一種樹頭菜的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明研究了一種樹頭菜的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、生根培養、試管苗的調控等步驟，本發明方法所制備的樹頭菜繁殖率高，增殖系數好，生長周期短，可以在短期內獲得大量的樹頭菜幼苗。
【專利說明】 一種樹頭菜的快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及樹頭菜組織培養的快繁方法，屬于植物【技術領域】。

【背景技術】
[0002]樹頭菜，Craiera山柑科,魚木屬，分布在緬甸、老挺、柬埔寨、錫金、印度、越南以及廣西、云南、廣東等地，生長于海拔1500米的地區，常生長在濕潤地區，外形似香椿，是一種刺藤喬木的傘狀嫩尖，肥大鮮嫩，一般多在春季采摘。具有較高的食用和藥用價值，民間對它的利用已有悠久的歷史，嫩莖葉是一種口味獨特、營養價值豐富的野生蔬菜，嫩莖葉鮮樣中含大量的粗蛋白，總氨基酸，人體必需氨基酸，遠遠高于普通蔬菜，且所測定的11種礦質元素的含量普遍高于普通蔬菜的平均值，尤其是P、K、Ca、Mg、Fe的含量是普通蔬菜的數倍。根葉入藥，可清熱解毒，舒筋活絡，極具開發利用價值。目前樹頭菜大致采用野外采集，沒有進行規模化的種植，繁殖方式主要是自然繁殖，目前有關于其扦插繁殖的研究，但結果并不理想，這就阻礙了樹頭菜的開發利用，組培繁殖有助于擴大樹頭菜的資源化，為樹頭菜的繁殖提供理論參考。


【發明內容】

[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種樹頭菜的快速繁殖方法，由該方法所制備得到的樹頭菜繁殖率好，增殖系數高，生長周期短，可以在短期內獲得大量的樹頭菜幼苗。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取樹頭菜帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗45min，超凈工作臺上70%酒精處理30s，次氯酸鈉處理12min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的樹頭菜帶芽莖段接入培養基配方為WPM+IAA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度25°C，誘導出來的芽放入增殖培養基 WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.2mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照30001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基1/2WPM+IBA0.2mg/L+烯效唑0.4mg/L+蔗糖20g/L，生根后的樹頭菜試管苗接入WPM培養基中附加硝普鈉4mg/L對其進行調控。
[0005]采用本發明制備的樹頭菜生根率為95%，周期短，產量大，次生代謝物含量高，利于大規模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
取樹頭菜帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗45min，超凈工作臺上70%酒精處理30s，次氯酸鈉處理12min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的樹頭菜帶芽莖段接入培養基配方為WPM+IAA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度25°C，誘導出來的芽放入增殖培養基 WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.2mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照30001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基1/2WPM+IBA0.lmg/L+烯效唑0.2mg/L+蔗糖20g/L，生根后的樹頭菜試管苗接入WPM培養基中附加硝普鈉3mg/L對其進行調控，生根率為87%。
[0008]實施例2
取樹頭菜帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗45min，超凈工作臺上70%酒精處理30s，次氯酸鈉處理12min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的樹頭菜帶芽莖段接入培養基配方為WPM+IAA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度25°C，誘導出來的芽放入增殖培養基 WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.2mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照30001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基1/2WPM+IBA0.2mg/L+烯效唑0.5mg/L+蔗糖20g/L，生根后的樹頭菜試管苗接入WPM培養基中附加硝普鈉5mg/L對其進行調控，生根率為89%。
[0009]實施例3
取樹頭菜帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗45min，超凈工作臺上70%酒精處理30s，次氯酸鈉處理12min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的樹頭菜帶芽莖段接入培養基配方為WPM+IAA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度25°C，誘導出來的芽放入增殖培養基 WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.2mg/L,附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，pH5.8，光照30001x，增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基1/2WPM+IBA0.2mg/L+烯效唑0.3mg/L+蔗糖20g/L，生根后的樹頭菜試管苗接入WPM培養基中附加硝普鈉4mg/L對其進行調控，生根率為92%。
【權利要求】
1.一種樹頭菜的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、生根培養、試管苗的調控，其主要步驟如下: (1)取樹頭菜帶芽的莖段，按照常規的消毒方法對其進行滅菌處理； (2)取步驟(I)滅菌處理過的樹頭菜帶芽莖段接入培養基配方為WPM+IAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L誘導培養基中進行芽誘導培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度 25 0C ； (3)取步驟(2)誘導出來的芽放入增殖培養基WPM+NAA0.lmg/L+6-BA0.5mg/L+GA30.2mg/L，附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6.5g/L，ρΗ5.8，光照 30001χ ； (4)取步驟(3)增殖培養出來的叢生芽放入生根培養基1/2WPM+IBA0.1-0.2mg/L+烯效唑 0.2-0.5mg/L+ 蔗糖 20g/L ； (5)生根后的樹頭菜試管苗接入WPM培養基中附加硝普鈉3-5mg/L對其進行調控。
2.按照權利要求1所述的一種樹頭菜的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述樹頭菜無菌芽的獲得為，取樹頭菜帶芽莖段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗45min，超凈工作臺上70%酒精處理30s，次氯酸鈉處理12min，無菌水沖洗5_7遍。
3.按照權利要求1所述的一種樹頭菜的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)增殖培養基中附加了 GA30.2mg/L，能促進無菌苗的生長及增殖，且GA3采用過濾滅菌。
4.按照權利要求1所述的一種樹頭菜的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中的生根培養基中加入烯效唑，可以促進生根和伸長生長。
5.按照權利要求1所述的一種樹頭菜的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中加入了硝普鈉對試管苗進行調控，硝普鈉可以調控次生代謝物質的合成和植物的抗逆性生長，且采用過濾滅菌。
【文檔編號】A01H4/00GK104255484SQ201410463277
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月12日 優先權日:2014年9月12日
【發明者】楊存 申請人:南京通澤農業科技有限公司