一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括大葉鐵線蓮無菌外植體的獲得、芽的誘導(dǎo)、叢生芽的誘導(dǎo)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等步驟，本發(fā)明方法所制備的大葉鐵線蓮生產(chǎn)周期短，增值率高，可以在短期內(nèi)獲得大量的大葉鐵線蓮幼苗。
【專利說明】一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 大葉鐵線蓮，Aerac/ei/b/ia 毛茛科，別稱氣死大夫、草牡丹直立型 草本或半灌木，莖、葉、花、果均被不同程度的白色絨毛，三出復(fù)葉對生，總?cè)~柄粗壯。聚傘花 序，兩性花，藍(lán)色，花有花萼無花瓣，花萼基部成管狀，上部反卷，藍(lán)紫色，較易于與本屬其它 種相區(qū)別。瘦果倒卵形，紅棕色，宿存花柱羽毛狀。在我國分布于湖南、湖北、陜西、河南、安 徽、浙江北部、江蘇、山東、河北、山西、遼寧、吉林東部。具較強(qiáng)的耐陰能力，喜生于生于山 坡、林下、草叢或山溝邊。日本、朝鮮也有分布。全草及根供藥用，有祛風(fēng)除濕、解毒消腫的 作用。治風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、結(jié)核性潰瘍、瘺管。以播種和分株繁殖為主。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種大葉鐵線蓮的快速繁殖方法，由該方法所 制備大葉鐵線蓮，生產(chǎn)周期短，增殖率高，可以短期內(nèi)獲得大量的大葉鐵線蓮幼苗。
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的： 取大葉鐵線蓮的帶芽莖段，剪去葉片，流水沖洗〇.5h，超凈工作臺上70 %的酒精處 理30s，10%次氯酸鈉處理14min無菌水沖洗7次，消毒處理過的大葉鐵線蓮帶芽莖段接 入PT+6-BA0. 5mg/L+NAA0. 2mg/L+10%胡蘿卜汁培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/ L，瓊脂7g/L，pH5.8,光照16001x，溫度22±2°C，濕度75%，誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基 PT+6-BA1-L 5mg/L+2, 4-DO. 05mg/L+NAAL 5-2mg/L 進(jìn)行叢生芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖 30g/L，瓊 脂7g/L，pH5. 8,光照25001x，溫度24±2°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+0. 03-0. 05ml/ LNAA中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂5g/L，pH5. 8,光照40001x，溫度24±2°C，將有 根試管苗在室溫下煉苗7天，打開瓶塞煉苗4天，晾干后移栽于透水良好的碎磚和粗椰糠混 合基質(zhì)中，置于陰涼處，保持較高的空氣濕度和適當(dāng)透風(fēng)，溫度25°C，濕度90%，隱蔽度90%。
[0005] 采用本發(fā)明制備的大葉鐵線蓮成活率高，周期短，產(chǎn)量大，污染小，利于大規(guī)模種 植。
[0006] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不 局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】 [0007] 實(shí)施例1 取大葉鐵線蓮的帶芽莖段，剪去葉片，流水沖洗〇.5h，超凈工作臺上70 %的酒精處 理30s，10%次氯酸鈉處理14min無菌水沖洗7次，消毒處理過的大葉鐵線蓮帶芽莖段接 入PT+6-BA0. 5mg/L+NAA0. 2mg/L+10%胡蘿卜汁培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/ L，瓊脂7g/L，pH5. 8,光照16001x，溫度22±2°C，濕度75%，誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基 PT+6-BAlmg/L+2, 4-DO. 05mg/L+NAAl. 5mg/L 進(jìn)行叢生芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 7g/ L，pH5. 8,光照25001x，溫度24±2°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+0. 03ml/LNAA中進(jìn) 行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂5g/L，pH5. 8,光照40001x，溫度24±2°C，將有根試管苗 在室溫下煉苗7天，打開瓶塞煉苗4天，晾干后移栽于透水良好的碎磚和粗椰糠混合基質(zhì) 中，置于陰涼處，保持較高的空氣濕度和適當(dāng)透風(fēng)，溫度25°C，濕度90%，隱蔽度90%，成活率 88%。
[0008] 實(shí)施例2 取大葉鐵線蓮的帶芽莖段，剪去葉片，流水沖洗〇.5h，超凈工作臺上70 %的酒精處 理30s，10%次氯酸鈉處理14min無菌水沖洗7次，消毒處理過的大葉鐵線蓮帶芽莖段接 入PT+6-BA0. 5mg/L+NAA0. 2mg/L+10%胡蘿卜汁培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/ L，瓊脂7g/L，pH5. 8,光照16001x，溫度22±2°C，濕度75%，誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基 PT+6-BA1. 5mg/L+2, 4-DO. 05mg/L+NAA2mg/L 進(jìn)行叢生芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 7g/ L，pH5. 8,光照25001x，溫度24±2°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+0. 04ml/LNAA中進(jìn) 行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂5g/L，pH5. 8,光照40001x，溫度24±2°C，將有根試管苗 在室溫下煉苗7天，打開瓶塞煉苗4天，晾干后移栽于透水良好的碎磚和粗椰糠混合基質(zhì) 中，置于陰涼處，保持較高的空氣濕度和適當(dāng)透風(fēng)，溫度25°C，濕度90%，隱蔽度90%，成活率 86%。
[0009] 實(shí)施例3 取大葉鐵線蓮的帶芽莖段，剪去葉片，流水沖洗〇.5h，超凈工作臺上70 %的酒精處 理30s，10%次氯酸鈉處理14min無菌水沖洗7次，消毒處理過的大葉鐵線蓮帶芽莖段接 入PT+6-BA0. 5mg/L+NAA0. 2mg/L+10%胡蘿卜汁培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/ L，瓊脂7g/L，pH5. 8,光照16001x，溫度22±2 °C，濕度75%，誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基 PT+6-BA1. 5mg/L+2, 4-DO. 05mg/L+NAA2mg/L 進(jìn)行叢生芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 7g/ L，pH5. 8,光照25001x，溫度24±2°C，增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+0. 05ml/LNAA中進(jìn) 行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖20g/L，瓊脂5g/L，pH5. 8,光照40001x，溫度24±2°C，將有根試管苗 在室溫下煉苗7天，打開瓶塞煉苗4天，晾干后移栽于透水良好的碎磚和粗椰糠混合基質(zhì) 中，置于陰涼處，保持較高的空氣濕度和適當(dāng)透風(fēng)，溫度25°C，濕度90%，隱蔽度90%，成活率 90%。
【權(quán)利要求】
1. 一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括大葉鐵線蓮無菌外植體的獲得、芽 的誘導(dǎo)、叢生芽的誘導(dǎo)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽，其主要步驟如下： (1) 取大葉鐵線蓮的帶腋芽的莖段，對其進(jìn)行消毒處理； (2) 取步驟（1)消毒處理過的大葉鐵線蓮帶芽莖段接入PT+6-BA0. 5mg/L+NAA0. 2mg/ L+10%胡蘿卜汁培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5. 8,光照16001x， 溫度22 ±2 °C，濕度75%; (3) 取步驟（2)誘導(dǎo)出來的腋芽放入培養(yǎng)基PT+6-BA1-1. 5mg/L+2, 4-DO. 05mg/ L+NAA1. 5-2mg/L進(jìn)行叢生芽的誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5. 8,光照25001x，溫度 24±2°C ; (4) 取步驟（3)增殖后的芽苗接入培養(yǎng)基1/2MS+0. 03-0. 05ml/LNAA中進(jìn)行生根誘導(dǎo)， 附加蔗糖 20g/L，瓊脂 5g/L，pH5. 8,光照 40001x，溫度 24±2°C ; (5) 取步驟（4)生根后的試管苗進(jìn)行煉苗移栽。
2. 按照權(quán)利要求1所述的一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于：步 驟（1)中所述大葉鐵線蓮無菌帶芽莖段的獲得為，取大葉鐵線蓮的帶芽莖段，剪去葉片，流 水沖洗0. 5h，超凈工作臺上70%的酒精處理30s，10%次氯酸鈉處理14min無菌水沖洗7次。
3. 按照權(quán)利要求1所述的一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于：步 驟（2)中大葉鐵線蓮幼苗莖段的誘導(dǎo)中附加了天然提取物胡蘿卜汁，對芽的誘導(dǎo)具有一定 的促進(jìn)作用。
4. 按照權(quán)利要求1所述的一種大葉鐵線蓮組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于：步 驟（4)中大葉鐵線蓮的煉苗移栽方法為將有根試管苗在室溫下煉苗7天，打開瓶塞煉苗4 天，晾干后移栽于透水良好的碎磚和粗椰糠混合基質(zhì)中，置于陰涼處，保持較高的空氣濕度 和適當(dāng)透風(fēng)，溫度25°C，濕度90%，隱蔽度90%。
【文檔編號】A01H4/00GK104186346SQ201410463225
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司