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一種鉤吻的快速繁殖方法

文檔序號:216985閱讀:923來源:國知局
一種鉤吻的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明公開了一種鉤吻的快速繁殖方法,包括無菌芽的獲得,腋芽的誘導,叢生芽的增殖,生根誘導,煉苗訓化,大田移栽等步驟。本發明方法可以快速獲得大量的鉤吻幼苗,有效降低生產成本。
【專利說明】一種鉤吻的快速繁殖方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物組織培養的快繁方法,屬于植物【技術領域】。
【背景技術】
[0002]鉤吻,又名大茶藥、斷腸草等,鉤吻是馬錢子科植物胡蔓藤,多年生常綠藤本植物。主要分布在廣西、云南、貴州、湖南、福建、江西及浙江等地;性溫,味苦、辛;有大毒。外用具有祛風散疾、消腫止痛、攻毒殺蟲的功能,主治疥傲、濕疹、疲疲、癰腫、療瘡、體癬、跌打損傷、風濕痹痛、神經痛,抑制腫瘤細胞生長、局部用于擴隴、免疫調節等方面。中國鉤吻已分離出17種單體,其中以鉤吻素己毒性最強。

【發明內容】

[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種鉤吻的快速繁殖方法,由該方法所制備得到的鉤吻組培幼苗生長周期短,成活率高,可控性好,可以規模化的進行生產。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
選用鉤吻生長健壯的莖段,用洗衣粉浸泡三分鐘,自來水沖洗25分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精處理30秒,0.1 %的升汞消毒12分鐘,無菌水沖洗4-5次,接種在B5+PP333
0.5mg/L腋芽誘導培養基上,將誘導出來的腋芽接入增殖培養基B5+IBAlmg/L+赤霉素0.6mg/L上進行增殖培養,培養條件為光照20001x,光期12h,暗期12h,溫度25°C,濕度50%~60%,30天后轉入生根培養基MS+NAA0.21 mg/L中誘導生根,培養條件為光照40001x,光期14h,暗期10h,溫度27°C,濕度50%~60%,試管苗生根后長約5cm進行煉苗移栽,大田大規模生產。
[0005]采用本發明培養出來的試管苗長勢好,生長速度快,成活率達95%,周期短,操作可控,可進行工業擴大化生產。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述,但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
【具體實施方式】
[0007]實施例1
選用鉤吻生長健壯的莖段,用洗衣粉浸泡三分鐘,自來水沖洗25分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精處理30秒,0.1%的升汞消毒12分鐘,無菌水沖洗4-5次,接種在B5+PP333 0.3mg/L腋芽誘導培養基上,將誘導出來的腋芽接入增殖培養基B5+IBA0.5mg/L+赤霉素lmg/L上進行增殖培養,培養條件為光照20001x,光期12h,暗期12h,溫度25°C,濕度50%~60%,30天后轉入生根培養基MS+NAA0.2mg/L中誘導生根,培養條件為光照40001x,光期14h,暗期10h,溫度27°C,濕度50%~60%,試管苗生根后長約5cm進行煉苗移栽,大田大規模生產,成活率達80%。
[0008]實施例2選用鉤吻生長健壯的莖段,用洗衣粉浸泡三分鐘,自來水沖洗25分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精處理30秒,0.1%的升汞消毒12分鐘,無菌水沖洗4-5次,接種在B5+PP333lmg/L腋芽誘導培養基上,將誘導出來的腋芽接入增殖培養基B5+IBA1.5mg/L+赤霉素lmg/L上進行增殖培養,培養條件為光照2000lx,光期12h,暗期12h,溫度25°C,濕度50%~60%,30天后轉入生根培養基MS+NAA1 mg/L中誘導生根,培養條件為光照40001x,光期14h,暗期10h,溫度27°C,濕度50%~60%,試管苗生根后長約5cm進行煉苗移栽,大田大規模生產,成活率達85%。
[0009]實施例3
選用鉤吻生長健壯的莖段,用洗衣粉浸泡三分鐘,自來水沖洗25分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精處理30秒,0.1%的升汞消毒12分鐘,無菌水沖洗4-5次,接種在B5+PP333 0.5mg/L腋芽誘導培養基上,將誘導出來的腋芽接入增殖培養基B5+IBAl.5mg/L+赤霉素lmg/L上進行增殖培養,培養條件為光照20001x,光期12h,暗期12h,溫度25°C,濕度50%~60%,30天后轉入生根培養基MS+NAA0.2 mg/L中誘導生根,培養條件為光照40001x,光期14h,暗期10h,溫度27°C,濕度50%~60%,試管苗生根后長約5cm進行煉苗移栽,大田大規模生產,成活率達90%。
[0010]實施例4
選用鉤吻生長健壯的莖段,用洗衣粉浸泡三分鐘,自來水沖洗25分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精處理30秒,0.1%的升汞消毒12分鐘,無菌水沖洗4-5次,接種在B5+PP333 lmg/L腋芽誘導培養基上,將誘導出來的腋芽接入增殖培養基B5+IBA0.5mg/L+赤霉素lmg/L上進行增殖培養,培養條件為光照20001χ,光期12h,暗期12h,溫度25°C,濕度50%~60%,30天后轉入生根培養基MS+NAA0.2mg/L中誘導生根,培養條件為光照40001x,光期14h,暗期10h,溫度27°C,濕度50%~60%,試管苗生根后長約5cm進行煉苗移栽,大田大規模生產,成活率達92%。
【權利要求】
1.一種鉤吻的快速繁殖方法,其步驟如下: (1)外植體的處理:采用常規的組織培養方法對鉤吻帶芽莖段進行消毒處理; (2)誘導培養:取步驟(I)獲得的無菌帶芽莖段接種在B5+PP3330.5mg/L腋芽誘導培養基上叢生芽誘導; (3)增殖培養:取步驟(2)誘導出來的叢生芽接入增殖培養基B5+IBAlmg/L+赤霉素.0.6mg/L上進行增殖培養; (4)生根誘導:取步驟(3)培養30天的叢生芽轉入生根培養基MS+NAA0.2-1 mg/L中誘導生根; (5)煉苗移栽到大田進行大規模培養。
2.根據權利要求1所述的一種鉤吻的快速繁殖方法,其特征是:鉤吻的芽經消毒處理,接種在B5+PP3330.3-lmg/L腋芽誘導培養基上,將誘導出來的腋芽接入增殖培養基Β5+ΙΒΑ0.5-1.5mg/L+赤霉素lmg/L上進行增殖培養30天,轉入生根培養基MS+NAA0.2-Img/L中誘導生根,試管苗生根后長約5cm進行煉苗移栽,大田大規模生產。
3.根據權利要求1所述的一種鉤吻的快速繁殖方法,其特征是:所述的消毒處理為:選用鉤吻生長健壯的莖段,用洗衣粉浸泡三分鐘,自來水沖洗25分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精處理30秒,0.1%的升汞消毒12分鐘,無菌水沖洗4-5次。
4.根據權利要求1所述的一種鉤吻的快速繁殖方法,其特征是:誘導增殖的條件為光照20001x,光期12h,暗期12h,溫度25°C,濕度50%-60% ;生根的條件為光照40001x,光期14h,暗期10h,溫度270C,濕度50%-60%。
5.根據權利要求1所述的一種鉤吻的快速繁殖方法,其特征是:培養基中加入的PP333和GA3均為過濾滅菌。
6.根據權利要求1所述的一種鉤吻的快速繁殖方法,其特征是:煉苗移栽過程中,首先在室內培養,去掉封口膜,敞口放置在培養室培養一周,然后使用無菌沙質黃土在光照培養箱中培養兩周,光照強度80001x,溫度27°C,光期12h,暗期12h,濕度40%_60%,從光照培養基中取出的小苗,洗取根部的培養基,定植于鋪好的苗床上,蓋上薄膜和陰網,一周后去掉薄膜,兩周后去掉陰網,組培苗移栽25天以上就可以移栽大田或推廣應用。
【文檔編號】A01H4/00GK103444544SQ201310423647
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年9月17日 優先權日:2013年9月17日
【發明者】楊存 申請人:南京通澤農業科技有限公司
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