技術領域：
本發明涉及一種超過發芽年限的肉桂種子促芽的方法。技術背景種子發芽年限指種子保持發芽能力的年限。各種藥用植物種子的壽命差異很大。壽命短的只有幾天或不超過1年，如肉桂種子，一經干燥即喪失發芽力，當歸、白芷種子的壽命不超過1年，多數藥用植物種子發芽年限為2～3年，如牛蒡、薏苡、水飛薊、桔梗、板藍根、紅花等。貯藏條件適宜可以延長種子的壽命。但是一旦超過種子發芽年限過長，種子的發芽率是及其低的，特別是對常溫下存儲超過6個月的肉桂種子，這是現有技術的缺陷。技術實現要素：本發明的目的是提供一種使得超過發芽年限的肉桂種子能達到比較高的發芽率的方法，也可以說是一種應用于干燥的肉桂種子促芽的方法。本發明的使得超過發芽年限的肉桂種子促芽的方法，包括以下步驟：1.收集在常溫下存儲13個月～14個月的肉桂種子，在肉桂種子存儲期間無任何特殊處理；2.將肉桂種子用10％--15％的鹽酸浸泡10～30分鐘，流水沖洗2小時后去掉表面碳化物質；3.將其在常溫20～25℃下，浸泡于60％--100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液6～42小時，之后用1％次氯酸鈉消毒5～15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH＝7；4.將肉桂種子置恒溫或變溫條件的光照培養箱中，用蛭石或濕沙或濾紙或海綿發芽床，或置沙質土壤中進行發芽。這里要說明的是本領域的審查員應當知曉在常溫下存儲13個月～14個月的肉桂種子，在肉桂種子存儲期間無任何特殊處理，肉桂種子已經干燥了，喪失了發芽的能力。本發明的應用于超過發芽年限的肉桂種子促芽的方法，能有效提高對常溫下存儲超過6個月的肉桂種子的發芽率，打破了超過發芽年限的肉桂種子特別是一經干燥即喪失發芽力的傳統偏見，使得在對肉桂的種植中不局限于采用新鮮種子，對于存儲了一定時間的肉桂種子，也可以采用，本發明具有操作簡單、成本低廉、快速萌發等優點，可廣泛用于肉桂的栽培和園林綠化中。具體實施方式一種超過發芽年限的肉桂種子促芽的方法，其步驟是：1.收集在常溫下存儲13個月～14個月的肉桂種子，在肉桂種子存儲期間無任何特殊處理；2.將肉桂種子用10％--15％的鹽酸浸泡10～30分鐘，流水沖洗2小時后去掉表面酸性物質；3.將其在常溫20～25℃下，浸泡于50％--100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液6～42小時，之后用1％次氯酸鈉消毒5～15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH＝7；4.再將肉桂種子置恒溫或變溫條件的光照培養箱中用濾紙發芽床進行發芽。所述的恒溫是15、20、25、30℃，所述的變溫條件是白天25℃培養18小時、晚上15℃培養8小時，或者是白天30℃培養18小時、晚上20℃培養8小時。以下通過實施例來進一步描述本發明。說明:1.具體實施方式中所采用的發芽試驗(除實施例5外)均為紙床發芽試驗法，具體如下:直徑為9cm的培養皿內放置濾紙，用水濕透，將多余的水倒掉，以保濕不積水為度，選取100粒肉桂種子均勻放入培養皿內的紙上，再將培養皿蓋好后放入微電腦控制光照培養箱(LRH-250-Gll；廣東省醫療器械廠生產),按照各個試驗例所設計的特定溫度(恒溫或變溫)條件進行發芽，整個發芽過程中均進行光照；發芽過程中每天檢測1～2次，并適當補足水分，肉桂種子開始發芽后，每天計數1次。發現有腐敗的種子應隨時揀出,若霉變種子≥5％，應及時更換培養皿內的濾紙，并將種子用蒸餾水清洗后再放入培養皿內繼續令其發芽。2.參照《國際種子檢驗規程》(1985)、《農作物種子檢驗規程》(1995)等作為評定種子是否發芽的標準(以長出1cm為發芽)。3.氫溴酸右美沙芬口服溶液，又名聯邦克立停，其生產廠家為珠海聯邦制藥股份有限公司中山分公司，國藥準字H20013204。4.種子發芽率是指發芽試驗終期，在規定的日期內發芽的全部種子數占供試種子的百分率。發芽率(％)＝規定日期內發芽種子/供試種子粒數×100％。本試驗中的發芽日期均為自將發芽紙床放入箱中起的20天。5.本實驗試圖通過多種方法對超過發芽年限的肉桂種子促芽，但只有氫溴酸右美沙芬口服溶液能提高肉桂種子的出芽率，其它方法如濕沙層積、生長素、鹽酸等均不能明顯提高肉桂種子的出芽率。實驗材料：本實驗所用的肉桂種子為2013年10月份在江西省安義縣采收的在常溫下存儲13月～14月的肉桂種子，在肉桂種子存儲期間無任何特殊處理，肉桂種子用牛皮紙袋常溫儲藏。實施例1一、實驗方法將肉桂種子分為兩組，一組用10％--15％的鹽酸浸泡一定時間，一組空白對照。然后把肉桂種子分別浸泡于60％、70％、80％、90％、100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液中18小時后，用1％次氯酸鈉消毒15分鐘，無菌水漂洗5次至pH＝7。每個濃度平行四組，每組100粒置于30℃恒溫培養箱全光照培養，每日統計發芽率。二、實驗結果如表1表明，不同濃度氫溴酸右美沙芬口服溶液下10％--15％的鹽酸浸泡后和未浸泡的肉桂種子對其發芽率均有明顯提高。因此10％--15％的鹽酸浸泡處理可以對超過發芽年限的肉桂種子起到提高其出芽率的作用。表1不同濃度氫溴酸右美沙芬口服溶液下10％--15％的鹽酸浸泡后和未浸泡與發芽率的關系實施例2一、實驗方法用10％--15％的鹽酸分別浸泡成熟的肉桂種子1、5、10、15、20、30分鐘后，慢慢傾倒掉鹽酸酸，用清水沖洗2小時，再將肉桂種子分別浸泡于100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液中18小時后，用1％次氯酸鈉消毒15分鐘，無菌水漂洗5次至pH＝7。每個處理平行四組，每組100粒，置于30℃恒溫培養箱全光照培養。每日統計發芽率，實驗結果見表2。表210％--15％的鹽酸處理后不同濃度氫溴酸右美沙芬口服溶液處理與肉桂種子發芽率的關系二、實驗結果如表2結果表明：隨浸泡時間的增加，發芽率有所提高，其中以20分鐘最佳，浸泡30分鐘時則下降。浸泡處理提高萌發率可能與鹽酸軟化果皮有關。實施例3一、實驗方法將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子分別浸泡于60％、70％、80％、90％、100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液中18小時后，用1％次氯酸鈉消毒15分鐘，無菌水漂洗5次至至pH＝7。每個濃度平行四組，每組100粒，置于30℃恒溫培養箱全光照培養。每日統計發芽率，實驗結果見表3。表3不同濃度的氫溴酸右美沙芬口服溶液與肉桂種子的發芽率的關系二、實驗結果表3結果表明對超過發芽年限的肉桂種子促芽的最佳濃度為60％--100％，本實驗濃度范圍內發芽率沒有顯著性差異。實施例4一、實驗方法將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子分別浸泡于100％氫溴酸右美沙芬口服溶液中，浸泡的時間為浸泡的時間為6、12、18、24、36、42小時。用次氯酸鈉消毒15分鐘，然后用蒸餾水清洗至pH＝7。每個濃度平行四組，每組100粒，置于30℃恒溫培養箱全光照培養。每日統計發芽率，實驗結果見表4(A，B表示有顯著性差異)。表4不同浸泡時間與肉桂種子的發芽率的關系浸泡時間(h)發芽率顯著性5％663％A1264％A1868％B2469％B3667％B4267％B二、實驗結果表4結果表明：氫溴酸右美沙芬口服溶液浸泡時間并不是影響肉桂種子發芽率的主要因數，但以18小時的發芽率最高，浸泡18、24、36、42小時的發芽率沒有顯著性差異(P﹥0.05)，故浸泡時間為18小時。表4為氫溴酸右美沙芬口服溶液浸泡時間與肉桂種子發芽率實施例5一、實驗方法(1)打破種子休眠的恒溫處理將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子置于100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液常溫(20℃)浸泡18小時后恒溫培養，培養溫度分別為15、20、25、30℃，每個溫度分別用蛭石、濕沙、濾紙、海綿四種培養床，每個處理平行四組，每組100粒種子。結果見表5。(2)打破種子休眠的變溫處理將10％--15％的鹽酸浸泡15分鐘后的肉桂種子置100％的氫溴酸右美沙芬口服溶液常溫(20℃)浸泡18小時后變溫培養。變溫條件為：白天25℃培養16小時，夜晚15℃培養8小時或者白天30℃培養16小時，夜晚20℃培養8小時。每個變溫分別用蛭石、濕沙、濾紙、海綿四種培養床，每個處理平行四組，每組100粒種子。結果見表6。二、實驗結果結果表明：在溫度相同時，不同培養床的種子發芽率無顯著性差異。在蛭石培養床上不同溫度的SNK比較的同類子集結果如表6所示：20、25、30、30/20℃四者之間無顯著性差異，與15、25/15℃之間存在顯著性差異。如表3所示肉桂種子發芽勢以30℃最高，因此采用30℃恒溫光照培養。溫度低于20℃不適合肉桂種子的萌發。表5不同溫度的SNK(Student-Newman-Keuls)比較表6不同發芽介質和溫度對肉桂種子發芽率的影響當前第1頁1 2 3