本發(fā)明的目的是提供一種云紋石斑雌魚與鞍帶石斑魚雄魚雜交育種方法。

背景技術(shù)：

云紋石斑魚(Epinephelus.moara)和鞍帶石斑魚(E.lanceolatus)都隸屬于鱸形目(Perciformes)，鮨科(Serranidae)、石斑魚亞科(Epinephelinae)，石斑魚屬。云紋石斑魚俗稱草斑或真油斑，主要分布在日本、韓國、中國(南至香港和海南)和中國的臺灣沿岸。鞍帶石斑魚俗稱龍躉、龍膽石斑魚、巨石斑魚，是石斑魚類群中體型最大的魚類，主要產(chǎn)于東南亞、大洋洲海域，在我國的南海也有發(fā)現(xiàn)，但數(shù)量稀少。云紋石斑魚和鞍帶石斑魚都是肉食性魚類，具有生長速度快、肉質(zhì)鮮美等特點，是具有較高營養(yǎng)價值的名貴海產(chǎn)魚類之一，也是我國華南沿海地區(qū)重要的海水養(yǎng)殖種類。

近年來雜交育種作為一種培育經(jīng)濟魚類新品種的有效方法，也被應用于石斑魚的新品種培育，但以上兩種石斑魚，由于存在生殖隔離，目前還未有成功雜交。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種云紋石斑魚雌魚與鞍帶石斑魚雄魚雜交育種方法，使之產(chǎn)生雜交后代。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種云紋石斑魚雌魚與鞍帶石斑魚雄魚雜交育種方法，包括：

1)選擇云紋石斑魚雌魚個體為母本；選擇鞍帶石斑魚雄魚個體為父本；

2)親本培育：

A、云紋石斑魚雌魚：云紋石斑魚雌魚親本培育水溫為19-21℃，鹽度33‰，溶解氧5.0-6.2mg/l，pH7.6-8.0，光照強度范圍：27-403lx；

從2月下旬開始，云紋石斑魚雌魚親本養(yǎng)殖水溫控制在19-21℃，親魚投喂魷魚、牡蠣以及巴浪魚，兩天投喂一次，投喂量為親魚體質(zhì)量的1-3％；培育至親魚性腺發(fā)育成熟，雌性腹部可見明顯膨大；

B、鞍帶石斑魚雄魚：鞍帶石斑魚雄魚親本培育水溫為28-30℃，鹽度33‰，溶解氧：5.5-6.4mg/l，pH7.6-8.0，光照強度范圍：45-634lx；

從2月下旬開始，鞍帶石斑魚雄魚親本從20℃逐漸升溫至28℃，每2天升1℃，之后保持在28-30℃，親魚投喂巴浪魚，兩天投喂一次，投喂量為親魚體質(zhì)量的0.5-1.5％；培育至親魚性腺發(fā)育成熟，輕壓雄性腹部有白色精液流出；

3)人工催產(chǎn)：親魚培育至3月中旬開始挑選個體健康、腹部明顯膨脹，性腺發(fā)育成熟的雌魚進行催產(chǎn)，注射催產(chǎn)激素，注射劑量為3-7ug/kg魚體質(zhì)量，對鞍帶石斑魚不進行催產(chǎn)；

4)授精：干授精法進行人工授精；

5)受精卵孵化：受精卵放置在孵化桶中孵化，孵化密度為180-220g受精卵/m³，流水孵化，微充氣，至仔魚即將出膜，此時將上浮卵移至育苗池培育；

6)仔稚幼魚培育生產(chǎn)。

在本發(fā)明的較佳實施例中，步驟2)所述的巴浪魚為粘附有營養(yǎng)強化劑的巴浪魚。

在本發(fā)明的較佳實施例中，步驟3)注射催產(chǎn)激素為促黃體素釋放激素類似物LHRH-A3，注射劑量為5ug/kg魚體質(zhì)量。

在本發(fā)明的較佳實施例中，步驟3)通過背部肌肉注射。

在本發(fā)明的較佳實施例中，步驟5)受精卵放置在孵化桶中孵化，孵化密度為190-210g受精卵/m³。

本發(fā)明成功建立了這兩種石斑魚的雜交方法，本發(fā)明的石斑魚遠緣雜交育種方法有如下優(yōu)點：

1、云紋石斑魚為暖溫性魚類，繁殖水溫一般在19-22℃，水溫過高就會導致性腺退化。鞍帶石斑魚為暖水性魚類，繁殖水溫在27-35℃，水溫過低就會導致性腺發(fā)育不成熟。本發(fā)明采用人工控溫的方法，對親本實行分別控溫，使兩種石斑魚的性腺發(fā)育成熟時間達到同步。克服了云紋石斑魚與鞍帶石斑魚的生殖隔離。

2、本發(fā)明方法獲得的受精卵受精率達到95％以上，孵化率達到80％以上。

3、通過人工控溫，水溫保持在19-21℃，可使云紋石斑魚雌魚的繁殖期時間延長3 個月時間，至7月上旬還可使雌魚性腺發(fā)育保持繁殖期水平。

4、本發(fā)明培育的雜交子代具有生長速度快、耐低溫等優(yōu)良特性。雜交子代經(jīng)過四個月的飼養(yǎng)，生長速度比云紋石斑魚快135％；雜交子代的最低耐受溫度為10℃，父本鞍帶石斑魚的最低耐受溫度為16℃。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的父本、母本和子代的實物圖，以及雜交流程示意圖。

具體實施方式

一種云紋石斑魚雌魚與鞍帶石斑魚雄魚雜交育種方法，選擇云紋石斑魚雌魚個體為母本；選擇鞍帶石斑魚雄魚個體為父本；通過親本培育、人工催產(chǎn)、授精、受精卵孵化、仔稚幼魚培育生產(chǎn)出雜交石斑魚子代。

親本選擇與培育：本實驗于2015年2月進行，選擇3-4日齡個體健康，成熟的云紋石斑魚雌魚作為親本，平均體長40cm，平均體重4.5kg；云紋石斑魚雌魚培育池面積15㎡，為八角方形池。水深1.1米，每口池子放養(yǎng)親魚45尾。從2月下旬開始，云紋石斑魚雌魚親本養(yǎng)殖水溫控制在19-21℃，鹽度33‰，溶解氧:5.0mg/l-6.2mg/l，pH7.6-8.0，光照強度范圍：27-403lx。親魚投喂魷魚、牡蠣，以及粘附有營養(yǎng)強化劑(主要有效成分是維生素E，10mg VE/g魚體)的巴浪魚，兩天投喂一次，投喂量約為親魚體質(zhì)量的2％。培育至親魚性腺發(fā)育成熟，雌性腹部可見明顯膨大。

本實驗選擇6-7日齡個體健康，成熟的鞍帶石斑魚雄魚，平均體長113cm，平均體重60kg。鞍帶石斑魚雄魚培育池面積15㎡，為八角方形池。水深1.1米，每口池子放養(yǎng)親魚7尾。鞍帶石斑魚雄魚親本培育水溫為28-30℃，鹽度33‰，溶解氧：5.5-6.4mg/l，pH7.6-8.0，光照強度范圍：45-634lx。從2月下旬開始，鞍帶石斑魚雄魚親本從20℃逐漸升溫至28℃，每2天升1℃，之后保持在28-30℃，親魚投喂粘附有營養(yǎng)強化劑的巴浪魚，兩天投喂一次，投喂量約為親魚體質(zhì)量的1％。培育至親魚性腺發(fā)育成熟，輕壓雄性腹部有白色精液流出。

人工催產(chǎn)：親魚培育至3月中旬開始挑選個體健康、腹部明顯膨脹(性腺發(fā)育成熟)的雌魚進行催產(chǎn)，注射催產(chǎn)激素為促黃體素釋放激素類似物LHRH-A3，通過背部肌肉注射，注射劑量為5ug/kg魚體質(zhì)量，對鞍帶石斑魚不進行催產(chǎn)。

授精：催產(chǎn)后40h，將云紋石斑魚雌魚捕起，輕壓云紋石斑魚雌魚腹部，擠出成熟的卵子。再輕壓鞍帶石斑魚雄魚腹部，擠出成熟精液。采用干授精法進行人工授精。之后加入海水，靜置10min后，撈取上浮的受精卵進行孵化。

受精卵孵化：受精卵放置在孵化桶中孵化，孵化密度為200g受精卵/m³，流水孵化，微充氣，至仔魚即將出膜，此時將上浮卵移至育苗池培育。

仔稚幼魚的培育：育苗池中采用常規(guī)魚苗培育方法。

本實施例中云紋石斑魚產(chǎn)卵期可持續(xù)到7月份，同時獲得的雜交受精卵受精率可達95％，孵化率達80％；并培育出3cm雜交幼魚超過50000尾。

雜交子代經(jīng)過四個月的飼養(yǎng)，生長速度比云紋石斑魚快135％；雜交子代的最低耐受溫度為10℃，父本鞍帶石斑魚的最低耐受溫度為16℃。