一種沉水植物黑藻的人工種子制作方法
【專利摘要】本發明是一種沉水植物黑藻的人工種子制備方法。包括有如下步驟：1）取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物；2）切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗；3）將帶有節間的側芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營養液+NAA混合而成的凝膠液中；4）用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，固化反應后取出，用無菌蒸餾水漂洗，終止反應即得黑藻人工種子。本發明省去植物組織培養，且無需在無菌條件下進行，大大減少制備的工序，大大降低了成本，縮短周期，并且成活率高。
【專利說明】一種沉水植物黑藻的人工種子制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種沉水植物的繁殖方法，是將人工種子技術應用于沉水植物繁殖的方法，特別是一種沉水植物黑藻的人工種子制作方法，屬于沉水植物黑藻的人工種子制作方法的創新技術。
【背景技術】
[0002]人工種子技術是將植物離體培養中產生的體細胞胚或能發育成完整植株的分生組織(芽、愈傷組織、胚狀體等)包埋在含有營養物質和具有保護功能的外殼內形成的在適宜條件下能夠發芽出苗的顆粒體。1981年Lawrence等研究了芹萊和茜筐體細胞包裹的液膠包埋帶技術以后，便有越來越多的人工種子方面的報道。1987年我國開始將人工種子納入國家高科技發展規劃(863計劃)，對一些經濟作物如橡膠樹和一些我國南方的特有果樹的人工種子進行研究。據王宏霞等的研究(2011)，結果表明，以MS液體培養基+海藻酸鈉(3%)+ 活性炭(0.5%)+ 多菌靈(0.3%)+ 苯甲酸鈉(0.2%)+ 殼聚糖(0.05%)+6-BA(0.5mg/L)+NAA(lmg/L)制作的半夏人工種子，其萌發率最高，達到80% ;據安彥杰等的研究(2009)，以海藻酸鈉+MS+蔗糖+ IBA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L制作的菹草人工種子在滅菌自來水中萌發率可達80%，且轉株率達20%。國內外的研究和應用表明，人工種子與天然種子相t匕，具有繁殖速度快、生產周期短，可工廠化大規模制備、貯藏、迅速推廣、生產不受季節限制等優點。目前，人工種子的研究范圍主要集中于一些重要的糧食作物和經濟作物，藥用植物，以及觀賞植物等，但在沉水植物的應用較少，僅應用在菹草的繁殖。中國專利說明書CN101120655公開了一種沉水植物菹草人工種子制作方法，其制做步驟是:首先是在在含激素的固體培養基上進行誘導生芽，待芽長到一定長度時，將誘導出的芽置于盛海藻酸鈉+MS+蔗糖+ IBA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L的凝膠液中，無菌條件下，用滴管將含有芽的凝膠滴入CaCl2中進行固化 反應，最后用無菌水漂洗，即制成菹草人工種子。但該方法首先在含激素的固體培養基上進行誘導生芽，即通過植物組織培養方法誘導生芽，植物組織培養技術的實驗條件和操作要求高，該制備方法繁瑣、風險高、周期長、應用價值受到了一定得限制。

【發明內容】

[0003]本發明的目的在于考慮上述問題而提供一種簡潔、快速的沉水植物黑藻的人工種子制備方法。本發明省去植物組織培養，且無需在無菌條件下進行，大大減少制備的工序，大大降低了成本,縮短周期,并且成活率高。
[0004]本發明的技術方案是:本發明的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，包括有如下步驟:
1)取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物；
2)切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗；
3)將帶有節間的側芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營養液+萘乙酸混合而成的凝膠液中；
4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，固化反應后取出，用無菌蒸餾水漂洗，終止反應即得黑藻人工種子。
[0005]上述凝膠液是由1.5%海藻酸鈉+50%霍格蘭氏營養液+ 0.lmg/L萘乙酸混合而成的凝膠液。
[0006]上述步驟4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，IOmin后取出。
[0007]上述步驟4)用無菌蒸餾水漂洗4~6次。
[0008]上述步驟I)用自來水沖洗0.8 h~1.2 h。
[0009]上述步驟2)切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2~3次。
[0010]上述制成的黑藻人工種子直徑約為5~6mm,百粒重為6~8g。
[0011]上述將制成的人工種子放入自來水中培養，一周后芽逐漸長大突破種皮，兩周后長出新根。
[0012]本發明克服現有的沉水植物菹草人工種子制備方法繁瑣、風險高、周期長、應用價值低等缺點，提供一種簡潔、快速的沉水植物黑藻人工種子制備方法，省去植物組織培養，且無需在無菌條件下進行，大大減少制備的工序，而且由霍格蘭仕營養液作為人工胚乳，大大降低了成本，縮短周期，并 且成活率達到80%。本發明是一種操作簡單、周期短、成本低、應用性強、成活率高的沉水植物黑藻的人工種子制備方法。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1是本發明黑藻人工種子外觀結構示意圖；
圖2是本發明黑藻人工種子制作過程圖；
圖3是本發明黑藻人工種子長芽突破種皮圖；
圖4是本發明黑藻人工種子長根圖。
【具體實施方式】
[0014]實施例:
本發明的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，包括有如下步驟:
1)取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物；
2)切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗；
3)將帶有節間的側芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營養液+萘乙酸(NAA)混合而成的凝膠液中；
4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，固化反應后取出，用無菌蒸餾水漂洗，終止反應即得黑藻人工種子。
[0015]上述凝膠液是由1.5%海藻酸鈉+50%霍格蘭氏營養液+ 0.lmg/L萘乙酸混合而成的凝膠液。上述霍格蘭氏營養液是通用的營養液。
[0016]上述步驟4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，IOmin后取出。
[0017]上述步驟4)用無菌蒸餾水漂洗4~6次。本實施例中，用無菌蒸餾水漂洗5次。[0018]上述步驟I)用自來水沖洗0.8 h~1.2 h。本實施例中，用自來水沖洗1.0 h。
[0019]上述步驟2)切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2~3次。本實施例中，用蒸餾水沖洗3次。
[0020]上述制成的黑藻人工種子直徑約為5~6mm,百粒重為6~8g。
[0021]上述將制成的人工種子放入自來水中培養，一周后芽逐漸長大突破種皮，兩周后長出新根。
[0022]本實施例中，圖1中，海藻酸鈉I作為包埋基質,形成的人工種皮；霍格蘭仕營養液2作為人工胚乳；帶有芽的節間的植物供體10。用海藻酸鈉I作為包埋基質，將黑藻側芽和頂芽與霍格蘭仕營養液2包埋并在CaCl2溶液中進行固化反應形成人工種子。用水凝膠性的海藻酸鈉作為包埋基質，它具有生物活性、無毒、成本低、包埋制作工藝簡單等優點，在CaCl2溶液中進行固化反應和離子交換，同時氯化鈣有利于向培養物供氧，提高人工種子發芽率和貯藏性，霍格蘭仕營養液作為人工胚乳，為植物新陳代謝和生長發育提供營養物質，加入NAA促進人工種子生根。
[0023]圖2中，取生長旺盛的黑藻種苗3，用自來水沖洗I h，用來除去植物表面的浮游生物，切去沖洗干凈植株的所有根4及葉5，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2-3次，將帶有節間的側芽和頂芽6切下，將切下帶有節間的側芽和頂芽的植物供體置于盛海藻酸鈉+霍格蘭仕營養液+ NAA 0.1 mg/L的凝膠液7中，用滴管將含有芽的凝膠滴入CaCl2溶液8中進行固化反應，固化反應結束后，用無菌蒸餾水漂洗5次，即得黑藻人工種子9。
[0024]圖3表示經過一周的生長,黑藻人工種子芽突破種皮的示意圖。圖4中表示經過兩周的生長，黑藻人工種子長`出根的示意圖。
【權利要求】
1.一種沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于包括有如下步驟: 1)取黑藻苗，用水沖洗除去植物表面的浮游生物； 2)切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗； 3)將帶有節間的側芽和頂芽切下，置于由海藻酸鈉+霍格蘭氏營養液+萘乙酸混合而成的凝膠液中； 4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，固化反應后取出，用無菌蒸餾水漂洗，終止反應即得黑藻人工種子。
2.根據權利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述凝膠液是由1.5%海藻酸鈉+50%霍格蘭氏營養液+ 0.lmg/L萘乙酸混合而成的凝膠液。
3.根據權利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟4)用滴管將含有黑藻芽的凝膠液滴入CaCl2中進行固化反應，IOmin后取出。
4.根據權利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟4)用無菌蒸餾水漂洗4~6次。
5.根據權利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟I)用自來水沖洗0.8 h~1.2 h。
6.根據權利要求1所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述步驟2)切去植株的所有根及葉，取生長旺盛的植株，用蒸餾水沖洗2~3次。
7.根據權利要求1所述的 沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述制成的黑藻人工種子直徑約為5~6mm,百粒重為6~8g。
8.根據權利要求7所述的沉水植物黑藻的人工種子制備方法，其特征在于上述將制成的人工種子放入自來水中培養，一周后芽逐漸長大突破種皮，兩周后長出新根。
【文檔編號】A01H4/00GK103477979SQ201310400769
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月6日 優先權日:2013年9月6日
【發明者】閆志強, 劉黽, 陳章和, 劉燕, 吳小業, 劉俊 申請人:華南師范大學, 嶺南園林股份有限公司