本發明涉及生物農藥技術領域，尤其涉及一種展膜油懸浮劑及其在防治農作物病蟲害方面的應用。
背景技術：
展膜油劑是施于水面形成薄膜的油劑，具有防治效果顯著的特點，省工節本防治費用低，與其他農藥相比，用量及成本都較低。而且在使用過程中，操作簡便，不用植保器械，直接把藥滴入水中，比常規施藥提高工效20倍，極大減輕施藥勞動強度，有利于勞力轉化，改變了現有傳統繁重施藥方法。另外該劑型不受氣候的影響，在防治時期無論下雨或陰天均可直接滴藥。該劑型屬于低毒劑型，由于特殊的施藥方式，使其在使用過程中不產生藥液飄移，不污染環境，不產生藥害，對天敵殺傷力小，對人畜安全。
而且展膜油劑的劑型產品不需要兌水稀釋，直接撒滴在作物水面后會迅速鋪展開，形成一層均勻的藥膜，同時在助劑的作用下，藥膜會沿著作物莖稈向上鋪展，集中于水生植物莖稈基部，從而實現常規施藥方式難以實現的水生作物病蟲草害的有效防治。
然而，現有展膜油劑的種類在水面鋪展性能欠佳，形成的藥膜性能對產品的防治效果有較大的起伏。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明的目的在于針對現有技術的不足，而提供了一種含蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：
本發明提供了一種展膜油懸浮劑，包括以下質量百分含量的組分：有效成分0.1～60％，所述的有效成分包括蝗蟲綠僵菌；表面活性劑3～25％；成膜劑2～30％；余量的油性分散介質。
優選的，所述綠僵菌中芽孢有效含量為50～500億個/克。
優選的，所述的有效成分還包括有機殺蟲劑，所述的有機殺蟲劑為甲氨基阿維菌素、呋蟲胺、噻蟲嗪、阿維菌素、噻蟲啉、多殺菌素、氟啶蟲酰胺、滅幼脲、氯蟲苯甲酰胺、除蟲脲、高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和茚蟲威中的一種或幾種。
優選的，所述蝗蟲綠僵菌與有機殺蟲劑的重量比為(2～50)：(8～55)。
優選的，所述成膜劑包括十二碳醇酯、十八醇、丙二醇苯醚和丁醚醋酸酯中的一種或幾種。
優選的，所述成膜劑在展膜油懸浮劑中的質量百分含量為8～25％。
優選的，所述表面活性劑包括脂肪醇聚氧乙烯醚和壬基酚氧乙烯醚中的一種或兩種。
優選的，包括8～20％的表面活性劑。
優選的，所述油性分散介質為溶劑油、二甲苯、白油、甲基萘和乙醇中的一種或幾種。
進一步的，本發明提供了所述的展膜油懸浮劑在防治農作物蟲害方面的應用。
本發明提供的一種含蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑，包括以下重量百分含量的組分：有效成分0.1～60％，所述有效成分包括蝗蟲綠僵菌；表面活性劑3～25％；成膜劑2～30％；余量為油性分散介質。在本發明中，提供的蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑對昆蟲害的防治效果顯著，防治效果可達84～85％。本發明提供的蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑相比傳統展膜油懸浮劑效果良好，展膜油懸浮劑在液面的展布性能佳。
生物保藏證明
蝗蟲綠僵菌(Metarhizium acridum)，于2013年08月13日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，生物保藏編號為CGMCC NO.7992。
具體實施方式
本發明提供了一種展膜油懸浮劑，包括以下質量百分含量的組分：有效成分0.1～60％，所述的有效成分包括蝗蟲綠僵菌；表面活性劑3～25％；成膜劑2～30％；余量的油性分散介質。
在本發明中所述的有效成分的質量含量優選為0.1～60％，更優選為10～50％，最優選為15～40％。本發明中所述的有效成分包括蝗蟲綠僵菌，所述的蝗蟲綠僵菌中有效孢子含量優選的為50～500億個/克，更優選的為100～300億個/克，最優選的為200億個/克。
在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌優選為選自生物保藏編號為CGMCC NO.7992的菌種活化培養得到。在實施例中，可具體采用經過固體發酵后并烘干粉碎得到的固體粉狀蝗蟲綠僵菌。
在本發明中，所述的蝗蟲綠僵菌的制備方法包括以下步驟：
1)將蝗蟲綠僵菌菌種活化；
2)將所述活化后的蝗蟲綠僵菌接種于蝗蟲綠僵菌液體培養基中進行液體培養，培養30～50h停止培養，得到蝗蟲綠僵菌培養液；
3)將所述步驟2)得到的蝗蟲綠僵菌培養液接種于蝗蟲綠僵菌固體培養基中，進行固體發酵，得到蝗蟲綠僵菌。
在本發明中，將保藏的蝗蟲綠僵菌菌種接種于裝有營養瓊脂培養基的茄型瓶中，22-30℃培養10～14h進行活化培養。
在本發明中，所述活化后的蝗蟲綠僵菌接種于液體培養基的接種量優選為15～25％，更優選為18～22％，最優選為20％。
在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌液體培養基優選包括以下組分：黃豆粉20～40g/L，蔗糖20～40g/L，面粉0.03～0.07g/L，甘薯粉0.03～0.07g/L，磷酸氫二鈉0.0002g/L；更優選為：黃豆粉25～35g/L，蔗糖25～35g/L，面粉0.04～0.06g/L，甘薯粉0.04～0.06g/L，磷酸氫二鈉0.0002g/L；最優選為：黃豆粉30g/L，蔗糖30g/L，面粉0.05g/L，甘薯粉0.05g/L，磷酸氫二鈉0.0002g/L。
在本發明中，所述液體培養基優選經120～130℃滅菌30～45min后使用。本發明對培養基滅菌的設備沒有特殊的限定，采用本領域技術人員熟知的滅菌設備即可。本發明對所述培養設備沒有特殊的限定，采用本領域技術人員熟知的培養設備即可，如發酵罐。
在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌液體培養的溫度優選為22～30℃，更優選為24～28℃，最優選為26℃；所述蝗蟲綠僵菌液體培養的pH值優選為6.6～7.2，更優選為6.8～7.0，最優選為6.9；罐內壓力優選為0.05～0.1MPa，更優選為0.07～0.08MpPa；所述液體培養的通氣量優選為0.8～1.2V/V·min，更優選為1V/V·min；所述液體培養的時間優選為25～45h，更優選為30～40h，最優選為35h。
完成所述蝗蟲綠僵菌液體培養后，本發明將得到的蝗蟲綠僵菌培養液接種于固體培養基中，進行固體發酵，得到固體發酵蝗蟲綠僵菌。在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌培養液接種于固體培養基的接種量優選為15～25％，更優選為18～22％，最優選為20％。
在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌固體培養基優選包括以下重量份的組分：麥麩40～80份，玉米粉15～35份，豆粕5～15份；更優選為麥麩50～70份，玉米粉20～30份，豆粕7～13份；最優選為麥麩60份，玉米粉25份，豆粕10份。本發明在所述白僵菌固體培養基中添加蒸餾水，使固體培養基含水量優選為45％～55％，更優選為47％～52％，最優選為50％，然后進行固體發酵。
在本發明中，所述固體培養基的厚度優選為2～5cm，更優選為2.5～3.5cm，最優選為3cm。
在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌固體發酵的溫度優選為22～30℃，更優選為24～28℃，最優選為26℃；所述蝗蟲綠僵菌固體發酵的濕度優選為40％～95％，更優選為55％～75％，最優選為65％；所述蝗蟲綠僵菌固體發酵的時間優選為40～90h，更優選為50～75h，最優選為65h。
完成所述蝗蟲綠僵菌固體發酵后，本發明優選對得到孢子粉的進行收集，得到蝗蟲綠僵菌。在本發明中，所述蝗蟲綠僵菌孢子的收集具體采用微生物固態發酵真菌孢子分離設備的儀器進行。所述微生物固態發酵真菌孢子分離設備的儀器購自江西天人生態股份有限公司。
在本發明中，所述固體發酵得到的蝗蟲綠僵菌的有效孢子量為50～500億個/克，更優選為100～300億個/克，最優選為200億個/克。
在本發明中，所述有效成分優選還包括有機殺蟲劑；具體的所述的有機殺蟲劑優選為甲氨基阿維菌素、呋蟲胺、噻蟲嗪、阿維菌素、噻蟲啉、多殺菌素、氟啶蟲酰胺、滅幼脲、氯蟲苯甲酰胺、除蟲脲、高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和茚蟲威中的一種或幾種。本發明對上述有機殺蟲劑的來源沒有特殊限定，采用市售商品即可。
在本發明中，當所述有效成分同時包括蝗蟲綠僵菌和有機殺蟲劑時，蝗蟲綠僵菌與有機殺蟲劑的質量比優選為(2～50)：(8～55)，更優選為(4～45)：(10～52)，最優選為(12～30)：(15～40)。
本發明提供的展膜油懸浮劑包括質量含量為3～25％的表面活性劑，優選為8～20％，更優選為12～15％。在本發明中，對所述的表面活性劑沒有特殊限定，采用本領域技術人員熟知的市售商品即可。具體的可優選為脂肪醇聚氧乙烯醚和壬基酚氧乙烯醚中的一種或兩種，更優選為脂肪醇聚氧乙烯醚和壬基酚氧乙烯醚。當所述表面活性劑為上述兩種試劑時，所述脂肪醇聚氧乙烯醚和壬基酚氧乙烯醚的質量比優選為(4～16)：(2～15)，更優選為(6～14)：(4～12)，最優選為(8～10)：(8～10)。在本發明中，所述表面活性劑吸附于農藥微粒表面，形成不同的分散體系，起到乳化、潤濕、增溶、消泡、穩定的作用。在農藥使用過程中，表面活性劑可以改善藥液在植物葉面或防治對象表面上的分布、附著、滲透等，提高農藥劑量的有效轉移，直接或間接地提高農藥的有效利用率。
本發明提供的展膜油懸浮劑包括質量含量為2～30％的成膜劑，優選為8～25％，更優選為10～20％。在本發明中，對所述成膜劑的來源沒有特殊限定，采用本領域技術人員常規選用的市售商品即可。具體的可優選為十二碳醇酯、十八醇、丙二醇苯醚和丁醚醋酸酯中的一種或幾種，更優選為2～3種，最優選為4種。當所述成膜劑為上述試劑的2～3種時，可任意比例混合。當所述成膜劑為上述試劑的4種時，所述十二碳醇酯與十八醇、丙二醇苯醚、丁醚醋酸酯的質量比優選為(1～10)：(2～12)：(1～9)：(0.5～9)，更優選為(2～8)：(4～10)：(2～8)：((1～8)，最有選為(4～6)：(6～8)：(4～6)：(4～6)。在本發明中，所述的成膜劑的作用為促進展膜油懸浮劑塑性流動和彈性變形，可以使展膜油懸浮劑具有更好的鋪展性能。
本發明提供的蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑余量為油性分散介質。在本發明中，對所述油性分散介質的來源沒有特殊限定，采用本領域技術人員熟知的常規市售商品即可。具體的可優選為溶劑油、二甲苯、白油、甲基萘和乙醇中的一種或幾種。油性分散介質具體的可為上述試劑中的任意幾種，可任意比例混合。在本發明中，所述油性分散介質能夠將有效成分分散均勻，使展膜油懸浮劑質地均勻、分散性能好。
本發明對所述蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑的制備方法沒有特殊的限定，采用本領域技術人員熟知的展膜油懸浮劑的制備方法即可。具體的可將所述的有效成分、表面活性劑、成膜劑和油性分散介質混合后制備得到。
本發明還提供了蝗蟲綠僵菌展膜油懸浮劑在防治農作物昆蟲蟲害方面的應用。具體的，可應用的農作物種類包括糧食作物、經濟作物、蔬菜作物、果類作物、飼料作物等。本發明所述的蝗蟲綠僵菌展膜油懸浮劑可以防治水稻螟蟲、松毛蟲、蠐螬、蝗蟲、松褐天牛、白蟻、食心蟲、稻飛虱、二化螟、白禾螟、菜青蟲、小菜蛾、棉玉米螟、白粉虱、蚜蟲、綠葉蟬、白背飛虱等蟲害。
本發明對所述含蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑的施藥方法沒有特殊限定，采用本領域技術人員熟知的展膜油懸浮劑的施藥方法即可。
下面將結合本發明中的實施例，對本發明中的技術方案進行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。
以下實施例有效成分含量均按折百公斤計算后加入，其中蝗蟲綠僵菌如無特別指出含孢子量，有效孢子含量為200億個/克。
實施例1
蝗蟲綠僵菌的制備:將保藏的蝗蟲綠僵菌菌種接種于裝有營養瓊脂培養基的茄型瓶中，26℃培養12h進行活化培養；活化培養后的蝗蟲綠僵菌以20％的接種量接種于121℃滅菌35min后的液體培養基中，在發酵罐中進行液體培養，具體的培養條件為：溫度為26℃；pH值為6.9；罐內壓力為0.08MPa，培養通氣量為1V/V·min；培養35h后停止培養，得到蝗蟲綠僵菌培養液；將得到的蝗蟲綠僵菌培養液以20％的接種量接種于固體培養基中，在固體培養基中加入蒸餾水，使固體培養基含水量為50％，然后進行固體發酵，發酵條件為：發酵溫度為26℃，發酵濕度為65％，發酵時間為65h；固體發酵結束后將得到的固體發酵的蝗蟲綠僵菌在40℃條件下干燥35h，烘干至固體發酵的蝗蟲綠僵菌的水分含量為30％，將固體發酵后的菌料采用微生物固態發酵真菌孢子分離設備收集蝗蟲綠僵菌孢子，經檢測，蝗蟲綠僵菌的有效孢子量為(50～500)億個/克。
實施例2
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌40％，脂肪醇聚氧乙烯醚和10％，壬基酚氧乙烯醚12％，十二碳醇酯2％，十八醇10％，丙二醇苯醚6％，丁醚醋酸酯4％，溶劑油補足至100％。
制備方法：在帶攪拌器的混合釜中，先將蝗蟲綠僵菌、脂肪醇聚氧乙烯醚、壬基酚氧乙烯醚、十二碳醇酯、十八醇、丙二醇苯醚、丁醚醋酸酯、溶劑油，充分攪拌混合后，再泵入砂磨機中沙磨，沙磨至顆粒大小D90≤5μm后，即得含孢蝗蟲綠僵菌展膜油懸浮劑。
按照與實施例2相同的制備工藝，制備以下實施例。
實施例3
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌15％，甲氨基阿維菌素20％，脂肪醇聚氧乙烯醚14％，壬基酚氧乙烯醚6％，十二碳醇酯5％，十八醇5％，丙二醇苯醚8％，丁醚醋酸酯5％，乙醇28％，白油補足至100％；得到含有甲氨基阿維菌素和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例4
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌40％，呋蟲胺20％，脂肪醇聚氧乙烯醚8％，壬基酚氧乙烯醚12％，十二碳醇酯5％，十八醇4％，丙二醇苯醚8％，丁醚醋酸酯3％，乙醇15％，甲基萘補足至100％，得到含有呋蟲胺和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。。
實施例5
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌10％，噻蟲嗪40％，脂肪醇聚氧乙烯醚12％，壬基酚氧乙烯醚4％，十八醇10％，二甲苯補足至100％，得到含有噻蟲嗪和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例6
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌32％，阿維菌素18％，脂肪醇聚氧乙烯醚12％，壬基酚氧乙烯醚7.5％，丁醚醋酸酯6％，十八醇5％，二甲苯補足至100％。得到含有阿維菌素和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例7
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌45％，噻蟲啉10％，脂肪醇聚氧乙烯醚8％，壬基酚氧乙烯醚8％，丙二醇苯醚5％，十二碳醇酯8％，乙醇補足至100％，得到含有噻蟲啉和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例8
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌5％，氟啶蟲酰胺30％，脂肪醇聚氧乙烯醚8％，壬基酚氧乙烯醚9％，十二碳醇酯6％，丙二醇苯醚4％，丁醚醋酸酯5％，白油補足至100％，得到含有氟啶蟲酰胺和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例9
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌4％，滅蟲脲45％，脂肪醇聚氧乙烯醚6％，壬基酚氧乙烯醚6％，十八醇4％，丙二醇苯醚2％，丁醚醋酸酯8％，二甲苯補足至100％，得到含有滅幼脲和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例10
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌10％，氯蟲苯甲酰胺30％，脂肪醇聚氧乙烯醚14％，壬基酚氧乙烯醚6％，十二碳醇酯4％，十八醇8％，丙二醇苯醚4％，丁醚醋酸酯2％，白油補足至100％，得到含有氯蟲苯甲酰胺和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例11
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌8％，除蟲脲52％，脂肪醇聚氧乙烯醚12％，十二碳醇酯4％，十八醇8％，丙二醇苯醚2％，丁醚醋酸酯1％，二甲苯補足至100％，得到含有除蟲脲和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例12
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌10％，茚蟲威30％，脂壬基酚氧乙烯醚15％，十二碳醇酯4％，十八醇6％，丙二醇苯醚4％，丁醚醋酸酯1％，甲基萘補足至100％，得到含有茚蟲威和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例13
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌35％，甲氨基阿維菌素4％，噻蟲啉15％，脂肪醇聚氧乙烯醚10％，十二碳醇酯4％，丙二醇苯醚2％，丁醚醋酸酯1％，乙醇補足至100％，得到含有甲氨基阿維菌素、噻蟲啉和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
實施例14
以重量百分比計，將實施例1制備的蝗蟲綠僵菌10％，滅幼脲20％，茚蟲威10％，壬基酚氧乙烯醚10％，十二碳醇酯4％，十八醇10％，丙二醇苯醚2％，丁醚醋酸酯3％，甲基萘補足至100％，得到含有甲氨基阿維菌素、噻蟲啉和蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑。
對實施例2～14獲得的含蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑進行水面性能以及對防治水稻螟蟲效果的測試，以5％醚菊酯展膜油劑為對照，結果見表1：
表1含蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑水面性能及對水稻螟蟲防治效果測試結果
從表2可以得出，采用本發明提供的蝗蟲綠僵菌展膜油懸浮劑的鋪展時間為2.2～2.5s，鋪展速度為63～66cm/s，鋪展面積為5.3～5.6m2，殺蟲效果在84％～85％。與對照組相比，蝗蟲綠僵菌的展膜油懸浮劑的鋪展性能佳，達到的殺蟲效果穩定且要高于5％醚菊酯展膜油劑。
由以上實施例可知，本發明所述的展膜油懸浮劑與傳統的展膜油劑相比，本發明提供的展膜油懸浮劑的鋪展性能良好，達到的防治病蟲害的效果穩定。
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。