟4)所用的叢生芽增殖繼代培養基為MS基本培養基 +ZT2. O mg/L +NAAO.1 mg/L + 蔗糖 30g/L+ 瓊脂粉 6g/L。本發明提供的一種橡皮樹組培快繁方法，有益效果如下1、橡皮樹以莖尖為外植體，將下切口切成45度角，便于外植體與培養基充分接觸，增大吸收面積，充分供應叢生芽分化所需營養成份。2、橡皮樹在叢生芽誘導中外源分裂素采用ZT比6-BA增殖速度快，隨著繼代的次數增加，在繼代第5次時增殖系數達到28. 5，且試管苗生長健壯，縮短培養時間，節約生產成本。3、隨著繼代次數逐漸增加，橡皮樹叢生芽內源激素不斷積累，導致生根率大大增力口，所以橡皮樹生根培養不需添加生長激素，僅采用基本培養基MS即可，經過30天的生根培養單株平均粗度增加1. 83mm,平均高度增加1. 59cm,平均節間長度增加3. 33mm,生根率達到100%且主根平均達到5. 6條側根明顯。煉苗移栽采用園土 +蛭石，園土和蛭石的質量比為2 :1，移栽成活率高達99. 5%。3、可以克服現有技術中外植體誘導叢生芽增殖系數較低及生根培養方法復雜的缺點，簡化了生根煉苗程序，達到繁殖速度快、節約生產成本并適用于工廠化規模育苗的目的。
具體實施例方式一種橡皮樹組培快繁方法，該方法包括以下步驟
1)選取外植體選取當年生生長健壯無病蟲害的橡皮樹枝條莖尖為外植體，用自來水沖洗切口處白色膠狀物質，然后用O. 1%PVP浸泡lOmin，最后晾干材料表面水分備用；
2)莖尖誘導培養將橡皮樹莖尖最外層去除苞葉后，置于質量濃度為5%的洗衣液中攪拌清洗lOmin，置于流水沖洗lh，在超凈工作臺上將去除苞葉的橡皮樹莖尖先用質量濃度為75%酒精浸泡30s，再用質量濃度為O. 1%升汞消毒12min，最后用無菌水沖洗3次，再將莖尖置于無菌濾紙上吸干表面多余水分，剝去莖尖苞葉及至第4片葉片，將下切口至節處留O. 5cm并切成45度角后，接種在莖尖誘導培養基上，將接種的外植體置于溫度22±1°C、光照14h/d、光照強度1500-20001x的培養室內，培養10天后橡皮樹莖尖下切口處周圍形成團狀黃色愈傷組織，連續培養20天后愈傷組織逐漸膨大，培養至愈傷組織長至F2-3cm ；
3)叢生芽誘導培養將長至F2-3cm的愈傷組織切除基部疏松的愈傷組織后，轉接到叢生芽誘導培養基上，置于溫度25土1°C、光照12h/d、光照強度2000-30001x的培養室內，30天后愈傷組織上分化叢生芽(通過30天培養誘導單芽平均誘導叢生芽增殖系數達到20. 2)，橡皮樹組培苗開始形成；
4)叢生芽增殖繼代將叢生芽接入叢生芽增殖繼代培養基上，置于溫度25土1°C、光照12h/d、光照強度2000-30001x的培養室內，每30-40天繼代轉管一次，繼代5次生成生長健壯的試管苗(在繼代第5次時其叢生芽增殖系數平均達到28. 5)；
5)壯苗生根將生長健壯的試管苗采用MS培養基進行生根培養，30天后長成帶根的橡皮樹幼苗；
6)煉苗移栽將帶根的橡皮樹幼苗進行煉苗移栽，即培養成橡皮樹組培苗。

步驟2)的莖尖誘導培養基為MS基本培養基+6-BA1. O mg/L +NAAO.1 mg/L +蔗糖30g/L+瓊脂粉6g/L。
步驟3)所用的叢生芽誘導培養基和步驟4)所用的叢生芽增殖繼代培養基為MS基本培養基+ZT2.0 mg/L +NAAO.1 mg/L + 蔗糖 30g/L+瓊脂粉 6g/L。
權利要求
1.一種橡皮樹組培快繁方法，其特征在于該方法包括以下步驟 1)選取外植體取橡皮樹莖尖為外植體，消毒后備用； 2)莖尖誘導培養將橡皮樹莖尖最外層去除苞葉后消毒，剝去莖尖苞葉及至第4片葉片，將下切口至節處留O. 5cm并切成45度角后，接種在莖尖誘導培養基上，將接種的外植體置于溫度22土 1°C、光照14h/d、光照強度1500-20001x的培養室內，培養10天后橡皮樹莖尖下切口處周圍形成團狀黃色愈傷組織，連續培養20天后愈傷組織逐漸膨大，培養至愈傷組織長至F2-3cm時； 3)叢生芽誘導培養將長至F2-3cm的愈傷組織切除基部疏松的愈傷組織后，轉接到叢生芽誘導培養基上，置于溫度25 ± I °C、光照12h/d、光照強度2000-30001x的培養室內，30天后愈傷組織上分化叢生芽，橡皮樹組培苗開始形成； 4)叢生芽增殖繼代將叢生芽接入叢生芽增殖繼代培養基上，置于溫度25土1°C、光照12h/d、光照強度2000-30001x的培養室內，每30-40天繼代轉管一次，繼代5次生成生長健壯的試管苗； 5)壯苗生根將生長健壯的試管苗采用MS培養基進行生根培養，30天后長成帶根的橡皮樹幼苗； 6)煉苗移栽將帶根的橡皮樹幼苗進行煉苗移栽，即培養成橡皮樹組培苗。
2.根據權利要求1所述的一種橡皮樹組培快繁方法，其特征在于步驟2)的莖尖誘導培養基為MS基本培養基+6-BA1. O mg/L +ΝΑΑ0.1 mg/L +蔗糖30g/L+瓊脂粉6g/L。
3.根據權利要求1或2所述的一種橡皮樹組培快繁方法，其特征在于步驟3)所用的叢生芽誘導培養基和步驟4)所用的叢生芽增殖繼代培養基為MS基本培養基+ZT2. O mg/L +NAAO.1 mg/L + 鹿糖 30g/L+ 瓊脂粉 6g/L。
全文摘要
一種橡皮樹組培快繁方法，該方法包括以下步驟1)選取外植體2)莖尖誘導培養；3)叢生芽誘導培養，橡皮樹組培苗開始形成；4)叢生芽增殖繼代繼代5次生成生長健壯的試管苗；5)壯苗生根將生長健壯的試管苗采用MS培養基進行生根培養，30天后長成帶根的橡皮樹幼苗；6)煉苗移栽將帶根的橡皮樹幼苗進行煉苗移栽，即培養成橡皮樹組培苗。本發明提供的一種橡皮樹組培快繁方法，可以克服現有技術中外植體誘導叢生芽增殖系數較低及生根培養方法復雜的缺點，簡化了生根煉苗程序，達到繁殖速度快、節約生產成本并適用于工廠化規模育苗的目的。
文檔編號A01H4/00GK103053416SQ20121057276
公開日2013年4月24日 申請日期2012年12月26日 優先權日2012年12月26日
發明者馬曉波, 張國禹, 黃桂云, 胡梅香, 邱利文, 吳笛, 張海波, 楊蘭芳, 汪磊 申請人:中國長江三峽集團公司, 長江三峽生態園林有限公司