一種原位聚合酶鏈反應板的制作方法
【專利摘要】一種原位聚合酶鏈反應板，包括上板和下板，上板上設有密封條，上板和下板之間通過密封條相連形成具有開口的用于容納聚合酶鏈反應試劑的空腔，且該原位聚合酶鏈反應板還設有用以密封空腔的密封蓋。在進行原位聚合酶鏈反應實驗時，將原位聚合酶鏈反應試劑填充進該空腔中并使用密封蓋進行密封，保證了原位聚合酶鏈反應過程中密封的有效性。原位聚合酶鏈反應試劑不蒸發，反應完全，且實驗產物不會污染環境，提升了實驗的成功率，從而使得特定基因及病原體的診斷得到保證、原位聚合酶鏈反應技術得以可靠應用和推廣。
【專利說明】一種原位聚合酶鏈反應板
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及聚合酶鏈反應用裝置，特別是涉及一種原位聚合酶鏈反應板。
【背景技術】
[0002]原位聚合酶鏈反應技術成功的將聚合酶鏈反應技術和原位雜交技術結合起來，保持了兩項技術的優勢又彌補了各自的不足。原位聚合酶鏈反應技術的待檢標本一般為載玻片上的組織切片或細胞，組織切片或細胞什么東西先經過化學固定，以保持組織細胞的良好狀態。細胞膜和核膜均具有一定的通透性。當進行聚合酶鏈反應擴增時，各種成份(如引物、DNA聚合酶、核苷酸等)均可以進入細胞內和細胞核內，以固定在細胞內或細胞核內的RNA或DNA為模板，在原位進行擴增。擴增的產物一般分子較大，不易穿過細胞膜，從而被保留在原位。這樣原有的細胞內單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列在原位被大量擴增，擴增的產物就很容易被原位雜交技術檢測出來。因此，原位聚合酶鏈反應技術可以反映出被測DNA或RNA的種類、亞種、數量，同時也反映其所在細胞的種類，從而進行準確的分析或診斷。
[0003]原位基因擴增技術是一種有效的檢測手段，早已得到廣泛的應用，但是對其操作技術要求高。但實踐中由于在載玻片上進行聚合酶鏈反應擴增，密封用的是傳統的蓋玻片，不僅操作很不方便，而且會產生漏氣、蒸干、干擾應用、反應條件不好尋找等問題，從而造成實驗成功率低，結果非常不穩定，嚴重制約了原位檢測技術的可靠性。
實用新型內容
[0004]基于此，有必要針對上述問題，提供一種在進行聚合酶鏈反應實驗時具有低蒸發率、高成功率的原位聚合酶鏈反應板。
[0005]一種原位聚合酶鏈反應板，包括上板和下板，所述上板一個表面上設有密封條，所述上板與所述下板通過所述密封條相連形成具有開口的用于容納聚合酶鏈反應試劑的空腔，所述原位聚合酶鏈反應板還包括用以密封所述空腔的密封蓋。
[0006]在其中一個實施例中，所述下板的與所述上板相對的表面上設有采用膠粘技術和蛋白質交聯技術形成的具有網狀分布的分隔膜層。
[0007]在其中一個實施例中，所述上板采用透明材料制成。
[0008]在其中一個實施例中，所述密封蓋由密度小于水的液體材料形成。
[0009]在其中一個實施例中，所述液體材料是油或者液體石蠟。
[0010]在其中一個實施例中，所述密封條是由彈性密封材料制成的。
[0011 ] 在其中一個實施例中，所述原位聚合酶鏈反應板放置使用時與水平線形成夾角，所述夾角在O度到180度之間。
[0012]在其中一個實施例中，所述下板由玻璃或聚碳酸酯或聚甲基丙烯酸甲酯制成。
[0013]在其中一個實施例中，所述原位聚合酶鏈反應板上還具有導流機構,所述導流機構是由所述下板在所述空腔的開口方向上進行延伸構成的。[0014]在其中一個實施例中，所述密封條連接上板和下板時呈U型、V型或C型。
[0015]上述原位聚合酶鏈反應板包括上板和下板，上板上設有密封條，上板和下板之間通過密封條相連形成具有開口的用于容納聚合酶鏈反應試劑的空腔，且該原位聚合酶鏈反應板還設有用以密封空腔的密封蓋。在進行原位聚合酶鏈反應實驗時，將原位聚合酶鏈反應試劑填充進該空腔中并使用密封蓋進行密封，保證了原位聚合酶鏈反應過程中密封的有效性。原位聚合酶鏈反應試劑不蒸發，反應完全，且實驗產物不會污染環境，提升了實驗的成功率，從而使得特定基因及病原體的診斷得到保證、原位聚合酶鏈反應技術得以可靠應用和推廣。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]圖1為原位聚合酶鏈反應板俯視圖；
[0017]圖2為原位聚合酶鏈反應板Y處的剖視圖；
[0018]圖3為原位聚合酶鏈反應板的內部結構圖；
[0019]圖4為下板示意圖；
[0020]圖5為上板示意圖。
【具體實施方式】
[0021]下面結合附圖對本實用新型的較佳實施例進行詳細闡述，以使本實用新型的優點和特征能更易于被本領域技術人員理解，從而對本實用新型的保護范圍做出更為清楚明確的界定。
[0022]請參照圖1、圖2、圖3和圖5，本實用新型的一個實施方式提供一種原位聚合酶鏈反應板100。該原位聚合酶鏈反應板100包括上板110、下板120，該上板110上設有密封條130。在進行原位聚合酶鏈反應實驗時需先對下板120進行預處理，再將上板110與經過預處理后的下板120通過密封條130相連，并形成具有開口的用于容納原位聚合酶鏈反應試劑150的空腔140。該密封條130設置于上板110的一個表面上且呈U型，在其他實施方式中，還可以是V型、C型等形狀，只要可以滿足容納原位聚合酶鏈反應試劑150的要求即可，此處不做具體限定。該密封條130可以是半封閉密封圈，也可以是密封膠，密封條130采用彈性密封材料制成，在本實施方式中，采用硅橡膠制成密封條130，在其他實施方式中，還可以采用乳膠等其他彈性密封材料來制成密封條130，此處不做具體限定。
[0023]上板110 —般采用玻璃或聚碳酸酯(PC)或聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)材料制成，在其他實施方式中還可以采用其它材料，只要該材料具有良好的透光性即可，此處不做具體限定。下板120 —般采用透明材料制成，例如玻璃，但在其他實施方式中也不局限于透明材料，只要能夠完成其對應的功能即可，此處不做具體限定。
[0024]請參照圖3，該原位聚合酶鏈反應板100上還設有導流機構。上板110和下板120相連形成的空腔140的開口方向上下板120長于上板110，形成導流機構，達到在加注原位聚合酶鏈反應試劑150時方便引流和準確向空腔140中加注原位聚合酶鏈反應試劑150的效果。在其他實施方式中，該導流機構還可以設置為其他的形式，例如在加注原位聚合酶鏈反應試劑150時使用漏斗構成導流機構，只要能夠達到引流和準確向空腔140中加注原位聚合酶鏈反應試劑150的效果即可，此處不做具體限定。[0025]請參照圖4，在實驗前需要進行預處理工作。在下板120上與上板110相對的表面上進行預處理工作，將被測細胞及樣品置于該下板120表面上進行蛋白質膠粘、交聯和網孔化處理，最終形成具有一定網孔直徑的網狀分布的分隔膜層121。在進行人工加注原位聚合酶鏈反應試劑150時，使得原位聚合酶鏈反應試劑150完全浸沒該分隔膜層121，使得被測細胞核酸物質與原位聚合酶鏈反應試劑150充分接觸，以利于原位聚合酶鏈反應的進行。
[0026]該原位聚合酶鏈反應板100上還設有用于密封空腔140的密封蓋141。該密封蓋141可以是由蓋板形成的，也可以是一層柔性密封蓋。該柔性密封蓋即在向空腔140內加注完原位聚合酶鏈反應試劑150后再接著向空腔140中加注輕質油形成的一層油膜。由于油的比重輕，因此輕質油實質上是漂浮在原位聚合酶鏈反應試劑150的上方，從而將原位聚合酶鏈反應試劑150完全封閉，保證了原位聚合酶鏈反應過程中密封的有效性。且由于密封蓋141的密封作用，在實驗時原位聚合酶鏈反應試劑150不會蒸發，反應完全，實驗增產物不會污染到環境，提升了實驗的成功率。在其他實施方式中，還可以使用其他液體材料來構成密封蓋141，例如液體石蠟等，但需要該液體材料的密度小于水的密度，此處不做具體限定。當密封條130的兩端延伸至上板110的邊緣處時，由于下板110在該開口方向上比上板120長，所以可以直接在上板120的邊緣處設置一層玻璃蓋板形成密封蓋141 ;當密封條130的兩端沒有延伸至上板110的邊緣處時，可以在密封條130的兩端上設置一層玻璃蓋板形成密封蓋141。在其他實施方式中,還可以使用其他蓋板形成密封蓋141。即當使用蓋板形成密封蓋141時，該密封蓋141設置的位置需根據密封條130的兩端的位置來確定。
[0027]請參照圖3，在使用該原位聚合酶鏈反應板100進行實驗時，將其放置在工作臺上，原位聚合酶鏈反應板100與水平線X形成角度α，以使實驗過程中可能產生的氣泡僅出現在上側。該角度α的形成可以是使用具有角度α的支撐體，也可以是原位聚合酶鏈反應板100自身形成的，可以利用具有角度α的原位基因擴增儀專用模塊形成。該角度α可以是45°或90°，也可以是非水平的其他任意角度。
[0028]上述原位聚合酶鏈反應板100具有一個容納原位聚合酶鏈反應試劑150的空腔140，在該空腔140內加注原位聚合酶鏈反應試劑150直至浸沒分隔膜層121，然后接著加注輕質油形成密封蓋141漂浮在原位聚合酶鏈反應試劑150上方，從而將原位聚合酶鏈反應試劑完全封閉。這樣的原位聚合酶鏈反應板100使用時操作簡單，且其良好的密封性保證了原位聚合酶鏈反應試劑150反應充分，從而使得實驗具有良好的擴增性，實驗擴增產物不會蒸發、不會污染環境，從而提升了實驗的成功率，使得特定基因及病原體的診斷得到保證，使得原位聚合酶鏈反應技術得以可靠應用和推廣。
[0029]以上所述實施例僅表達了本實用新型的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本實用新型專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本實用新型構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本實用新型的保護范圍。因此，本實用新型專利的保護范圍應以所附權利要求為準。
【權利要求】
1.一種原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，包括上板和下板，所述上板一個表面上設有密封條，所述上板與所述下板通過所述密封條相連形成具有開口的用于容納聚合酶鏈反應試劑的空腔，所述原位聚合酶鏈反應板還包括用以密封所述空腔的密封蓋。
2.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述下板的與所述上板相對的表面上設有采用膠粘技術和蛋白質交聯技術形成的具有網狀分布的分隔膜層。
3.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述上板采用透明材料制成。
4.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述密封蓋由密度小于水的液體材料形成。
5.根據權利要求4所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述液體材料是油或者液體石蠟。
6.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述密封條是由彈性密封材料制成的。
7.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述原位聚合酶鏈反應板放置使用時與水平線形成夾角，所述夾角在O度到180度之間。
8.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述下板由玻璃或聚碳酸酯或聚甲基丙烯酸甲酯制成。
9.根據權利要求1所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述原位聚合酶鏈反應板上還具有導流機構，所述導流機構是由所述下板在所述空腔的開口方向上進行延伸構成的。
10.根據權利要求1?9中任一項所述的原位聚合酶鏈反應板，其特征在于，所述密封條連接上板和下板時呈U型、V型或C型。
【文檔編號】C12M1/00GK203613182SQ201320816101
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2013年12月11日 優先權日:2013年12月11日
【發明者】劉志華, 聶尚海, 申躍華 申請人:蘇州東勝興業科學儀器有限公司