本發明涉及牧草無性繁殖技術領域，尤其涉及一種促進桂牧1號雜交象草快速健康扦插生根的方法。

背景技術：

桂牧1號雜交象草[(pennisetumamericanum×p.purpureum)×p.purpureumschum.cv.guimuno.1]是以禾本科狼尾草屬雜交狼尾草(p.americanum×p.purpureum)為母本，矮象草(p.purpureumcv.mott)為父本，有性雜交選育而成，2000年經全國飼料牧草育種委員會審定登記(品種登記號211)。桂牧1號雜交象草是多年生牧草種類，莖干直立高大叢生，分蘗多，葉量大，喜溫暖濕潤氣候，產量高，利用年限長，幾乎無病蟲害等特點，是我國長江流域及其以南地區主要栽培的高大禾草種類，其繁殖方式主要采用種莖切段扦插栽培法。栽培前選擇冬藏后莖稈保持顏色青綠作為種用。種莖切段后進行扦插，插條的生根率和生根效果直接影響插條的成活率和再生植株的生長速度。

原花青素(proanthocyanidins，pc)，是一種由兒茶素(catechin)或表兒茶素(epicatechin)結合形成的二至五個聚合體，也稱為低聚原花青素(oligomericproanthocyanidins，opc)，屬多酚類物質，是比維生素c和維生素e活性更強的自由基清除劑，具有超強的抗氧化能力。

截至目前為止，并未有任何將原花青素應用于植物生根的研究報道和專利申請，也未有文獻或報道提出原花青素可作為植物生根的技術啟示或相關指引。

技術實現要素：
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本發明的目的就在于提供一種促進桂牧1號雜交象草快速健康扦插生根的方法。

本發明的技術方案如下：

將安全貯藏的桂牧1號雜交象草種莖切段后，插條在一定濃度的原花青素浸泡4～6h，達到飽和含水量，然后用于扦插；插條的生根率、發芽率、不定根生根數和根長有顯著提高。

具體地說，本方法包括下列步驟：

1、一種促進桂牧1號雜交象草快速健康扦插生根的方法，其特征在于：

①插條的選取和切段：選擇冬季安全貯藏的桂牧1號雜交象草，每段插條保留1個莖節，莖節下部留下1/3，上部留2/3，節段切成斜面；

②插條處理：插條浸泡于200mg/l的原花青素處理液中，處理液要超過插條斜切面，4～6h達到飽和含水量后撈出濾干；

③-1，在大田自然環境條件下原花青素處理插條生根時，經過步驟①和②后，需當天扦插至種苗床，種苗床寬1.2m，深翻土，施45～75噸/ha腐熟牛糞；扦插深度以莖節插入土1cm左右為標準，扦插密度為2cm×2cm；扦插后，蓋上一層豬或牛糞水，覆蓋薄膜增溫，根據天氣情況，揭膜透風及澆水保濕；于扦插后30d隨機抽選標本，統計生根率、發芽率、生根數、根長，監測200mg/l原花青素處理后，種莖生根率和每根種莖的生根數及根長等效果；

③-2，在人工控制環境條件下原花青素處理插條生根時，經過步驟①和②后，需進行插條培養；處理好的插條，每10個插條一捆，放置于呈放有1/2霍格蘭氏培養液的塑料盒中，塑料盒為30cm×22cm×12cm，于人工氣候箱中進行恒溫培養，20℃，12h黑暗/12h光照；期間保持塑料盒內溶液量不低于插條斜面最高點；

霍格蘭氏培養液配方：硝酸鈣945mg/l；硝酸鉀607mg/l；磷酸銨115mg/l；硫酸鎂493mg/l；鐵鹽溶液2.5ml/l；微量元素5ml/l；ph6.0；

20d后將插條取出，統計生根率、發芽率、統計生根數、根長，監測200mg/l原花青素處理后，種莖生根率和每根種莖的生根數及根長等效果。

生根率：生根插條數/總處理插條數×100％；

發芽率：發芽插條數/總處理插條數×100％；

生根數：插條平均生根數，個/株；

根長：插條根的平均長度，mm。

工作機理：

原花青素具有極強的抗氧化活性，是極有效的自由基清除劑之一，低濃度的原花青素易溶于水，在植株體內可有效地清除超氧陰離子自由基和羥基自由基等，也可中斷自由基鏈式反應；并參與保護脂質不發生過氧化損傷。本發明使用一定濃度的原花青素可有效地促進桂牧1號快速萌發不定根，促進新生苗得生長，從而達到提高桂牧1號扦插成活率的目的。

本發明具有以下優點和積極效果：

①促進雜交象草桂牧1號插條扦插后快速生根，不定根多且可明顯促進新生毛細根；

②極大地提高了插條的生根率，促進插條健康生長，插條根系繁殖速度增快，根量大，提高移栽成活率；

③方法簡單，便宜，成本低，易操作，且適用于狼尾草系列無性繁殖牧草的插條，具有較高的經濟效益。

附圖說明：

圖1為桂牧1號雜交象草插條的圖片；

圖2為室內恒溫培養20d后桂牧1號雜交象草插條生根情況的圖片；

圖3為大田環境培養30d后桂牧1號雜交象草插條生根情況的圖片。

圖2、3中：

ck為未浸泡直接生根的對照組；

原花青素處理濃度從左至右，依次為：0mg/l、50mg/l、100mg/l、150mg/l、200mg/l。

具體實施方式：

下面結合附圖和實施例詳細說明：

原花青素：分子式c30h26o13，分子量594.52，uv98％，濃度為50～200mg/l。

一、實施例1

人工控制環境條件下原花青素處理促進桂牧1號雜交象草插條生根生長的試驗，主要步驟如下：

1)插條的選取和切段：于2017年2月25日(晴天)選用冬貯保持綠色的桂牧1號雜交象草種莖為試驗材料，每段插條保留1個莖節，莖節下部留下1/3，上部留2/3，節段切成斜面(圖1)；

2)插條處理：插條浸泡于5個濃度梯度(0，50，100，150，200mg/l)的原花青素處理液中，處理液要超過插條斜切面，4h后達到飽和含水量，撈出濾干；ck為未浸泡直接生根的對照；每處理100株插條；

3)插條培養：處理好的插條，每10個插條一捆，放置于呈放有1/2霍格蘭氏培養液的塑料盒(30cm×22cm×12cm)中，于人工氣候箱中進行恒溫培養(20℃，12h黑暗/12h光照)；期間保持塑料盒內溶液量不低于插條斜面最高點；

霍格蘭氏培養液配方：硝酸鈣945mg/l；硝酸鉀607mg/l；磷酸銨115mg/l；硫酸鎂493mg/l；鐵鹽溶液2.5ml/l；微量元素5ml/l；ph＝6.0；

4)20d后將插條取出，統計生根率和發芽率；每處理隨機抽選10份已生根樣本，用清水洗凈后，統計生根數(插條平均生根數，個/株)；根長等。結果表明，室內恒溫培養20d后，隨著原花青素濃度的升高，種莖的生根率、發芽率、生根數隨之升高，根長隨之增長，且當原花青素濃度高達200mg/l時，長出大量側根，種莖生根率和每根種莖的生根數及根長與對照組都有顯著差異(表1、圖2)。

表1-恒溫培養20d后桂牧1號雜交象草插條生根情況

注：同列不同字母表示處理間在0.05水平有顯著差異。

二、實施例2

大田自然環境條件下驗證原花青素處理桂牧1號雜交象草種莖生根的試驗，操作步驟如下：

1)插條的選取和切段：于2017年2月25日(晴天)于湖南省畜牧獸醫研究所草業基地進行，選用冬貯保持綠色的桂牧1號雜交象草種莖為試驗材料，每段插條保留1個莖節，莖節下部留下1/3，上部留2/3，節段切成斜面(圖1)；

2)插條處理：插條浸泡于5個濃度梯度(0，50，100，150，200mg/l)的原花青素處理液中，處理液要超過插條斜切面，4h后達到飽和含水量，撈出濾干；ck為未浸泡直接生根的對照；每處理100株插條。

3)當天扦插至種苗床，種苗床寬1.2m，深翻土，施45～75噸/ha腐熟牛糞。扦插深度以莖節插入土1cm左右為標準，扦插密度為2cm×2cm，每處理100株插條。

4)扦插后，蓋上一層豬牛糞水，覆蓋薄膜增溫，根據天氣情況，揭膜透風及澆水保濕。

5)分別于扦插后30d每處理隨機抽選20份標本，統計生根率和發芽率；每處理隨機抽選10份已生根樣本，用清水洗凈后，統計生根數(插條平均生根數，個/株)；根長等。結果表明，室內恒溫培養20d后，隨著原花青素濃度的升高，種莖的生根率、發芽率、生根數隨之增高，根長隨之增長，且當原花青素濃度高達200mg/l時，長出大量側根，種莖生根率和每根種莖的生根數及根長與對照組都有顯著差異(表2，圖3)。

表2大田環境培養30d后桂牧1號雜交象草插條生根情況

注：同列不同字母表示處理間在0.05水平有顯著差異。