本發明屬于植物花期授粉
技術領域：
，涉及一種利用家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法。
背景技術：
：莖瘤芥俗稱榨菜，屬于十字花科蕓薹屬芥菜種，是莖用芥菜的一種，其產品器官不僅可以鮮銷，而且可以加工。莖瘤莖的加工品不僅暢銷國內，而且在海外也享有盛譽。榨菜主要是通過加工銷售的，可大大提高其附加值，而且能夠增加農民收入。浙江省是榨菜的傳統產區，栽培面積穩定在35萬畝左右。莖瘤芥花芽的分化一般不要求嚴格低溫春化，對日照長短的要求也不很嚴格，高溫和長日照會加速抽薹開花。莖瘤芥開花一般在花期較長，單株的花期20～30天，一個品種群體的花期可達25～45天，盛花期10天左右。一日內以10-16時花粉散出最多，此時為授粉最佳時期。莖瘤芥花粉傳播主要是借助風和蜜蜂的活動。長期以來，在莖瘤芥主產區使用的是常規品種，而且品種混雜退化現象十分嚴重，生產者追求優質、高產莖瘤芥新品種的愿望非常迫切。選育適合加工需求的莖瘤芥一代雜種并應用于生產，將大大促進莖瘤芥產業的發展。目前在重慶、四川、浙江等地已有雜交品種在生產上應用，但在雜交莖瘤芥制種產區，普遍存在種子產量極不穩定。究其原因，主要是制種地區春季低溫陰雨的天氣較多，以及缺乏授粉媒介，導致莖瘤芥盛花期授粉不良引起的。家蠅屬于雙翅目蠅科，生活史短，繁殖率高，養殖設備簡單，有很好的開發利用前途，可用來輔助雜交莖瘤芥授粉。莖瘤芥開花一般在4月下旬，此時溫度較低，不適于家蠅的大量繁殖，需要采用人工繁育措施增加用于授粉的家蠅數量。迄今為止，尚未見有關家蠅輔助莖瘤芥授粉方法的報道。授粉媒介，導致莖瘤芥盛花期授粉不良引起的。技術實現要素：本發明的目的是提供一種家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，克服現有技術中莖瘤芥盛花期授粉不良的問題。1.本發明提供一種家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，該方法通過選擇家蠅對雜交莖瘤芥進行授粉，其中，家蠅的授粉數量為16000-24000頭/畝。2.上述1提供的家蠅輔助雜交雜交莖瘤芥授粉的方法，其中，所述雜交莖瘤芥為‘甬榨5號’雜交品種；2月中旬定植，莖瘤芥開花前半個月，開始準備家蠅繁育，在莖瘤芥盛花期釋放家蠅進行授粉活動。3.上述2提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，其具體步驟如下：(1)制種基地和田塊的選擇：田塊選擇要求：至少3年未種過十字花科作物，周圍1千米以上沒有芥菜類蔬菜；同時，為了更好計算家蠅數量與莖瘤芥中間的比例，方便搭設網罩，將田塊分為4畦，畦寬也就是連溝1.5米，長度為45米；(2)播種：在11月下旬將莖瘤芥父本播種于露地，按照時間計算，母本于父本播種前7天播種；播種量按照每667m2400g的量，均勻撒播，播種后覆蓋0.3cm厚的細土拍實土面；(3)定植：施足基肥，每畝施氮磷鉀15-15-15的俄羅斯復合肥60kg、富力硼1.5kg；翌年2月中旬定植，父母本按1∶3種植，行株距30cm×30cm；確保周圍1000m內無其他芥菜類蔬菜；生長期根據葉形、葉色除雜5-6次；(4)家蠅繁殖：莖瘤芥開花前半個月，開始準備家蠅繁育；(5)網紗棚搭設：待植株現蕾后，選用40目網紗搭建簡易網紗棚，網紗棚以竹子為支柱，竹子高度為2.5米，入土深度為15cm；(6)蒼蠅授粉：莖瘤芥盛花期，把步驟(4)獲得的家蠅釋放入網紗罩中進行授粉；釋放家蠅頭數為16000-24000頭/畝；(7)殺除蒼蠅：莖瘤芥謝花后，結合病蟲害防治，對網紗罩內的蒼蠅進行殺除，有效防止蒼蠅帶來的污染；(8)種子采收：5月下旬，在父本花期拔除父本行；6月上旬種莢八成熟時收割，獲得莖瘤芥甬榨5號種子。4.上述3提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，其中，在步驟(8)種子采收前還需要進行田間管理，其具體步驟為：抽薹時，母本在現蕾和抽薹時噴300毫克/千克的多效唑，一個月內噴施三次，10天一次；在父本開花結束后，并在父本植株基部將其割斷，以改善制種田的通風透光條件；花期每畝用0.2％的富力硼水溶液和0.3％的KH2PO4，10天噴施一次，均勻噴施3次，使種莢飽滿，提高種子產量。5.上述4提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，其中，步驟(4)所述的家蠅繁殖包括如下步驟：①幼蟲飼養：將卵和產卵基質均勻撒在飼料上，幼蟲養蟲盒與集卵盒容積比例約為20∶1，幼蟲飼料為麥麩：奶粉∶水＝100∶1∶200，先將奶粉用溫水沖開，再把麥麩倒入奶水中，攪拌均勻，30℃左右黑暗環境下飼養；②收蛹：當幼蟲化蛹后，將上層干飼料和蛹收集起來，用篩子將蛹與飼料篩開，將收集到的蛹放入養蟲籠內。6.上述5提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，其中，在幼蟲飼養之前還需要進行收集種蠅和飼養成蠅，具體如下：①種蠅來源：用麥麩、奶粉和水配制成半干濕狀的產卵基質，將基質暴露于室內外，引誘家蠅產卵，麥麩∶奶粉∶水＝3∶1∶5，此后羽化出的成蠅即可作為種蠅；②飼養成蠅：把蛹放入養蟲籠里，放入白糖∶奶粉＝1∶1的稀糊狀飼料，同時添加水，室內23-25℃培養，3-4天即可羽化成蠅；成蠅產卵后收集蠅卵。7.上述6提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，其中，成蠅產卵后收集蠅卵的具體做法是：在成蟲羽化2-3天后，將裝有與步驟①相同的產卵基質集卵盒放于籠內，誘集成蟲產卵；每天收集1次，將卵連同產卵基質一起倒入裝有幼蟲飼料的養蟲盒內，進行幼蟲飼養；將成蟲籠內重新放入裝有新鮮產卵基質的集卵盒；18-22天后成蟲淘汰，將成蟲飼料和集卵盒取出，將其餓死，把養蟲籠清洗、消毒后待接種。8.上述7提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，所述收集次數為每天2次，分別為每天12時和16時；幼蟲飼養密度為每盒育幼蟲器中培養2160頭幼蟲。9.上述8提供的家蠅輔助雜交莖瘤芥授粉的方法，其中，接種前蟲卵消毒的具體方法為：在5％甲醛液中浸5分鐘，再用滅菌水洗3次，消毒蟲卵放在襯有滅菌濾紙的培養皿中培養，在幼蟲孵化后移入育蟲器中。在飼養成蠅過程中，為防止成蟲落入水中，盛水的培養皿中可放入海綿。每天更換飼料一次。成蟲產卵期間白糖、奶粉混合液和水不能中斷，否則影響其產卵及壽命。在幼蟲飼養過程中，配置幼蟲飼料時，用手抓調勻的麥麩輕輕握拳，飼料水分沿手指縫流出，但不滴落，松拳后飼料不松散即可，但在拌料是要根據麥麩吸水量而定。飼養過程中要根據家蠅幼蟲生長情況、密度及飼料消耗情況，如發現幼蟲外逃、飼料被取食光等情況，應及時補充新鮮飼料。5-6天后，幼蟲喜選擇干燥環境化蛹，此時在飼料上面撒一層干麥麩，以便幼蟲化蛹。本發明具有如下優點：1、本發明采用了家蠅作為授粉的媒介，經過試驗比對，發現經過家蠅授粉的種子畝產、種子千粒重和純度均明顯好意普通的意蜂授粉和壁蜂授粉。并且由于家蠅生活史短，繁殖率高，養殖設備簡單等優點，家蠅授粉具有很好的開發利用前途。2.本發明通過創造性的試驗，確定家蠅放入時間，通過合理的時間配合，有效的解決了莖瘤芥開花時間與家蠅繁殖時間不匹配的問題，通過良好的方法，控制家蠅數量保持在最佳的16000-24000頭/畝。經過試驗，明確了家蠅數量和釋放時間對莖瘤芥種子產量和千粒重均有明顯的影響。3.總體來說，由于家蠅授粉，使得授粉受氣溫、空氣濕度等天氣狀況減少，有效地避免了種子產量在不同年份間的大幅變化。該授粉方法具有操作簡單，授粉速度快，授粉均勻、集中、準確的優點，節約了人工成本高，解決了授粉效果差、制種產量低等問題，為更好地應用于生產提供一套授粉效率高、簡單易行的授粉技術。具體實施方式下面結合具體實施例對本發明。實施例1：于2014-2015年在東徑121°08’～121°54’，北緯29°37’～29°57’之間的寧波市鄞州區東錢湖鎮高錢村至五鄉鎮李家洋村種植區塊布點試驗，年平均氣溫16.2℃，年平均日照時2070小時，年均降水量1538.8毫米。(1)制種基地和田塊的選擇：制種田要選擇土壤肥沃、排灌方便、3年內未種過十字花科作物的田塊，周圍1千米以上沒有芥菜類蔬菜。莖瘤芥制種田一般長45米，分為4畦，畦寬(連溝)1.5米。這樣設計的目的是為了搭設網罩。(2)品種選擇選用‘甬榨5號’雜交品種。(3)播種日期和播種量所述雜交莖瘤芥父本于11月下旬露地播種，為使父母本花期相遇，所述母本較所述父本提前7天播種；每667m2播種量400g，均勻撒播，播種后覆蓋0.3cm厚的細土拍實土面。(4)定植及田間管理施足基肥，每畝施氮磷鉀15-15-15的俄羅斯復合肥60kg、富力硼1.5kg；翌年2月中旬定植，父母本按1∶3種植，行株距30cm×30cm；確保周圍1000m內無其他芥菜類蔬菜；生長期根據葉形、葉色除雜5～6次；抽薹時，母本在現蕾和抽薹時噴300毫克/千克的多效唑，一個月內噴施三次，10天一次；在父本開花結束后，并在父本植株基部將其割斷，以改善制種田的通風透光條件；花期每畝用0.2％的富力硼水溶液和0.3％的KH2PO4，10天噴施一次，均勻噴施3次，使種莢飽滿，提高種子產量；(5)家蠅繁殖莖瘤芥開花前半個月，開始準備家蠅繁育，主要步驟如下：a將適宜的產卵基質暴露于室內外，引誘家蠅產卵，此后羽化出成蠅即可作為種蠅。產卵基質用麥麩、奶粉加水配制成半干濕狀即成。b把蛹放在種蠅籠內，在室內24℃左右溫度下培養，3～4天即可羽化，在成蟲羽化前籠內分別放入裝有白糖、奶粉＝1∶1混合液(調成稀糊狀)和水的培養皿，供成蟲羽化后食用。糖、奶粉的混合液和水供應不能中斷，否則成蟲會大量死亡。為了防止成蟲落在水中，盛水的培養皿中要放入一塊海綿。在23℃以下時，可于每日上午將飼料盤取出洗滌后重新加入飼料，同時更換培養皿中的飼水，保持清潔，氣溫在24～30℃時家蠅取食旺盛，產卵多，每日上、下午各換飼料和飲水一次，成蟲羽化2～3天后開始交尾，4天后開始產卵。成蟲產卵期間，相對濕度不可過高，否則成蟲產卵不成塊，每頭成蠅每天消耗白糖0.5mg，奶粉0.5mg，按飼養頭數換算后供給適當的營養，另外要注意成蠅外逃，嚴格衛生防疫。c蠅卵的收集飼養成蠅的目的是為了獲取大量優良蠅卵。成蠅羽化后3天時就要在籠中放入集卵盒，集卵盒中松散地放置誘集產卵的物質(前面已介紹)，家蠅產卵多在8時至15時，所以每天在12時和16時各收集1次，將卵連同誘集產卵的物質一起倒入飼料中，將卵盒洗后再放入新鮮的誘集產卵物質，重新放入蠅籠。成蠅產卵期25天左右，但高峰在前15天，一般羽化后，飼養20天即可淘汰，淘汰時將籠中飼料盤、飲水器、集卵盒取出，使之餓死，成蠅清除后用稀堿水浸泡蠅籠，消毒清洗后晾干再用。d幼蟲飼養接種時將蠅卵均勻撒在飼料面上，飼料可以用麥麩+白糖+水拌成半干狀態，每立方厘米放置20～25粒，即每盒育幼蟲器中可培養1920～2400頭幼蟲，其平均值為2160頭，幼蟲的飼養在溫箱中30℃黑暗條件下，幼蟲孵化后逐漸向下取食，在幼蟲不斷取食活動下，飼料逐漸松散成海綿狀殘渣，臭味大為減少，含水量下降，體積也縮小。此時，根據生長情況、幼蟲密度以及飼料消耗情況，及時適當補充新鮮飼料，否則幼蟲將外爬。3天以后，將上層變色飼料和排泄物除去，再添加新鮮飼料。飼料盒中的幼蟲要保持適當的密度，如蟲數太少，剩余飼料就會結塊或發霉；如蟲數太多，因過分擁擠和營養不足，得到的蛹較小；當幼蟲數適當時，幼蟲取食活躍，發育整齊，這時飼料既能充分利用也不會發霉。在30℃恒溫下，經4～5個晝夜，幼蟲個體可達20～25mg，總生物量增加250～350倍，幼蟲趨于老熟，幼蟲孵化5～6天就達到老熟，老熟幼蟲選擇干燥的環境化蛹，如化蛹前食料中的水分過多，會造成幼蟲外逃，此時，可在飼料表層撒一層干的麥麩，為幼蟲提供化蛹環境。當多數幼蟲化蛹后，將上層的干飼料和蛹一起收集起來，用分樣篩將蛹與飼料分開。蛹集中后，分放到成蟲飼養籠中，暫時不用的蛹，可放在冰箱中保存。在10℃下，保存5天的蛹羽化率達95％，保存10天的達83％，保存2周的達60％。e蟲卵滅菌蟲卵用滅菌水洗后，在5％甲醛液中浸5分鐘，再用滅菌水洗數次，消毒蟲卵放在襯有滅菌濾紙的培養皿中培養，幼蟲孵化后移入育幼蟲容器中，飼養溫度為30℃。(6)網紗棚搭設。待植株現蕾后，搭建簡易網紗棚，選用40目的網紗。毛竹的直徑為10厘米，高度2.5米，一般入土深度15厘米。(7)蒼蠅授粉莖瘤芥盛花期，把蒼蠅釋放進入網紗罩，進行授粉。(8)殺除蒼蠅莖瘤芥謝花后，結合病蟲害防治，對網紗罩內的蒼蠅進行殺除，有效防止蒼蠅帶來的污染。(9)種子采收5月下旬，為防止制種田父、母本種株上的種子發生機械混雜，在父本花期末拔除父本行；6月上旬種莢八成熟時收割，獲得莖瘤芥甬榨5號種子。實施例2(1)不同授粉方式對雜交莖瘤芥種子產量、千粒重和純度的影響試驗地點：浙江省寧波市鄞州區東錢湖鎮高錢村寧波高新農業技術實驗園區試驗方法：2014年11月～2015年6月進行，莖瘤芥品種為‘甬榨5號’(浙江省審定品種，寧波市農業科學研究院和浙江大學農業與生物技術學院聯合選育)。2014年11月25日露地育苗，2015年2月16日定植，6月9日采收種子。試驗分別采用蒼蠅授粉、意蜂授粉、壁蜂授粉3種方式，網紗罩采用40目網紗。試驗點搭設12個網紗棚，面積675平方米。結果取平均值。試驗結果：從試驗結果可以看出，蒼蠅授粉的種子畝產明顯高于意蜂授粉和壁蜂授粉。蒼蠅授粉的種子千粒重和純度也明顯好于意蜂授粉和壁蜂授粉。3種昆蟲授粉的效果好于人工趕花。表1不同授粉方式對莖瘤芥種子產量和質量的影響留種方式種子產量(千克/畝)千粒重(克)純度(％)蒼蠅授粉36.71.3199.2意蜂授粉25.41.1995.2壁蜂授粉24.81.0995.1人工趕花14.51.0595.0(2)不同授粉昆蟲訪花次數的差異試驗地點：浙江省寧波市鄞州區東錢湖鎮高錢村寧波高新農業技術實驗園區試驗方法：2015年11月～2016年6月進行，莖瘤芥品種為‘甬榨5號’(寧波市農業科學研究院和浙江大學農業與生物技術學院聯合選育)。2015年11月26日露地育苗，2016年2月15日定植，6月7日采收種子。試驗分別采用蒼蠅授粉、意蜂授粉、壁蜂授粉3種方式，網紗罩采用40目網紗。試驗點搭設9個網紗棚，每個棚面積675平方米，結果取平均值。試驗結果：從試驗結果可以看出，蒼蠅無論在晴天還是在陰雨天，訪花次數明顯高于意蜂和壁蜂。蒼蠅授粉增加了莖瘤芥授粉的機率。表2不同授粉媒介昆蟲訪花次數天氣類型蒼蠅意蜂壁蜂晴天20.812.711.80陰雨天19.410.711.70平均-20.111.711.75(3)網紗棚釋放家蠅的不同數量對莖瘤芥種子產量和千粒重的影響試驗地點：浙江省寧波市鄞州區東錢湖鎮高錢村寧波高新農業技術實驗園區試驗方法：2015年11月～2016年6月進行，莖瘤芥品種為‘甬榨5號’(寧波市農業科學研究院和浙江大學農業與生物技術學院聯合選育)。2015年11月26日露地育苗，2016年2月15日定植，6月7日采收種子。試驗分別采用家蠅授粉，網紗罩采用40目網紗。試驗點搭設15個網紗棚，每個處理3個網紗棚，每個棚面積675平方米，結果取平均值。試驗結果：從試驗結果可以看出，每畝釋放20000頭蒼蠅的效果最好，在16000-24000范圍，對種子產量和千粒重不具有顯著性影響，但當蒼蠅數量達到14000及以下或者26000及以上就會產生顯著性影響，說明蒼蠅數量對雜交莖瘤芥種子產量和千粒重具有作用。表3網紗棚釋放家蠅的不同數量對莖瘤芥種子產量的影響家蠅數量(頭/畝)種子產量(千克/畝)千粒重(克)1200021.5b0.99b1400023.7b1.08b1600026.8a1.19a1800035.4a1.23a2000036.9a1.32a2200035.3a1.28a2400035.0a1.22a2600026.9b0.98b2800025.4b0.87b注：a、b顯示在5％水平上的差異(4)家蠅的釋放時間對莖瘤芥種子產量和千粒重的影響試驗地點：浙江省寧波市鄞州區東錢湖鎮高錢村寧波高新農業技術實驗園區試驗方法：2015年11月～2016年6月進行，莖瘤芥品種為‘甬榨5號’(寧波市農業科學研究院和浙江大學農業與生物技術學院聯合選育)。2015年11月26日露地育苗，2016年2月15日定植，6月7日采收種子。試驗分別采用家蠅授粉，網紗罩采用40目網紗。試驗點搭設15個網紗棚，每個處理3個網紗棚，每個棚面積675平方米，結果取平均值。試驗結果：從試驗結果可以看出，開花前10天釋放家蠅的效果最好。過早或者過遲都會造成雜交莖瘤芥種子產量和千粒重的降低。釋放時間種子產量(千克/畝)千粒重(克)開花前15天34.81.16開花前10天35.91.25開花前5天29.81.21開花后5天24.91.18開花后10天23.41.10可以知道，上述實施例僅為了說明發明原理而采用的示例性實施方式，然而本發明不僅限于此，本領域技術人員在不脫離本發明實質情況下，可以做出各種改進和變更，這些改進和變更也屬于本發明的保護范圍。當前第1頁1 2 3