本發(fā)明涉及雜交育種技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種七彩鮭與虹鱒親魚(yú)的同步成熟控制方法。
背景技術(shù)：
虹鱒(Oncorhynchus mykiss)隸屬鮭形目鮭科大麻哈魚(yú)屬,原產(chǎn)于北美洲西部太平洋沿岸的山澗溪流，常年生活在淡水水域，是大麻哈屬中為數(shù)不多的不進(jìn)行降海洄游的種類(lèi)之一。虹鱒原被分至鮭屬(Salmo)，1988年其分類(lèi)地位從鮭屬(Salmo)改為大麻哈魚(yú)屬(Oncorhynchus)。虹鱒具有肉質(zhì)鮮嫩、味美、無(wú)腥味、無(wú)肌間刺和營(yíng)養(yǎng)全面等特點(diǎn)，特別是富含高度不飽和脂肪酸EPA(二十碳戊烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)，已被廣泛的引種與馴化，現(xiàn)已遍及世界五大洲，成為聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織推薦的、當(dāng)今世界養(yǎng)殖分布最廣的魚(yú)類(lèi)之一。我國(guó)的虹鱒最早于1959年由朝鮮引入，此后又從日本、美國(guó)等引入一些品系。七彩鮭(Salvelinus fontinalus),學(xué)名為美洲紅點(diǎn)鮭，又名溪紅點(diǎn)鮭，隸屬于鮭形目鮭科紅點(diǎn)鮭屬，于2004年引進(jìn)我國(guó)，其體色鮮艷、抗病力強(qiáng)，成活率高，是繼虹鱒、金鱒之后的又一冷水魚(yú)養(yǎng)殖新品種。
由于引入虹鱒親本數(shù)量有限和長(zhǎng)時(shí)間的累代養(yǎng)殖,遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化,種質(zhì)也發(fā)生了退化。種質(zhì)退化嚴(yán)重制約了虹鱒魚(yú)養(yǎng)殖生產(chǎn)效率,迫切需要利用雜交育種技術(shù)增加虹鱒雜交后代的遺傳多樣性,培育出具有雙親優(yōu)良性狀的雜交后代。此外，傳染性造血器官壞死病(IHN)在遼寧、河北、甘肅、山東、北京等地虹鱒養(yǎng)殖中感染率在10％-70％之間，而且發(fā)病時(shí)會(huì)引起較高的死亡率，成為嚴(yán)重危害我國(guó)虹鱒魚(yú)產(chǎn)業(yè)的重要疫病。鑒于當(dāng)前虹鱒魚(yú)受危害較大且無(wú)有效的防治措施，采用雜交育種技術(shù)培育出抗病的雜交后代是解決該病毒病的有效途徑之一。
目前已有多家單位嘗試采用七彩鮭與虹鱒進(jìn)行雜交育種，其中正交苗(七彩鮭雄魚(yú)與虹鱒雌魚(yú))經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)、抗病試驗(yàn)及形態(tài)學(xué)測(cè)量，具有生長(zhǎng)快，抗病力強(qiáng)，與母本表現(xiàn)型相似度高的特點(diǎn),但是七彩鮭雄魚(yú)與虹鱒雌魚(yú)的性成熟不同步，成為限制其雜交育種工作的重要制約因素。
鑒于上述描述，亟待有一種七彩鮭雄魚(yú)與虹鱒雌魚(yú)的同步成熟的控制方法出現(xiàn)，從而保證充足的親魚(yú)用于雜交，有效提高育種工作的效率。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種七彩鮭與虹鱒親魚(yú)的同步成熟控制方法，其能夠?qū)⑵卟术q雄魚(yú)與虹鱒雌魚(yú)的同步成熟率提高至85.7％，達(dá)到了七彩鮭親魚(yú)和虹鱒親魚(yú)基本同步的效果，保證了充足的雜交親魚(yú)數(shù)量，有助于推廣七彩鮭和虹鱒雜交育種工作。
為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種七彩鮭與虹鱒親魚(yú)的同步成熟控制方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟一、將母本虹鱒親魚(yú)3齡和父本七彩鮭親魚(yú)2-3齡分池培育，平均日光照時(shí)間為7.7-8小時(shí)，水溫為8-10℃；
步驟二、定期檢測(cè)母本虹鱒親魚(yú)卵巢發(fā)育程度，待母本虹鱒親魚(yú)卵巢發(fā)育到Ⅲ期末、Ⅳ期初時(shí)，每3d進(jìn)行一次1.8-2.2h流水刺激，水的流速為22-25cm/s，并同時(shí)調(diào)節(jié)培育池的水溫由8-10℃逐漸降至5.5-6.5℃，持續(xù)培養(yǎng)30-45d；
待母本虹鱒親魚(yú)開(kāi)始流水刺激同時(shí)，將父本七彩鮭親魚(yú)移至平均日光照時(shí)間為5.5-5.8h的培育池中繼續(xù)培養(yǎng)，并進(jìn)行每天1次，1次5.5-6.5h的流水刺激，水的流速為22-25cm/s，持續(xù)培養(yǎng)30-45d；
在培育過(guò)程中，母本虹鱒親魚(yú)每周投喂鮮魚(yú)1次，每周總投喂量占-體重的質(zhì)量百分比為3％；父本七彩鮭親魚(yú)每日投喂鮮魚(yú)1次，每日總投喂量占-體重的質(zhì)量百分比為0.5-1.5％；并且，母本虹鱒親魚(yú)每日投喂商品飼料2次，日投喂量占-體重的質(zhì)量百分比為0.8-1.5％；父本七彩鮭親魚(yú)每日投喂顆粒飼料2次，日投喂量占體重的質(zhì)量百分比為0.8-1.5％；其中，按重量份數(shù)計(jì)，所述顆粒飼料由以下組分制備成：商品飼料92-93份、糠蝦1-2份、雞蛋3-4份、魚(yú)油1-2份和復(fù)合多維0.5-1份。
優(yōu)選的是，所述步驟一中，將母本虹鱒親魚(yú)3齡和父本七彩鮭親魚(yú)2-3齡分池培育，培育密度為4尾/m2；
母本虹鱒親魚(yú)和父本七彩鮭親魚(yú)每周各投喂鮮魚(yú)1次，投喂量分別占母本虹鱒親魚(yú)體重和父本七彩鮭親魚(yú)體重的質(zhì)量百分比為3％；并且，每日投喂商品飼料2次，日投餌量分別占母本虹鱒親魚(yú)體重和父本七彩鮭親魚(yú)體重的質(zhì)量百分比為0.8-1.5％。
優(yōu)選的是，所述步驟一中，母本虹鱒親魚(yú)平均規(guī)格為1.58kg/尾；父本七彩鮭親魚(yú)平均規(guī)格為1.48kg/尾。
優(yōu)選的是，所述步驟二中，待母本虹鱒親魚(yú)卵巢發(fā)育到Ⅲ期末、Ⅳ期初時(shí)，每3d進(jìn)行一次2h流水刺激，水的流速為22cm/s，并同時(shí)調(diào)節(jié)培育池的水溫由9℃逐漸降至6℃，持續(xù)培養(yǎng)45d。
優(yōu)選的是，待母本虹鱒親魚(yú)開(kāi)始流水刺激同時(shí)，將父本七彩鮭親魚(yú)移至平均日光照時(shí)間為5.8h的培育池中繼續(xù)培養(yǎng)，并進(jìn)行每天1次，1次6h的流水刺激，水的流速為25cm/s，持續(xù)培養(yǎng)45d。
優(yōu)選的是，按重量份數(shù)計(jì)，所述顆粒飼料由以下組分制備成：商品飼料92-93份、糠蝦1-2份、雞蛋3份、魚(yú)油2份和復(fù)合多維1份。
優(yōu)選的是，還包括以下步驟：
將步驟二中沒(méi)有性腺成熟的父本七彩鮭親魚(yú)按10-3mg/kg體重注射催產(chǎn)激素LRH-A31次，促使父本七彩鮭親魚(yú)性腺成熟。
優(yōu)選的是，將步驟二中沒(méi)有性腺成熟的父本七彩鮭親魚(yú)按10-3mg/kg體重注射催產(chǎn)激素LRH-A3 2次，2次間隔3-5d，促使父本七彩鮭親魚(yú)性腺成熟。
優(yōu)選的是，所述步驟一中，母本虹鱒親魚(yú)和父本七彩鮭親魚(yú)的分池培育的數(shù)量比例為1:0.8-1。
優(yōu)選的是，所述步驟二中，在流水刺激的同時(shí)，采用向母本虹鱒親魚(yú)的培育池中加入冰塊的方法，使得培育池的水溫由8-10℃逐漸降至5.5-6.5℃。
本發(fā)明至少包括以下有益效果：
魚(yú)卵和精子主要成分是蛋白質(zhì)，顆粒飼料中蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸和卵磷脂是親魚(yú)性腺發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)素，含量的高低直接影響其性腺發(fā)育，特別七彩鮭的養(yǎng)殖環(huán)境與自然繁殖環(huán)境差異較大，必須提供更豐富更均衡的營(yíng)養(yǎng)，因此，本發(fā)明在步驟二中，加大鮮魚(yú)投喂量、飼料中添加糠蝦增加了動(dòng)物蛋白質(zhì)的供給，魚(yú)油及雞蛋保證了不飽和脂肪酸和卵磷脂所需，調(diào)控七彩鮭親魚(yú)和虹鱒親魚(yú)在提前10多天成熟的情況下，卵子和精子質(zhì)量十分理想，產(chǎn)后七彩鮭親魚(yú)和虹鱒親魚(yú)零傷亡；
溫度對(duì)魚(yú)類(lèi)性腺發(fā)育、成熟速度具有顯著影響，為溫度調(diào)控確定繁育時(shí)間提供了可能性，本發(fā)明在步驟二中逆向?qū)琪V親魚(yú)采取降溫培育，延緩性腺成熟、推遲產(chǎn)卵，達(dá)到了如期效果；
光刺激通過(guò)中樞神經(jīng)，引起腦垂體的分泌活動(dòng)，從而影響性腺發(fā)育，魚(yú)類(lèi)的生殖周期在很大程度上受光照時(shí)間長(zhǎng)短的調(diào)節(jié)。本發(fā)明中對(duì)七彩鮭親魚(yú)培育池進(jìn)行了調(diào)整，降低其平均日光照時(shí)間，利用跌級(jí)落差加大水流刺激，減小閘門(mén)寬度加大流速，實(shí)現(xiàn)了七彩鮭親魚(yú)的促熟，成熟時(shí)間較常規(guī)養(yǎng)殖的七彩鮭親魚(yú)提前12d左右；
通過(guò)本發(fā)明的人為控制，將虹鱒和七彩鮭親魚(yú)的成熟交匯時(shí)間由原來(lái)的1個(gè)月延長(zhǎng)到2個(gè)月以上，最長(zhǎng)推遲至12月底，滿(mǎn)足了市場(chǎng)雜交苗種的需求，也為冷水魚(yú)苗種的反季節(jié)生產(chǎn)提供了技術(shù)保障。
綜上所述，本發(fā)明對(duì)七彩鮭與虹鱒親魚(yú)采用營(yíng)養(yǎng)控制、水溫變化、光照變化和水流刺激等多種方法結(jié)合的方式，進(jìn)行七彩鮭與虹鱒親魚(yú)同步性成熟控制，七彩鮭與虹鱒親魚(yú)同步成熟率達(dá)到85.7％，保證了充足的雜交親魚(yú)數(shù)量，有助于推廣七彩鮭和虹鱒雜交育種工作。
本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明所述的七彩鮭與虹鱒親魚(yú)的規(guī)模化同步成熟控制方法的流程圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文字能夠據(jù)以實(shí)施。
應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術(shù)語(yǔ)并不配出一個(gè)或多個(gè)其它元件或其組合的存在或添加。
商品飼料采用購(gòu)自北京漢業(yè)先科科技有限公司的漢業(yè)牌鱒魚(yú)親魚(yú)配合飼料，飼料主要成分為魚(yú)粉、豆粕、小麥粉、玉米蛋白粉、谷朊粉、啤酒酵母、魚(yú)油、復(fù)合多維、復(fù)合微量元素、磷酸二氫鈣等，其中粗蛋白≥42％、粗脂肪≥8％、粗纖維≤5％、粗灰分≤14％、水分≤12％、賴(lài)氨酸≥2.6％總磷≥0.9％。
如圖1所示，本發(fā)明提供一種七彩鮭與虹鱒親魚(yú)的同步成熟控制方法，包括以下步驟：
步驟一、將母本虹鱒親魚(yú)3齡和父本七彩鮭親魚(yú)2-3齡分池培育，平均日光照時(shí)間為7.7-8h，水溫為8-10℃；
步驟二、定期檢測(cè)母本虹鱒親魚(yú)卵巢發(fā)育程度，待母本虹鱒親魚(yú)卵巢發(fā)育到Ⅲ期末、Ⅳ期初時(shí)，每3d進(jìn)行一次1.8-2.2h流水刺激，水的流速為22-25cm/s，并同時(shí)調(diào)節(jié)培育池的水溫由8-10℃逐漸降至5.5-6.5℃，持續(xù)培養(yǎng)30-45d；
待母本虹鱒親魚(yú)開(kāi)始流水刺激同時(shí)，將父本七彩鮭親魚(yú)移至平均日光照時(shí)間為5.5-5.8小時(shí)的培育池中繼續(xù)培養(yǎng)，并進(jìn)行每天1次，1次5.5-6.5h的流水刺激，水的流速為22-25cm/s，持續(xù)培養(yǎng)30-45d；
在培育過(guò)程中，母本虹鱒親魚(yú)每周投喂鮮魚(yú)1次，每周總投喂量占體重的質(zhì)量百分比為3％；父本七彩鮭親魚(yú)每日投喂鮮魚(yú)1次，每日總投喂量占體重的質(zhì)量百分比為0.5-1.5％；并且，母本虹鱒親魚(yú)每日投喂商品飼料2次，日投喂量體重的質(zhì)量百分比為0.8-1.5％；父本七彩鮭親魚(yú)每日投喂顆粒飼料2次，日投喂量占體重的質(zhì)量百分比為0.8-1.5％；其中，按重量份數(shù)計(jì)，所述顆粒飼料由以下組分制備成：商品飼料92-93份、糠蝦1-2份、雞蛋3-4份、魚(yú)油1-2份和復(fù)合多維0.5-1份。
魚(yú)卵和精子主要成分是蛋白質(zhì)，顆粒飼料中蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸和卵磷脂是親魚(yú)性腺發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)素，含量的高低直接影響其性腺發(fā)育，特別七彩鮭的養(yǎng)殖環(huán)境與自然繁殖環(huán)境差異較大，必須提供更豐富更均衡的營(yíng)養(yǎng)，因此，本發(fā)明在步驟二中，加大鮮魚(yú)投喂量、飼料中添加糠蝦增加了動(dòng)物蛋白質(zhì)的供給，魚(yú)油及雞蛋保證了不飽和脂肪酸和卵磷脂所需，調(diào)控七彩鮭親魚(yú)和虹鱒親魚(yú)在提前10多天成熟的情況下，卵子和精子質(zhì)量十分理想，產(chǎn)后七彩鮭親魚(yú)和虹鱒親魚(yú)零傷亡；
溫度對(duì)魚(yú)類(lèi)性腺發(fā)育、成熟速度具有顯著影響，為溫度調(diào)控確定繁育時(shí)間提供了可能性，本發(fā)明在步驟二中逆向?qū)琪V親魚(yú)采取降溫培育，延緩性腺成熟、推遲產(chǎn)卵，達(dá)到了如期效果；
光刺激通過(guò)中樞神經(jīng)，引起腦垂體的分泌活動(dòng)，從而影響性腺發(fā)育，魚(yú)類(lèi)的生殖周期在很大程度上受光照時(shí)間長(zhǎng)短的調(diào)節(jié)。本發(fā)明中對(duì)七彩鮭親魚(yú)培育池進(jìn)行了調(diào)整，降低其平均日光照時(shí)間，利用跌級(jí)落差加大水流刺激，減小閘門(mén)寬度加大流速，實(shí)現(xiàn)了七彩鮭親魚(yú)的促熟，成熟時(shí)間較常規(guī)養(yǎng)殖的七彩鮭親魚(yú)提前12d左右；
通過(guò)本發(fā)明的人為控制，將虹鱒和七彩鮭親魚(yú)的成熟交匯時(shí)間由原來(lái)的1個(gè)月延長(zhǎng)到2個(gè)月以上，最長(zhǎng)推遲至12月底，滿(mǎn)足了市場(chǎng)雜交苗種的需求，也為冷水魚(yú)苗種的反季節(jié)生產(chǎn)提供了技術(shù)保障。
綜上所述，本發(fā)明對(duì)七彩鮭與虹鱒親魚(yú)采用營(yíng)養(yǎng)控制、水溫變化、光照變化和水流刺激等多種方法結(jié)合的方式，進(jìn)行七彩鮭與虹鱒親魚(yú)同步性成熟控制，七彩鮭與虹鱒親魚(yú)同步成熟率達(dá)到85.7％，保證了充足的雜交親魚(yú)數(shù)量，有助于推廣七彩鮭和虹鱒雜交育種工作。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，所述步驟一中，將母本虹鱒親魚(yú)3齡和父本七彩鮭親魚(yú)2-3齡分池培育，培育密度為4尾/m2；
母本虹鱒親魚(yú)和父本七彩鮭親魚(yú)每周各投喂鮮魚(yú)1次，投喂量分別占母本虹鱒親魚(yú)體重和父本七彩鮭親魚(yú)體重的質(zhì)量百分比為3％；并且，每日投喂商品飼料2次，日投餌量分別占母本虹鱒親魚(yú)體重和父本七彩鮭親魚(yú)體重的質(zhì)量百分比為0.8-1.5％。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，所述步驟一中，母本虹鱒親魚(yú)平均規(guī)格為1.58kg/尾；父本七彩鮭親魚(yú)平均規(guī)格為1.48kg/尾。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，所述步驟二中，待母本虹鱒親魚(yú)卵巢發(fā)育到Ⅲ期末、Ⅳ期初時(shí)，每3d進(jìn)行一次2h流水刺激，水的流速為22cm/s，并同時(shí)調(diào)節(jié)培育池的水溫由9℃逐漸降至6℃，持續(xù)培養(yǎng)45d。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，待母本虹鱒親魚(yú)開(kāi)始流水刺激同時(shí)，將父本七彩鮭親魚(yú)移至平均日光照時(shí)間為5.8h的培育池中繼續(xù)培養(yǎng)，并進(jìn)行每天1次，1次6h的流水刺激，水的流速為25cm/s，持續(xù)培養(yǎng)45d。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，按重量份數(shù)計(jì)，所述顆粒飼料由以下組分制備成：商品飼料92-93份、糠蝦1-2份、雞蛋3份、魚(yú)油2份和復(fù)合多維1份。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，還包括以下步驟：
將步驟二中沒(méi)有性腺成熟的父本七彩鮭親魚(yú)按10-3mg/kg體重注射催產(chǎn)激素LRH-A3 1次，促使父本七彩鮭親魚(yú)性腺成熟。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，將步驟二中沒(méi)有性腺成熟的父本七彩鮭親魚(yú)按10-3mg/kg體重注射催產(chǎn)激素LRH-A3 2次，2次間隔3～5d，促使父本七彩鮭親魚(yú)性腺成熟。
在實(shí)際應(yīng)用中，為了達(dá)到更好的親魚(yú)規(guī)模化同步成熟效果，往往需要給沒(méi)有達(dá)到性腺成熟的個(gè)別父本七彩鮭親魚(yú)再注射一次或兩次的催產(chǎn)激素LRH-A3，使得親魚(yú)同步成熟率高達(dá)85.7％，并且，經(jīng)前期的規(guī)模化同步成熟控制方法處理后，再經(jīng)注射一次或兩次的催產(chǎn)激素LRH-A3至性腺成熟的父本七彩鮭親魚(yú)中，七彩鮭親魚(yú)的精子數(shù)量充足，活力很強(qiáng)；效果遠(yuǎn)勝于直接通過(guò)多次注射催產(chǎn)激素LRH-A3促熟的七彩鮭親魚(yú)的精子質(zhì)量。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，所述步驟一中，母本虹鱒親魚(yú)和父本七彩鮭親魚(yú)的分池培育的數(shù)量比例為1:0.8-1。
在一個(gè)優(yōu)選方案中，所述步驟二中，在流水刺激的同時(shí)，采用向母本虹鱒親魚(yú)的培育池中加入冰塊的方法，使得培育池的水溫由8-10℃逐漸降至5.5-6.5℃。
應(yīng)用上述方法對(duì)七彩鮭與虹鱒親魚(yú)進(jìn)行規(guī)模化同步成熟控制處理：
1材料與方法
1.1材料 雜交親魚(yú)均由昌源漁場(chǎng)自行培育，母本虹鱒親魚(yú)3齡，平均規(guī)格1.58kg/尾；父本七彩鮭親魚(yú)3齡，平均規(guī)格1.48kg/尾。
1.2方法
步驟1、母本、父本基礎(chǔ)培育方法同虹鱒、七彩鮭，為保障受精效果，虹鱒、七彩鮭的比例按1:0.8-1選擇，分池培育，
步驟2、利用挖卵器檢查虹鱒卵巢發(fā)育情況，待卵巢發(fā)育到Ⅲ期末、Ⅳ期初時(shí)，采取加冰方法使虹鱒親魚(yú)培育池的溫度由9℃循序降至6℃，流水刺激由1d1次、每次2h降至3d 1次、每次1h；
同時(shí)對(duì)七彩鮭雄魚(yú)移至照射時(shí)間短的東南圍墻邊3#池，平均日光照時(shí)間較虹鱒及其它親魚(yú)減少2.2h,每日投喂鮮魚(yú)1次，在親魚(yú)培育商品飼料中格外加入糠蝦(1-2％)、雞蛋(3％)、魚(yú)油(2％)、多維(1％)，混勻后重新制成軟顆粒投喂，流水刺激每天1次、1次6h；
步驟3、30-45d后將人工調(diào)控的親魚(yú)與正常培育的親魚(yú)的性腺進(jìn)行比較，對(duì)發(fā)育依然較慢的七彩鮭親魚(yú)按10-3mg/kg體重注射LRH-A3(促黃體素釋放激素A3，促排卵素3號(hào))，促使性腺成熟。
試驗(yàn)分為兩次，其中2013.9.10-10.25分別對(duì)七彩鮭雄魚(yú)、虹鱒雌魚(yú)親本進(jìn)行溫度、沖水、飼喂等調(diào)控，對(duì)七彩鮭進(jìn)行LRH-A3注射；2014.9.1-2014.10.15同時(shí)對(duì)七彩鮭雄魚(yú)、虹鱒雌魚(yú)親本采取調(diào)控措施，七彩鮭未注射LRH-A3。
2結(jié)果
2.1調(diào)控的虹鱒親魚(yú)發(fā)育狀況
30d后，用挖卵器分別檢測(cè)經(jīng)過(guò)生殖調(diào)控的虹鱒親魚(yú)及正常培育的親魚(yú)，調(diào)控魚(yú)的卵巢基本在Ⅳ早期，個(gè)別發(fā)育至Ⅳ中期，卵粒未分離，正常培育的親魚(yú)卵巢幾乎都在Ⅳ后期，卵粒分離、個(gè)體較大；各解剖3條親魚(yú)，試驗(yàn)親魚(yú)成熟系數(shù)平均為10.2％，對(duì)照親魚(yú)成熟系數(shù)平均為17.8％；調(diào)控措施起到了延緩虹鱒親魚(yú)性腺發(fā)育的作用。
2.2調(diào)控的七彩鮭親魚(yú)發(fā)育狀況
撈取試驗(yàn)七彩鮭和正常培育的七彩鮭雄魚(yú)各10尾，試驗(yàn)的七彩鮭體表更加艷麗，斑點(diǎn)耀目，第二性征十分明顯，擠壓腹部，3條有少數(shù)精液流出；解剖檢查，被調(diào)控的親魚(yú)精巢粗大，末端研碎鏡檢均能看到成熟的精子，活力較好。正常培育的親魚(yú)不能擠出精液，精巢較硬，顯微鏡未觀察到有活力的精子。
七彩鮭親魚(yú)被注射LRH-A3后，7d時(shí)即起到了促熟作用，75％的親魚(yú)能夠擠出精液。
2.3親魚(yú)同步成熟情況
采用雌雄親本分別調(diào)控30-45d，與正常飼養(yǎng)的親魚(yú)進(jìn)行雜交，以及調(diào)控后的親本之間雜交，后代的受精率、發(fā)眼率、破膜率沒(méi)有明顯區(qū)別，基本在90％左右。
通過(guò)虹鱒或七彩鮭的單方控制，與正常培育的親本比較，同步成熟率可達(dá)70％以上；通過(guò)虹鱒、七彩鮭的兩方控制，雜交親魚(yú)的同步成熟率可達(dá)85.7％；而未經(jīng)調(diào)控的七彩鮭及虹鱒其同步成熟率僅為27.6％。詳見(jiàn)下表1。
表1不同組合同步成熟情況
2.4七彩鮭、虹鱒雜交試驗(yàn)結(jié)果
2012年首次嘗試七彩鮭、虹鱒雜交，并獲得七彩鮭(♂)與虹鱒(♀)雜交苗20000余尾。2013-2014年繼續(xù)擴(kuò)大雜交規(guī)模，先后進(jìn)行七彩鮭(♂)、虹鱒(♀)正交650組，其中收獲正交發(fā)眼卵200萬(wàn)粒，培育雜交苗102余萬(wàn)尾；進(jìn)行反交15批，受精率、發(fā)眼率僅為27％、20.1％，胚胎在各期均有發(fā)育終止現(xiàn)象，發(fā)眼卵活力差，血液循環(huán)微弱，未得到反交苗。
3討論
3.1營(yíng)養(yǎng) 魚(yú)卵和精子主要成分是蛋白質(zhì)，親魚(yú)餌料中蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸和卵磷脂是親魚(yú)性腺發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)素，含量的高低直接影響其性腺發(fā)育，特別七彩鮭的養(yǎng)殖環(huán)境與自然繁殖環(huán)境差異較大，必須提供更豐富更均衡的營(yíng)養(yǎng)。加大鮮魚(yú)投喂量、飼料中添加糠蝦增加了動(dòng)物蛋白質(zhì)的供給，魚(yú)油及雞蛋保證了不飽和脂肪酸和卵磷脂所需，調(diào)控魚(yú)在提前10多天成熟的情況下，精子質(zhì)量十分理想，產(chǎn)后親魚(yú)零傷亡。
3.2溫度 溫度對(duì)魚(yú)類(lèi)性腺發(fā)育、成熟速度具有顯著影響，為溫度調(diào)控確定繁育時(shí)間提供了可能性。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，保定市的幾家虹鱒魚(yú)苗種生產(chǎn)場(chǎng)由于培育溫度不同，繁殖時(shí)間差異很大，最早自8月開(kāi)始，最晚的要到翌年1月，說(shuō)明虹鱒達(dá)到性腺成熟的有效積溫基本一致。因此，在本發(fā)明中我們對(duì)虹鱒親魚(yú)采取降溫培育，延緩性腺成熟、推遲產(chǎn)卵，達(dá)到了如期效果。
3.3光照和流水 光刺激通過(guò)中樞神經(jīng)，引起腦垂體的分泌活動(dòng)，從而影響性腺發(fā)育。魚(yú)類(lèi)的生殖周期在很大程度上受光照時(shí)間長(zhǎng)短的調(diào)節(jié)。在溫帶地區(qū)，一次產(chǎn)卵類(lèi)型的淡水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)，一般在春節(jié)或春夏之交產(chǎn)卵，虹鱒和大麻哈魚(yú)等冷水性魚(yú)類(lèi)則在秋冬產(chǎn)卵。對(duì)秋冬季產(chǎn)卵魚(yú)類(lèi)，縮短光照期可促進(jìn)性腺發(fā)育和提前產(chǎn)卵。流水對(duì)某些魚(yú)類(lèi)的性腺發(fā)育成熟及產(chǎn)卵特別重要。魚(yú)類(lèi)的側(cè)線受流水刺激，通過(guò)中樞神經(jīng)使下丘腦促黃體素釋放激素(LRH)大量合成并釋放，再觸發(fā)腦垂體分泌促性腺激素(GTH)，誘導(dǎo)發(fā)情產(chǎn)卵。為此，我們對(duì)七彩鮭親魚(yú)培育池進(jìn)行了調(diào)整，利用建筑物遮擋陽(yáng)光，平均照射時(shí)間減少2h以上，利用跌級(jí)落差加大水流刺激，減小閘門(mén)寬度加大流速，實(shí)現(xiàn)了七彩鮭親魚(yú)的促熟，成熟時(shí)間較對(duì)照池親魚(yú)提前12d左右。
3.4 LRH-A3對(duì)七彩鮭的催熟效果很好，有效率達(dá)95％以上。
3.5在自然條件下，昌源漁場(chǎng)的虹鱒正常繁殖季節(jié)為10月-12月，10.15-11.20為繁育高峰；七彩鮭為11月--翌年1月，11月底-12月底為繁育高峰。從近幾年繁殖看，不采取任何人工干預(yù)，兩種魚(yú)成熟交匯期只有1個(gè)月，應(yīng)用本發(fā)明方法進(jìn)行人為控制，將兩種魚(yú)的成熟交匯時(shí)間延長(zhǎng)到2個(gè)月以上，最長(zhǎng)推遲至12月底。本發(fā)明方法滿(mǎn)足了市場(chǎng)雜交苗種的需求，也為冷水魚(yú)苗種的反季節(jié)生產(chǎn)提供了技術(shù)保障。
盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。