裙帶菜克隆苗附著方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種裙帶菜苗種在苗種繩上的附著方法，特別是一種可提高附著效果的方法。
【背景技術】
[0002]克隆苗培育對于裙帶菜優良新品種培養和推廣，以及利用新品種子一代優勢提高栽培產量具有很大意義。但克隆苗在苗種繩上附著不牢固的問題一直限制著裙帶菜克隆苗大規模培育和栽培養殖。普通裙帶菜苗種人工采苗過程中，裙帶菜游孢子粘附于苗種繩上并牢固附著，由游孢子發育出的雌配子體受精后長成的裙帶菜幼苗可以牢固附著于苗種繩上。但裙帶菜克隆苗培育過程中，沒有游孢子的粘附過程，配子體僅依靠重力沉降和細胞破碎后溢出的原生質在苗種繩上附著，配子體及克隆苗受擾動后很容易從苗種繩上脫落，克隆苗長出的假根在苗種繩上附著不牢固，尤其是轉移到海區養殖后，在浪流沖擊下，苗種假根非常容易斷裂，導致苗種繩上的克隆苗脫落嚴重，苗種密度難以保證。盡管20世紀末和21世紀初有過相應的研究和報到，但實際效果仍是不如人意。
[0003]另外，由于克隆苗在苗種繩上分布不均勻，難以在在生產和研究中廣泛使用，因此在裙帶菜克隆苗的研究中，常常將附有克隆苗的苗種繩纏繞到養殖苗繩上以增加克隆苗的密度，這樣做不僅費事費力費材料，而且仍然不能達到滿意的效果。

【發明內容】

[0004]本發明是為了解決現有技術所存在的上述不足，提出一種操作簡單，效果顯著，可促進克隆苗迅速在苗種繩上牢固附著的裙帶菜克隆苗的附著方法。
[0005]本發明的技術解決方案是:一種裙帶菜克隆苗附著方法，其特征在于:所述的方法按照以下步驟進行:
a.將裙帶菜雌雄配子體的絲狀體分別粉碎至長度為100-130μπι，然后將粉碎好的絲狀體按照雌:雄=2-4:1的質量比例混合，獲得混合絲狀體，
b.將PES母液加入到無菌海水中制得培養液，該培養液的濃度為0.1-0.3%，在培養容器中放入苗種繩和培養液，二者的比例為0.5-lm苗種繩配IL培養液，然后按照Im苗種繩配
0.5-lg絲狀體的比例向培養容器中加入混合絲狀體，并讓絲狀體自然沉降到苗種繩上，不充氣的狀態下，以1600-23001ux、17-19°C的條件培養0.5-ld，
c.上述b步驟結束后，開啟充氣閥，氣泡石每次同時釋放出3-6個氣泡的狀態下繼續培養至第4-6d，向培養容器中補入PES母液，補入的PES母液的體積為培養液總體積的0.1 -
0.3%，繼續培養至第8-1 Od時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，
d.調整氣泡石每次同時釋放出6-10個氣泡，培養至第14-16d，向培養容器中補入PES母液，補入的PES母液的體積為培養液總體積的0.1-0.3%，并將光照條件提升至2300-27001ux，繼續培養至第20-21d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至2700-33001ux，繼續培養至第22_23d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至3300-50001ux，繼續培養至第24-25d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至5000-70001UX，調節充氣閥，使氣泡石每次釋放出15個以上的氣泡，并每天更換一次培養液進行培養，
e.待苗種繩上附著的幼孢子體的平均長度達到500-1000μπι時，將苗種繩轉移到海區暫養，直至夾苗生產。
[0006]本發明同現有技術相比，具有如下優點:
本發明所公開的裙帶菜克隆苗附著方法，能夠讓裙帶菜的克隆苗幼孢子體在相對較短的時間內，牢固地附著在苗種繩上，它利用更換營養液、控制養殖水溫、調節養殖過程中氣泡石出氣量以及梯度式提升光照強度的方式來控制裙帶菜克隆苗的養殖條件，該方法簡單可行，效果明顯，經該方法處理后，裙帶菜的克隆苗可以牢固地附著在苗種繩上，即便將其放入海洋環境中養殖，也不會因海水擾動而導致其從苗種繩上脫落。
【附圖說明】
[0007]圖1為利用本發明所述方法培育出的裙帶菜克隆苗(室內培養容器培養結束后)。
[0008]圖2為利用本發明所述方法培育出的裙帶菜克隆苗(海上暫養15天后)。
[0009]圖3為傳統方法培育出的裙帶菜克隆苗。
【具體實施方式】
[0010]下面將結合【附圖說明】本發明的【具體實施方式】。如圖1至圖3所示:
一種裙帶菜克隆苗附著方法，按照以下步驟進行:
首先利用粉碎機將裙帶菜雌雄配子體的絲狀體分別粉碎至長度為100_130μπι，然后將粉碎好的絲狀體按照雌:雄=2-4:1的質量(濕重)比例混合，獲得混合絲狀體，
然后進行培養液的配制:將PES母液加入到無菌海水中制得培養液，該培養液的濃度為
0.1-0.3%，以后各個步驟中所使用的均為該步驟配制的培養液，在培養容器中放入苗種繩和培養液，二者的比例為0.5-lm苗種繩配IL培養液，然后按照Im苗種繩配0.5_lg絲狀體的比例向培養容器中加入混合絲狀體，并讓絲狀體自然沉降到苗種繩上，不充氣的狀態下，以1600-23001ux、17-19°C 的條件培養 0.5-ld，
在上述培養步驟結束后，開啟充氣閥，氣泡石每次同時釋放出3-6個氣泡的狀態下繼續培養至第4-6d，向培養容器中補入PES母液，補入的PES母液的體積為培養液總體積的0.Ι-Ο.3%，繼續培養至第8-1 Od時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，
調整氣泡石每次同時釋放出6-10個氣泡，培養至第14-16d，向培養容器中補入PES母液，補入的PES母液的體積為培養液總體積的0.1-0.3%，并將光照條件提升至2300-27001ux，繼續培養至第20-21d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至2700-33001ux，繼續培養至第22_23d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至3300-50001ux，繼續培養至第24-25d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至5000-70001UX，調節充氣閥，使氣泡石每次釋放出15個以上的氣泡，并每天更換一次培養液進行培養，
待苗種繩上附著的幼孢子體的平均長度達到500-1000μπι時，將苗種繩轉移到海區暫養，直至夾苗生產。
【主權項】
1.一種裙帶菜克隆苗附著方法，其特征在于:所述的方法按照以下步驟進行: a.將裙帶菜雌雄配子體的絲狀體分別粉碎至長度為100-130μπι，然后將粉碎好的絲狀體按照雌:雄=2-4:1的質量比例混合，獲得混合絲狀體， b.將PES母液加入到無菌海水中制得培養液，該培養液的濃度為0.1-0.3%，在培養容器中放入苗種繩和培養液，二者的比例為0.5-lm苗種繩配IL培養液，然后按照Im苗種繩配0.5-lg絲狀體的比例向培養容器中加入混合絲狀體，并讓絲狀體自然沉降到苗種繩上，不充氣的狀態下，以1600-23001ux、17-19°C的條件培養0.5-ld， c.上述b步驟結束后，開啟充氣閥，氣泡石每次同時釋放出3-6個氣泡的狀態下繼續培養至第4-6d，向培養容器中補入PES母液，補入的PES母液的體積為培養液總體積的0.1 -0.3%，繼續培養至第8-1 Od時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液， d.調整氣泡石每次同時釋放出6-10個氣泡，培養至第14-16d，向培養容器中補入PES母液，補入的PES母液的體積為培養液總體積的0.1-0.3%，并將光照條件提升至2300-27001ux，繼續培養至第20-21d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至2700-33001ux，繼續培養至第22_23d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至3300-50001ux，繼續培養至第24-25d時，將培養容器中的培養液放出，并加入新的培養液，同時將光照條件提升至5000-70001UX，調節充氣閥，使氣泡石每次釋放出15個以上的氣泡，并每天更換一次培養液進行培養， e.待苗種繩上附著的幼孢子體的平均長度達到500-1000μπι時，將苗種繩轉移到海區暫養，直至夾苗生產。
【專利摘要】本發明公開的裙帶菜克隆苗附著方法，能夠讓裙帶菜的克隆苗幼孢子體在相對較短的時間內，牢固地附著在苗種繩上，它利用更換營養液、控制養殖水溫、調節養殖過程中氣泡石出氣量以及梯度式提升光照強度的方式來控制裙帶菜克隆苗的養殖條件，該方法簡單可行，效果明顯，經該方法處理后，裙帶菜的克隆苗可以牢固地附著在苗種繩上，即便將其放入海洋環境中養殖，也不會因海水擾動而導致其從苗種繩上脫落。
【IPC分類】A01G33/00
【公開號】CN105706893
【申請號】CN201610074484
【發明人】孫穎, 張喜昌, 冷曉飛, 許淑芬, 劉劍波, 高洪濤
【申請人】大連海寶漁業有限公司