本發(fā)明屬于飼料技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種新的防治刺參腐皮綜合征及其它細(xì)菌性疾病的特異性卵黃飼料添加劑及制備方法。

背景技術(shù)：

刺參(Apostichopus japonicas)又稱仿刺參，屬于棘皮動(dòng)物門(mén)(Echinodermate)、海參綱(Holothrioider)，刺參科(Stichopodidae)，仿刺參屬(Apostichopus)。在我國(guó)主要產(chǎn)于遼寧省、山東省等北方沿海。因其較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，目前已成為北方地區(qū)最重要的名貴養(yǎng)殖品種之一，隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，刺參病害問(wèn)題日趨嚴(yán)重，目前常見(jiàn)的疾病主要包括腐皮綜合征、口圍腫脹癥、爛邊癥、爛胃病和化板癥等。其中腐皮綜合征已成為刺參養(yǎng)殖業(yè)最常見(jiàn)也是危害最嚴(yán)重的疾病，嚴(yán)重制約著刺參養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。

目前刺參養(yǎng)殖業(yè)濫用抗生素和化學(xué)藥物情況普遍，抗生素和化學(xué)藥物反復(fù)使用容易產(chǎn)生耐藥性，存在藥物殘留，在倡導(dǎo)綠色農(nóng)業(yè)的今天必將退出歷史舞臺(tái)。卵黃抗體具有無(wú)毒、無(wú)殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展前景備受矚目。此外卵黃抗體產(chǎn)出率高，并具有耐熱、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛地制成產(chǎn)品來(lái)進(jìn)行動(dòng)物疾病的預(yù)防和治療。

當(dāng)前卵黃抗體產(chǎn)品大都為卵黃粉和全蛋粉，但是傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝中中需經(jīng)過(guò)冷凍干燥或噴霧干燥，成本較高?；谝陨峡紤]我們嘗試選擇以冰凍脹剝技術(shù)處理后的稻殼粉作為高效載體包裹卵黃制備飼料添加劑，省去卵黃經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥脫水這一過(guò)程，僅需置于室溫陰涼處干燥3-5天即可得到成品，使生產(chǎn)工藝大為簡(jiǎn)化，成本大為降低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

稻殼粉具有獨(dú)特的物理構(gòu)造，其橫截面為板層結(jié)構(gòu)，具有較大的比表面積。本發(fā)明利用稻殼粉這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，采用冰凍脹剝技術(shù)，在稻殼粉中加入蒸餾水直接冰凍，板層間隙吸水后冰凍形成冰晶，體積增大使其結(jié)構(gòu)出現(xiàn)裂縫，多次凍融后，致使裂縫不斷向?qū)挾群蜕疃确较蜓诱共⑿纬筛罅芽p，最終使板層結(jié)構(gòu)解體，比表面積進(jìn)一步增大，吸附性進(jìn)一步增強(qiáng)。又由于稻殼粉主要成分為纖維素，對(duì)刺參無(wú)毒副作用，輔以刺參病原菌相應(yīng)卵黃抗體，使卵黃抗體在刺參健康養(yǎng)殖和快速增產(chǎn)方面發(fā)揮獨(dú)特作用。

本發(fā)明又從卵黃抗體制備工藝簡(jiǎn)化的目的出發(fā)，改變了制備卵黃抗體產(chǎn)品的傳統(tǒng)方法，不再使用冷凍干燥或噴霧干燥技術(shù)，而是直接將高吸附性稻殼粉包裹蛋黃液進(jìn)行加工，自然晾干后粉碎，制成刺參飼料添加劑。這樣不但減少了凍干過(guò)程中對(duì)卵黃抗體的損失，而且還簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝，同時(shí)雞蛋里其它的營(yíng)養(yǎng)成分也得到了很有效的利用，很大程度上的降低了產(chǎn)品的成本。

本發(fā)明的技術(shù)方案由載體和特異性卵黃液組成。載體為經(jīng)冰凍脹剝技術(shù)處理后獲得的高吸附性稻殼粉，特異性卵黃液由刺參細(xì)菌性疾病相應(yīng)病原菌免疫蛋雞獲得。高吸附性稻殼粉與特異性卵黃液的質(zhì)量比為3/7-3/2。

該刺參用特異性卵黃添加劑中不同組分質(zhì)量百分比如下：含特異性卵黃抗體的卵黃液40％-70％，高吸附性稻殼粉30％-60％，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100％，所采用的特異性卵黃液不含有卵清液。優(yōu)選方式下，組分中還包括山梨酸鉀，山梨酸鉀加入量為上述兩種組分質(zhì)量和的0.05％-0.1％。

刺參專用特異性卵黃液添加劑的低成本制備方法為：

(1)將30-60目干燥稻殼粉放入超微粉碎機(jī)中粉碎10-15min，粉碎后過(guò)200目篩網(wǎng)；

(2)在步驟(1)粉碎后得到的稻殼粉中添加2-3倍質(zhì)量蒸餾水，并于-20℃冰凍1-2天，冰凍后再于室溫解凍；

(3)重復(fù)步驟(2)1-3次，將所得稻殼粉均勻平鋪并置于室溫干燥3-5天，即得高吸附性稻殼粉；

(4)將高免雞蛋的蛋黃和蛋清分離，取蛋黃打入容器中，攪拌；

(5)將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，并稱量質(zhì)量；

(6)將蛋黃液質(zhì)量的3/7-3/2的高吸附性稻殼粉分少量多次添加，邊加入邊攪拌，使高吸附性稻殼粉與蛋黃液完全混合；

(7)將混合均勻的蛋黃液與高吸附性稻殼粉混合物置于飼料顆粒機(jī)中壓制成直徑為2-10mm顆粒，并置于室內(nèi)陰涼處自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(8)將陰干后的顆粒置于粉碎機(jī)中二次粉碎，粉碎的顆粒過(guò)60-100目篩網(wǎng)，即得成品。

本發(fā)明的刺參飼料添加劑的使用方法為：刺參飼料添加劑與飼料的質(zhì)量比為(1-5)％∶(95-99)％，將添加劑加到飼料中混合均勻，往育苗池中施用。

本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：(1)稻殼粉來(lái)源廣泛，價(jià)格低廉；(2)特異性卵黃液中的特異性IgY可以防止刺參相應(yīng)細(xì)菌性疾?。?3)特異性卵黃中的其他營(yíng)養(yǎng)成分可有效促進(jìn)刺參生長(zhǎng)，并明顯增強(qiáng)海刺參的機(jī)體免疫力和抗病力；(4)減少抗生素和化學(xué)藥物使用量；(5)安全無(wú)毒，使用方便；(6)天然的稻殼粉載體解決了以往卵黃抗體生產(chǎn)提純過(guò)程中需要大量消耗能源的難題,極大的降低了成本。

表1 各種方法生產(chǎn)IgY制劑綜合比較

從表1可以看出，在不考慮人工成本及設(shè)備折舊等因素的情況下，本方法前期投入的設(shè)備成本最低，單位能耗降到了原來(lái)的1/5甚至更多，節(jié)能效果顯著，而且生產(chǎn)過(guò)程簡(jiǎn)單，生產(chǎn)方式靈活，制約因素較少，具有很大的商業(yè)價(jià)值。

附圖說(shuō)明

圖1為普通稻殼粉橫截面；

圖2為冰凍脹剝技術(shù)處理后稻殼粉橫截面；

圖3為刺參專用特異性卵黃液添加劑中IgY含量測(cè)定圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合技術(shù)方案詳細(xì)敘述本發(fā)明的實(shí)施例

實(shí)施例1

刺參專用抗黃海希瓦氏菌特異性卵黃液添加劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將抗黃海希瓦氏菌高免雞蛋的蛋黃和蛋清分離，取蛋黃打入容器中，攪拌；

(2)將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，并稱量質(zhì)量；

(3)將蛋黃液質(zhì)量的3/7-3/2的高吸附性稻殼粉分少量多次添加，邊加入邊攪拌，使高吸附性稻殼粉與蛋黃液完全混合；

(4)將混合均勻的蛋黃液與稻殼粉混合物置于飼料顆粒機(jī)中壓制成直徑為2-10mm顆粒，并置于室內(nèi)陰涼處自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(5)將陰干后的顆粒置于粉碎機(jī)中二次粉碎，粉碎的顆粒過(guò)60-100目篩網(wǎng)，即得成品。

實(shí)施例2

刺參專用抗?fàn)N爛弧菌特異性卵黃液添加劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將抗?fàn)N爛弧菌高免雞蛋的蛋黃和蛋清分離，取蛋黃打入容器中，攪拌；

(2)將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，并稱量質(zhì)量；

(3)將蛋黃液質(zhì)量的3/7-3/2的高吸附性稻殼粉分少量多次添加，邊加入邊攪拌，使高吸附性稻殼粉與蛋黃液完全混合；

(4)將混合均勻的蛋黃液與稻殼粉混合物置于飼料顆粒機(jī)中壓制成直徑為2-10mm顆粒，并置于室內(nèi)陰涼處自然晾干，至水分含量降低至10％以下；

(5)將陰干后的顆粒置于粉碎機(jī)中二次粉碎，粉碎的顆粒過(guò)60-100目篩網(wǎng)，即得成品。

實(shí)施例3

刺參專用特異性卵黃液添加劑中IgY含量測(cè)定

將標(biāo)準(zhǔn)IgY包被液倍比稀釋成一定梯度(1-0.015625ug/ml),將特異性添加劑樣品也稀釋成一定梯度,每孔加100ul包被96孔酶標(biāo)板,4℃過(guò)夜。用洗滌液洗滌酶標(biāo)板3次,每孔加100ul封閉液,37℃溫育后甩干、洗滌3次,再向各孔加兔抗雞IgG-HRP 100ul,37℃反應(yīng)1h；洗滌液洗滌各孔5次,每孔加100ulTMB底物溶液,室溫下顯色20min,每孔加50ul終止液終止反應(yīng),用酶標(biāo)儀測(cè)OD_450/630。以標(biāo)準(zhǔn)IgY的OD值對(duì)IgY濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得待測(cè)樣品的濃度。