一種胡頹子的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明研究了一種胡頹子的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、生根培養、煉苗移栽等步驟，本發明方法所制備的胡頹子繁殖率好，增殖系數高，生長周期短，可以在短期內獲得大量的胡頹子幼苗。
【專利說明】一種胡頹子的快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及胡頹子組織培養的快繁方法，屬于植物【技術領域】。

【背景技術】
[0002]胡頹子別名半春子、甜棒槌、雀兒酥、羊奶子,屬胡頹子科常綠灌木。果熟時味甜可食。根、葉、果實均供藥用。主要分布在北半球溫帶和亞熱帶地區，原產中國，中國有2屬41種。抗寒力比較強，在華北南部，可露地越冬，能忍耐零下8°C左右的絕對低溫，生長適溫為24_34°C，耐高溫酷暑。生長在山坡上的疏林下面及陰濕山谷中，但不怕陽光曝曬，也具有較強的耐陰力。對土壤要求不嚴，在中性、酸性和石灰質土壤上均能生長，耐干旱和瘠薄，不耐水澇。喜高溫、濕潤氣候，其耐鹽性、耐旱性和耐寒性佳，抗風強。在我國分布于江蘇、浙江、安徽、江西、福建、湖南、湖北、四川、貴州、陜西、云南等地，胡頹子屬植物中主要化學成分有揮發油、萜類、生物堿、黃酮等，藥理活性主要有降血糖，降血脂、抗脂質氧化、抗炎鎮痛、免疫等。繁殖方法常用播種和扦插繁殖，種子發芽率只有50%左右，組織培養方法用于胡頹子的繁殖，目前尚未研究。


【發明內容】

[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種胡頹子的快速繁殖方法，由該方法所制備得到的胡頹子繁殖率好，增殖系數高，生長周期短，可以在短期內獲得大量的胡頹子幼苗。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取胡頹子帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗50min，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理lOmin，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的胡頹子帶芽莖段接入培養基配方為B5+NAA0.lmg/L+ZTlmg/1+精胺0.2mmol/L+10mg/L四環素誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5.8，光照30001x，誘導出來的芽放入增殖培養基 Β5+ΝΑΑ0.lmg/L+6-BA0.3mg/L+GA30.lmg/L,附加鹿糖 30g/L,瓊脂 6g/L,PH5.8，光照40001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基B5+NAA0.2mg/L+3%活性炭，將根長約5cm的試管苗洗凈根部培養基，栽植于椰子殼:泥炭土:珍珠巖=2:2:1的育苗盤中，噴灑700倍的多菌靈藥液，培養數天，待生長穩定后移植入大田。
[0005]采用本發明制備的胡頹子成活率為94%，周期短，產量大，能耗少，利于大規模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
[0007]實施例1
取胡頹子帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗50min，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理lOmin，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的胡頹子帶芽莖段接入培養基配方為B5+NAA0.lmg/L+ZTlmg/1+精胺0.2mmol/L+10mg/L四環素誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5.8，光照30001x，誘導出來的芽放入增殖培養基 Β5+ΝΑΑ0.05mg/L+6-BA0.25mg/L+GA30.lmg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/L，PH5.8，光照40001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基B5+NAA0.lmg/L+3%活性炭，生根后的胡頹子試管苗移栽到大田進行煉苗培養，胡頹子成活率為91%。
[0008]實施例2
取胡頹子帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗50min，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理lOmin，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的胡頹子帶芽莖段接入培養基配方為B5+NAA0.lmg/L+ZTlmg/1+精胺0.2mmol/L+10mg/L四環素誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5.8，光照30001x，誘導出來的芽放入增殖培養基 Β5+ΝΑΑ0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.lmg/L,附加鹿糖 30g/L,瓊脂 6g/L,PH5.8，光照40001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基B5+NAA0.3mg/L+3%活性炭，生根后的胡頹子試管苗移栽到大田進行煉苗培養，胡頹子成活率為90%。
[0009]實施例3
取胡頹子帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗50min，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理lOmin，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的胡頹子帶芽莖段接入培養基配方為B5+NAA0.lmg/L+ZTlmg/1+精胺0.2mmol/L+10mg/L四環素誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5.8，光照30001x，誘導出來的芽放入增殖培養基 Β5+ΝΑΑ0.lmg/L+6-BA0.25mg/L+GA30.lmg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/L，PH5.8，光照40001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基B5+NAA0.lmg/L+3%活性炭，生根后的胡頹子試管苗移栽到大田進行煉苗培養，胡頹子成活率為92%。
[0010]實施例4
取胡頹子帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗50min，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理lOmin，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的胡頹子帶芽莖段接入培養基配方為B5+NAA0.lmg/L+ZTlmg/1+精胺0.2mmol/L+10mg/L四環素誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，PH5.8，光照30001x，誘導出來的芽放入增殖培養基 Β5+ΝΑΑ0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.lmg/L,附加鹿糖 30g/L,瓊脂 6g/L,PH5.8，光照40001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基B5+NAA0.3mg/L+3%活性炭，生根后的胡頹子試管苗移栽到大田進行煉苗培養，胡頹子成活率為93%。
【權利要求】
1.一種胡頹子的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、生根培養、煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)取胡頹子帶芽的莖段，按照常規的消毒方法對其進行滅菌處理； (2)取步驟(I)滅菌處理過的胡頹子帶芽莖段接入培養基配方為B5+NAA0.1mg/L+ZTlmg/1+精胺0.2mmol/L+10mg/L四環素誘導培養基中進行芽誘導培養，附加鹿糖30g/L,瓊脂 6g/L，PH5.8，光照 30001x ； (3)取步驟(2)誘導出來的芽放入增殖培養基B5+NAA0.05-0.lmg/L+6-BA0.25-0.5mg/L+GA30.lmg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6g/L，PH5.8，光照 40001x ； (4)取步驟(3)增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基Β5+ΝΑΑ0.1-0.3mg/L+3%活性炭; (5)取步驟(4)生根后的胡頹子試管苗移栽到大田進行煉苗培養。
2.按照權利要求1所述的一種胡頹子的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述胡頹子無菌芽的獲得為，取胡頹子帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗50min，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理lOmin，無菌水沖洗5_7遍。
3.按照權利要求1所述的一種胡頹子的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(2)誘導培養基采用了精胺0.2mmol/L和10mg/L四環素，精胺可以促進不定芽的發生，四環素可以消除內生菌，四環素不耐高溫，需要等培養基冷卻至60°C以下進行過濾滅菌。
4.按照權利要求1所述的一種胡頹子的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)增殖培養基中附加了 GA30.lmg/L，能促進無菌苗的增殖。
5.按照權利要求1所述的一種胡頹子的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中的生根培養基中加入3%活性炭，可以促進生根，并防止褐化。
6.按照權利要求1所述的一種胡頹子的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中胡頹子的煉苗培養方法為將根長約5cm的試管苗洗凈根部培養基,栽植于椰子殼:泥炭土:珍珠巖=2:2:1的育苗盤中，噴灑700倍多菌靈藥液，培養數天，待生長穩定后移植入大田。
【文檔編號】A01H4/00GK104255451SQ201410446410
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月4日 優先權日:2014年9月4日
【發明者】張金芳, 楊存 申請人:南京標科生物科技有限公司