一種副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑及其應用方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑及其應用方法。它按總質(zhì)量分數(shù)100％計，包括北蟲草提取物15～30％、L-蘋果酸1～4％、甘油1～5％、半乳糖2～5％、脫脂奶粉15～30％，余量為水；所述的北蟲草提取物是將北蟲草水解后，過濾去渣，濾液濃縮至7-8Brix，得到北蟲草提取物。本發(fā)明的北蟲草提取物含有大量蟲草多糖等雙歧因子，其對副干酪乳桿菌具有獨特的保護作用，同時賦予活菌制劑新的保健功能，拓寬了副干酪乳桿菌活菌制劑的保健范圍，利用該保護劑制備副干酪乳桿菌制劑，在常溫條件下進行真空干燥，制備成本低、工藝方法簡單、易操作，保護劑能有效保護副干酪乳桿菌活菌，使活菌制劑達到產(chǎn)品要求，從而為活菌制劑產(chǎn)品進一步推廣提供理論基礎。
【專利說明】一種副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑及其應用 方法

【技術領域】：
[0001] 本發(fā)明屬于微生物領域，具體涉及一種副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護 劑及其應用方法。

【背景技術】：
[0002] 由于益生菌對機體腸道菌系具有很好的調(diào)節(jié)作用，而腸道菌系平衡則是關系到人 體營養(yǎng)和健康的至關重要的因素，這使益生菌的研宄逐漸成為功能食品研宄中的焦點。副 干酪乳桿菌（Lactobacillus paracasei)廣泛存在于乳酪、泡菜等發(fā)酵食品以及人體的口 腔及腸道中。副干酪乳酸菌是益生菌的一種，是人體腸道內(nèi)重要的生理性益生菌，能促進機 體微生物菌群和酶的平衡以及刺激特異性和非特異性的免疫機制，在一定程度上可以起到 預防某些疾病、促進發(fā)育、增強體質(zhì)、延緩衰老和延長壽命的作用。一般副干酪乳桿菌制劑 多采用低溫冷凍干燥的方法制備，生產(chǎn)過程復雜，條件要求高、成本較高，極大地限制了高 活性乳酸菌制劑的生產(chǎn)和推廣應用。
[0003] 另一方面，在微生物冷凍干燥過程中為了降低微生物的損失和死亡率添加保護 劑，常用的保護劑主要有牛奶或奶粉、蔗糖、明膠等，在凍干過程中，培養(yǎng)條件、收獲期、冷凍 速率、保護劑、殘留水分及復水條件等都或多或少影響冷凍干燥菌體的存活率，其中保護劑 是最復雜、也最難選擇的一個關鍵因素。因此，積極尋求新型凍干保護劑，最大限度降低細 胞的損失，是制備高潔性副干酪乳桿菌凍干制劑及進一步延長活菌保藏期的技術關鍵。
[0004] 北蟲草也稱蛹蟲草，是北冬蟲夏草的簡稱，又名北冬蟲夏草、蠶蛹蟲草等。研宄發(fā) 現(xiàn)北蟲草的藥理作用及功效基本上與冬蟲夏草相同，可以作為冬蟲夏草的代用品。有滋肺 益氣、止血化痰、抑制腫瘤、駐容美顏、延緩衰老、補腎壯陽等作用及提高機體免疫力之功 效。冬蟲夏草是一個復雜而特殊的生命復合體，含有多種特殊的活性成分。目前已知冬蟲 夏草含有糖類、氨基酸類、核苷酸類、酸脂類、無機元素類、維生素等成分。蟲草多糖是蟲草 中主要的、也是含量最高的活性成分之一，具有免疫活性、抗腫瘤作用、抗輻射作用（江曉 路和葛蓓蕾1998 ;季暉等1993 ;Dai et al. 2009)。蟲草多糖多是雙岐因子，對乳酸菌具有 保護作用。前期的研宄發(fā)現(xiàn)蛹蟲草中含有葡萄糖和海藻糖，其中海藻糖含量較高，達到8% 左右（劉艷芳等2011)。目前已上市的北冬蟲夏草保健品有：蟲草口服液、蟲草補腎酒、蟲 草健康啤酒以及沈陽農(nóng)業(yè)大學研制的蟲草膠囊等。
[0005] 北蟲草抽提物在微生態(tài)制劑方面的研宄仍然僅是用作凍干菌粉的稀釋劑 或作為雙歧因子，或者用北蟲草熱反應物來增加微生態(tài)制劑增味調(diào)味劑。如專利ZL 200910040776. 5是將北蟲草提取物作為營養(yǎng)物質(zhì)添加發(fā)酵乳酸菌以期提高發(fā)酵液活菌數(shù)， 在發(fā)酵后被去除；專利ZL 200910040606. 7是將北蟲草熱反應物與乳酸菌凍干菌粉混合制 備微生態(tài)制劑，只增加產(chǎn)品的風味和口感。
[0006]目前，還沒有將北蟲草抽提物直接作為益生菌干燥保護劑常溫真空干燥制備活菌 制劑的研宄和報道。同時，低溫冷凍干燥方法制備乳酸菌制劑成本高，且以往常用的保護劑 多數(shù)只能用于低溫冷凍干燥，也存在保護劑配方簡單、保護效果穩(wěn)定性差、不能改善或者影 響產(chǎn)品風味等問題。


【發(fā)明內(nèi)容】
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[0007] 本發(fā)明的目的是提供一種不僅在干燥過程中對副干酪乳桿菌具有保護活菌的作 用，還具有增強微生物制劑保健功能的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑。
[0008] 本發(fā)明的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑，其特征在于，按總質(zhì)量分 數(shù)100%計，包括北蟲草提取物15?30%、L-蘋果酸1?4%、甘油1?5%、半乳糖2? 5%、脫脂奶粉15?30%，余量為水；
[0009] 所述的北蟲草提取物是將北蟲草水解后，過濾去渣，濾液濃縮至7-8Brix，得到北 蟲草提取物。
[0010] 優(yōu)選，所述的將北蟲草水解優(yōu)選是將北蟲草加入其重量50倍的水中，煮沸后打 漿，98?100°C水解3小時。
[0011] 優(yōu)選，所述的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑，按總質(zhì)量分數(shù)100% 計，包括北蟲草提取物20 %、L-蘋果酸1. 5 %、甘油2 %、半乳糖3 %、脫脂奶粉20 %，余量為 水。
[0012] 本發(fā)明的第二個目的是副干酪乳桿菌制劑的常溫真空干燥方法，其特征在于，包 括以下步驟：
[0013] 將副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑、副干酪乳桿菌濕菌泥和微晶纖維 素按照重量比0. 5?1 :1 :0. 8?1. 2混合均勻，然后真空干燥。
[0014] 優(yōu)選，將副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑、副干酪乳桿菌濕菌泥和微 晶纖維素按照重量比0.6 : I : 1混合均勻，然后真空干燥。
[0015] 優(yōu)選，所述的真空干燥優(yōu)選為：將混勻后的物質(zhì)裝入真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn) 30-50rpm，抽真空，同時水浴加熱至33-39°C，保持90-180min，然后取出用粉碎機慢速粉 碎，裝回真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)40-80rpm，抽真空，溫度28-31°C，保持直至制劑干燥。
[0016] 進一步優(yōu)選，將混勾后的物質(zhì)裝入真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)30rpm，抽真空，同時水 浴加熱至35-37°C，保持120min，然后取出用粉碎機慢速粉碎，裝回真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋 轉(zhuǎn)50rpm，抽真空，溫度29-30°C，保持直至制劑干燥。
[0017] 本發(fā)明相比于現(xiàn)有技術，具有以下有益效果：
[0018] 1.本發(fā)明將北蟲草提取物應用于副干酪乳桿菌乳酸菌的干燥保護，將北蟲草與乳 酸菌的保健功能進行優(yōu)勢互補，增強和拓寬了活性益生菌產(chǎn)品的保健作用，形成了很好的 干燥保護劑的組合，有利于菌種在保藏過程中的穩(wěn)定；
[0019] 2.保護劑中加入L-蘋果酸調(diào)節(jié)產(chǎn)品的酸度環(huán)境利用保護副干酪乳桿活性；
[0020] 3.以微晶纖維素為干燥助劑，微晶纖維素是一種純化的、部分解聚的纖維素，有多 孔微粒組成的結(jié)晶粉末，可用于熱穩(wěn)定劑和快速干燥的載體。還可作為膳食纖維應用于低 熱量和低脂肪等特殊營養(yǎng)食品中，加入微晶纖維素為干燥助劑，以利于產(chǎn)品的干燥；
[0021] 4.用常溫真空干燥的方法制備活性副干酪乳桿菌制劑，方法簡單易于操作。
[0022] 因此，本發(fā)明的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑中的北蟲草提取物含 有大量蟲草多糖等雙歧因子，其對副干酪乳桿菌具有獨特的保護作用，同時賦予活菌制劑 新的保健功能，拓寬了副干酪乳桿菌活菌制劑的保健范圍，利用該保護劑制備副干酪乳桿 菌制劑，在常溫條件下進行真空干燥，制備成本低、工藝方法簡單、易操作，保護劑能有效保 護副干酪乳桿菌活菌，使活菌制劑達到產(chǎn)品要求，從而為活菌制劑產(chǎn)品進一步推廣提供理 論基礎。

【具體實施方式】：
[0023] 以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。
[0024] 實施例1 :
[0025] (1)稱取干北蟲草50克，加入到2500mL蒸餾水中，煮沸后倒入打漿機，打漿， 98-100°C下水解3小時；過濾去渣、濾液真空濃縮至7-8Brix，即北蟲草提取物；
[0026] (2)副干酪乳桿菌濕菌泥制備：用菌種Lactobacillus paracasei R8經(jīng)三級深層 發(fā)酵、離心、去上清收集濕菌泥。
[0027] (3)副干酪乳桿菌常溫真空干燥助劑的制備
[0028] 稱取食品級微晶纖維素100g，在115°C干熱滅菌1小時，冷卻備用。
[0029] (4)副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑的制備：將15g脫脂乳粉、2g半乳 糖、I. 5gL-蘋果酸混合均勾，微波滅菌冷卻配制成組合物A，I. 5g甘油、15mL北蟲草提取物 和30mL蒸餾水混合在110°C條件下濕熱滅菌20min，冷卻配制成溶液B。將A和B無菌條件 下混合均勻后配制成副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑65g。
[0030] (5) -種副干酪乳桿菌常溫真空干燥方法
[0031] 取上述副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑65g和副干酪乳桿菌濕菌泥 IOOg混合均勻，再加入已滅菌微晶纖維素 IOOg充分混合均勻后，裝入真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中， 旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速35rpm，抽真空，同時水浴加熱至37°C，保持2小時，然后取出用粉碎機慢速粉碎， 裝回真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)55rpm，抽真空，溫度30°C，保持直至副干酪乳桿菌制劑干燥， 獲得副干酪乳桿菌制劑A。
[0032] (6)同時將副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑配方中的北蟲草提取物用 相同量的蒸餾水代替，其他配方和方法完全相同，制備副干酪乳桿菌菌粉B，與將本發(fā)明方 法制備的副干酪乳桿菌制劑A，同時放4°C箱保存，每個月檢測一次活菌數(shù)，共保存六個月， 做對比保存試驗。結(jié)果見表1 :
[0033] 表1保存試驗結(jié)果
[0034]

【權(quán)利要求】
1. 一種副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑，其特征在于，按總質(zhì)量分數(shù) 100%計，包括北蟲草提取物15?30%、L-蘋果酸1?4%、甘油1?5%、半乳糖2?5%、 脫脂奶粉15?30%，余量為水； 所述的北蟲草提取物是將北蟲草水解后，過濾去渣，濾液濃縮至7-8Brix，得到北蟲草 提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑，其特征在于， 所述的將北蟲草水解是將北蟲草加入其重量50倍的水中，煮沸后打漿，98?100°C水解3 小時。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑，其特征在于， 所述的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑，按總質(zhì)量分數(shù)100%計，包括北蟲草提 取物20 %、L-蘋果酸1. 5 %、甘油2 %、半乳糖3 %、脫脂奶粉20 %，余量為水。
4. 一種副干酪乳桿菌制劑的常溫真空干燥方法，其特征在于，包括以下步驟： 將權(quán)利要求1所述的副干酪乳桿菌活菌制劑常溫真空干燥保護劑、副干酪乳桿菌濕菌 泥和微晶纖維素按照重量比0. 5?1 :1 :0. 8?1. 2混合均勻，然后真空干燥。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的常溫真空干燥方法，其特征在于，將副干酪乳桿菌活菌制劑 常溫真空干燥保護劑、副干酪乳桿菌濕菌泥和微晶纖維素按照重量比0.6 : 1 : 1混合均 勻，然后真空干燥。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的常溫真空干燥方法，其特征在于，所述的真空干燥為：將混勻 后的物質(zhì)裝入真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)30-50rpm，抽真空，同時水浴加熱至33-39°C，保持 90-180min，然后取出用粉碎機慢速粉碎，裝回真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)40-80rpm，抽真空， 溫度28-31 °C，保持直至制劑干燥。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的常溫真空干燥方法，其特征在于，將混勻后的物質(zhì)裝入真空 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)30rpm，抽真空，同時水浴加熱至35-37°C，保持120min，然后取出用粉 碎機慢速粉碎，裝回真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，旋轉(zhuǎn)50rpm，抽真空，溫度29-30°C，保持直至制劑 干燥。
【文檔編號】C12N1/04GK104498360SQ201410771343
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月15日
【發(fā)明者】柏建玲, 莫樹平, 吳清平, 王惠惠, 吳軍林, 丘明泉, 張菊梅 申請人:廣東省微生物研究所, 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司