一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括川楝無(wú)菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽等步驟，本發(fā)明采用組織培養(yǎng)方法可以培育優(yōu)質(zhì)種苗，縮短培養(yǎng)周期，保存種質(zhì)資源，為川楝的開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)。
【專利說(shuō)明】一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及川楝組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]川楝，Melia 11seWa/?,又名金鈴子、川楝實(shí)，中藥材，為楝科落葉喬木川楝樹的成熟果實(shí)。產(chǎn)于中國(guó)甘肅、湖北、四川、貴州和云南等省，其他省區(qū)廣泛栽培；生于土壤濕潤(rùn)，肥沃的雜木林和疏林內(nèi)，以四川產(chǎn)者為最佳，分布于日本、中南半島。川楝子性寒，味苦，是行氣藥的一種，喜溫暖濕潤(rùn)氣候，喜陽(yáng)，不耐蔭蔽，在海拔IlOOm以下均可生長(zhǎng)。有舒肝行氣止痛，驅(qū)蟲的藥效，用于胸脅、脘腹脹痛，疝痛，蟲積腹痛。而且還是制作高效無(wú)殘毒無(wú)污染的新型植物性農(nóng)藥的重要原料，川楝子苦寒沉降，主要入肝經(jīng)，疏泄肝熱，行氣止痛，治氣郁，目前主要用種子繁殖，采用育苗移栽的方法，組織培養(yǎng)技術(shù)尚未見(jiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，本發(fā)明方法采用組織培養(yǎng)可以培育優(yōu)質(zhì)種苗，縮短培養(yǎng)周期，保存種質(zhì)資源，為川楝的開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:
取川楝幼嫩的葉片，流水沖洗13min,超凈工作臺(tái)上0.1%氯化萊消毒處理8min,無(wú)菌水沖洗6次，消毒處理過(guò)的川楝幼嫩葉片接入BL+ZT1.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+15%絲瓜傷流液，附加0.7%瓊脂和30g/L蔗糖的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，pH5.8，暗光照培養(yǎng)，溫度25±2°C，誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織放入培養(yǎng)基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%-20%絲瓜傷流液進(jìn)行愈傷組織分化，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照28001x，溫度25±2°C，分化出來(lái)的芽苗接入l/3MS+300-400ppm生根粉培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照60001x，溫度25±2°C，將生根后的川楝放入田園土:蛭石:鋸末=3:1:1基質(zhì)中，使用自動(dòng)噴水裝置，每三天噴灑一次90ppmNAA溶液，每?jī)芍車娛?00倍的多菌靈溶液，溫度28°C，光照強(qiáng)度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照時(shí)間8h，PH5.8，濕度85%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的川楝成活率高，周期短，產(chǎn)量大，能耗少，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取川楝幼嫩的葉片，流水沖洗13min,超凈工作臺(tái)上0.1%氯化萊消毒處理8min,無(wú)菌水沖洗6次，消毒處理過(guò)的川楝幼嫩葉片接入BL+ZT1.5mg/L+2，4-D0.2mg/L+15%絲瓜傷流液，附加0.7%瓊脂和30g/L蔗糖的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，pH5.8，暗光照培養(yǎng)，溫度25±2°C，誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織放入培養(yǎng)基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%絲瓜傷流液進(jìn)行愈傷組織分化，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照28001x，溫度25±2°C，分化出來(lái)的芽苗接入l/3MS+300ppm生根粉培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L, pH5.8，光照60001x，溫度25±2°C，將生根后的川楝放入田園土:蛭石:鋸末=3:1:1基質(zhì)中，使用自動(dòng)噴水裝置，每三天噴灑一次90ppmNAA溶液，每?jī)芍車娛?00倍的多菌靈溶液，溫度28°C，光照強(qiáng)度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照時(shí)間8h，PH5.8，濕度85%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率88%。
[0008]實(shí)施例2
取川楝幼嫩的葉片，流水沖洗13min,超凈工作臺(tái)上0.1%氯化萊消毒處理8min,無(wú)菌水沖洗6次，消毒處理過(guò)的川楝幼嫩葉片接入BL+ZT 1.5mg/L+2，4-D0.2mg/L+15%絲瓜傷流液，附加0.7%瓊脂和30g/L蔗糖的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，pH5.8，暗光照培養(yǎng)，溫度25±2°C，誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織放入培養(yǎng)基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+20%絲瓜傷流液進(jìn)行愈傷組織分化，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照28001x，溫度25±2°C，分化出來(lái)的芽苗接入l/3MS+400ppm生根粉培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L, pH5.8，光照60001x，溫度25±2°C，將生根后的川楝放入田園土:蛭石:鋸末=3:1:1基質(zhì)中，使用自動(dòng)噴水裝置，每三天噴灑一次90ppmNAA溶液，每?jī)芍車娛?00倍的多菌靈溶液，溫度28°C，光照強(qiáng)度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照時(shí)間8h，PH5.8，濕度85%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率89%。
[0009]實(shí)施例3
取川楝幼嫩的葉片，流水沖洗13min,超凈工作臺(tái)上0.1%氯化萊消毒處理8min,無(wú)菌水沖洗6次，消毒處理過(guò)的川楝幼嫩葉片接入BL+ZT1.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+15%絲瓜傷流液，附加0.7%瓊脂和30g/L蔗糖的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，pH5.8，暗光照培養(yǎng)，溫度25±2°C，誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織放入培養(yǎng)基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+20%絲瓜傷流液進(jìn)行愈傷組織分化，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照28001x，溫度25±2°C，分化出來(lái)的芽苗接入l/3MS+300ppm生根粉培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L, pH5.8，光照60001x，溫度25±2°C，將生根后的川楝放入田園土:蛭石:鋸末=3:1:1基質(zhì)中，使用自動(dòng)噴水裝置，每三天噴灑一次90ppmNAA溶液，每?jī)芍車娛?00倍的多菌靈溶液，溫度28°C，光照強(qiáng)度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照時(shí)間8h，PH5.8，濕度85%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率90%。
【權(quán)利要求】
1.一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括川楝無(wú)菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)取川楝幼嫩的葉片，對(duì)其進(jìn)行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過(guò)的川楝幼嫩葉片接入BL+ZT1.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+15%絲瓜傷流液，附加0.7%瓊脂和30g/L蔗糖的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，pH5.8，暗光照培養(yǎng)，溫度25±2°C; (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織放入培養(yǎng)基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%-20%絲瓜傷流液進(jìn)行愈傷組織分化，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照28001x，溫度25±2°C ； (4)取步驟(3)分化出來(lái)的芽苗接入l/3MS+300-400ppm生根粉培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，ρΗ5.8，光照60001χ，溫度25±2°C ； (5)取步驟(4)的試管苗進(jìn)行煉苗移栽。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述川楝無(wú)菌葉片的獲得為，取川楝幼嫩的葉片，流水沖洗13min，超凈工作臺(tái)上0.1%氯化萊消毒處理8min,無(wú)菌水沖洗6次。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(2)和(3)中愈傷誘導(dǎo)和分化培養(yǎng)基中加入了絲瓜傷流液可以促進(jìn)愈傷組織的誘導(dǎo)和分化。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種川楝組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中川楝煉苗移栽的方法為將生根后的川楝放入田園土:蛭石:鋸末=3:1:1基質(zhì)中，使用自動(dòng)噴水裝置，每三天噴灑一次90ppmNAA溶液，每?jī)芍車娛?00倍的多菌靈溶液，溫度28°C，光照強(qiáng)度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照時(shí)間8h，PH5.8，濕度85%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)成活率。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104221867SQ201410540359
【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司