專利名稱：一種薄底的96孔細胞培養板的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及生物學中培養細胞使用的細胞培養板，細胞培養板，尤其是一種 薄底的96孔細胞培養板。
背景技術：
目前，在生物學中培養細胞使用的細胞培養板，在細胞培養的過程中，經常會發生 邊緣效應，邊緣效應是指在使用多孔板的細胞培養中，周邊孔中的細胞會集中在孔的外側， 這種現象在實驗中常用的96孔板中十分明顯；而邊緣孔的數量占到總數的1/3，這就意味 著因為此誤差所導致的影響相當巨大。 由于大多細胞的生長會受周圍接觸細胞的抑制，所以邊緣效應導致邊緣孔內細胞 平均生長速度要比其他孔快，從而在實驗過程中引入系統誤差；在很多大規模藥物篩選實 驗中，人們甚至棄去周圍孔的實驗結果，這就意味著每三塊96孔培養板只能被當作兩塊板 使用。 邊緣效應產生的原因是由于在室溫下的培養板轉移到37t:培養箱后，培養板上
產生的溫度差影響細胞沉降引起的；為證實這一結論，有人做了兩種不同的實驗，第一個
實驗是將細胞接種后直接放入37t:培養箱，i小時后取出在顯微鏡下觀察，發現外側孔的 大部分細胞都遷移到孔的外側聚集生長，而不是象內部孔一樣平均生長；另一個實驗證
據是細胞培養板在37t:條件下放置一段時間以后取出，加入細胞而不放入37t:環境，發
現細胞呈相反的沉降趨勢；這兩點足以證明產生細胞邊緣效應的決定性因素就是細胞沉 降過程中內、外孔之間熱動力學失衡(BETINA KERSTIN LUNDH0LT， KURT M. SCUDDER， and LEN PAGLIAR0， A SimpleTechnique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays. Journal of BiomolecularScreening 2003 :566-570)。 目前克服該現象的方法是在培養板內分入細胞后，在室溫下放置l-2個小時，讓 細胞在沒有溫度差的情況下沉降，然后再轉移到37t:培養箱內，該方法至少適合CH0等在 室溫下能貼壁的細胞；該方法的缺陷是對于脆弱的細胞外界環境溫度降低會導致細胞應激 反應產生，從而改變細胞的性狀，尤其是原代培養的細胞更加不能承受如此苛刻的生存條 件，因此會發生細胞生長狀態不佳、細胞凋亡甚至死亡。 導致目前常規的96孔細胞培養板產生邊緣效應的原因是目前應用的96孔細胞 培養板外圈的孔側壁直接與外界接觸，而且較薄，僅為lmm，對溫度非常敏感，整個板子孔底 部的厚度均較厚，為1. 2mm，從而在溫度波動很大時不能調控細胞的遷移；而內側的孔由于 僅從底部接觸外界，細胞生長就很均勻；因此如果能夠在外側孔的側面設計結構使其僅從 底部感受外界溫度變化，將會避免邊緣效應的產生。

發明內容本實用新型的發明目的是提供了一種薄底的細胞培養板，該細胞培養板是通過 改變原有96孔板的結構，增加了外側孔外側壁的厚度，減薄了孔底面的厚度，達到最大程度消除邊緣效應的目的，同時又保證了細胞培養的最佳狀態；為了實現上述目的，本實用新 型是這樣實現的一種薄底的96孔細胞培養板，上蓋、培養板和培養板孔組成；其特征在 于孔呈8X12矩陣分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開 便于培養液加入，周邊有側壁圍繞孔的周圍；培養板孔的高度稍高于側壁形成的平面；孔 的分布為矩陣形，每個孔的中心距相等，距離為0. 5-2cm ;培養板上最外一圈培養板孔與培 養板側圍之間存在間隔，距離為12孔長邊側l-4mm，8孔短邊側2-6mm ;外周孔的外側壁加 厚，厚度為1. 0-2. 5mm ;孔的底部厚度為0. 5_1. 0mm。由于該細胞培養板是通過改變原有96 孔板的結構，增加了外側孔外側壁的厚度，減薄了孔底面的厚度，因此可以達到最大程度消 除邊緣效應的目的，同時又保證了細胞培養實驗的最佳狀態。

圖1為一種薄底的細胞培養板簡單示意圖。 圖2為一種薄底的細胞培養板剖面圖。
具體實施方式
結合附圖對本實用新型進一步說明 —種薄底的96孔細胞培養板，是由上蓋、培養板和培養板孔組成；其特征在于 孔呈8X12矩陣分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開便 于培養液加入，周邊有側壁圍繞孔的周圍；培養板孔的高度稍高于側壁形成的平面；孔的 分布為矩陣形，每個孔的中心距相等，距離為0. 5-2cm ;培養板上最外一圈培養板孔與培養 板側圍之間存在間隔，距離為12孔長邊側l-4mm，8孔短邊側2-6mm ;外周孔的外側壁加 厚，厚度為1. 0-2. 5mm ;孔的底部厚度為0. 5_1. Omm。
權利要求一種96孔細胞培養板，是由上蓋、培養板和培養板孔組成；其特征在于孔呈8×12矩陣分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開便于培養液加入，周邊有側壁圍繞孔的周圍；培養板孔的高度稍高于側壁形成的平面。
2. 根據權利要求1所述的薄底的96孔細胞培養板，其特征是孔的分布為矩陣形，每 個孔的中心距相等，距離為0. 5-2cm ;培養板上最外一圈培養板孔與培養板側圍之間存在 間隔，距離為12孔長邊側l-4mm，8孔短邊側2-6mm ;
3. 根據權利要求1所述的薄底的96孔細胞培養板，其特征是外周孔的外側壁加厚， 厚度為1. 0-2. 5mm。
4. 根據權利要求1所述的薄底的96孔細胞培養板，其特征是孔的底部厚度為 0. 5-1. 0mm。
專利摘要本實用新型涉及生物學中培養細胞使用的細胞培養板，尤其是一種96孔細胞培養板，是由上蓋、培養板和培養板孔組成；其特征在于培養板上有96個培養板孔，培養板孔為8×12分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開便于培養液加入，周邊有側壁圍繞孔的周圍；培養板孔的高度稍高于側壁形成的平面；上蓋平坦，與培養板上面孔形成的平面平行，有裙邊，與培養板之間存在縫隙；孔的分布為矩陣形，每個孔的中心距相等；其中96孔細胞培養板的外周孔的外側加厚了側壁，減薄了底面厚度，這種結構可以在細胞培養時減少內、外孔之間的熱動力不平衡問題，使細胞沉降均一，從而消除邊緣效應，使細胞生長更加均一，減少實驗系統誤差。
文檔編號C12M3/00GK201459145SQ20092011040
公開日2010年5月12日 申請日期2009年7月24日 優先權日2009年7月24日
發明者張 杰 申請人:無錫耐思生物科技有限公司