本發明屬于家畜飼料制備領域，具體地說，涉及一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料及其制備方法與應用。
背景技術：
微量元素是動物體必需的營養素。長期以來，為了迎合市場對皮毛、糞便等外觀性狀的片面要求而在生長豬飼料中高劑量添加無機微量元素，尤其是硫酸銅的現象非常普遍，對動物自身、生態環境和動物產品品質造成了巨大的威脅。
隨著人們對食品安全和環境保護的意識增強，動物飼料中限制無機銅用量的呼聲越來越高。我國農業部發布第1224號公告《飼料添加劑安全使用規范》已對飼料中銅的使用作出明確限制和限量。因此，研究應用安全優質高效的新型銅源是當今飼料行業的發展趨勢。
近年來，國內飼料和養殖企業應用的新型銅源主要有氨基酸絡(螯)合銅、蛋白銅、酵母銅、堿式氯化銅等，其中氨基酸絡(螯)合銅、蛋白銅、酵母銅屬于有機銅，而堿式氯化銅為無機銅。目前只有飼料添加劑蛋氨酸銅和飼料添加劑堿式氯化銅具有國家標準(gb/t20802-2006，gb/t21696-2008)。關于堿式氯化銅對動物的促生長效果尚未得到一致的結論。多年來，大部分研究結果都證實，有機銅的生物學利用率高于無機銅，并且可以減少動物排泄物中糞銅含量，降低重金屬對環境的污染。但是，現有的氨基酸絡(螯)合銅、蛋白銅、酵母銅在實際應用中存在的主要問題是缺乏化學特性或作用機制的直接試驗證據，很難解釋試驗結果不一致的現象；另外價格因素也限制了其作為動物高效銅源的進一步推廣。
檸檬酸銅化學結構穩定、生物學效價高，在動物飼糧中應用檸檬酸銅，不但不會影響生長，而且可以減少養殖環境中銅的排放量。目前，檸檬酸銅在我國主要作為食品營養強化劑的銅源使用(gb/t14880-2012)，還沒有用作動物飼料添加劑。我國飼料工業發展規劃明確指出：研發低微量元素飼料配方技術，推廣環保型飼料產品，促進養殖污染物減排是行業的主要任務。因此，在養殖生產中推廣應用檸檬酸銅替代高劑量無機銅是發展安全優質畜牧業的理想選擇。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明針對生長豬飼料中高劑量硫酸銅對動物自身、生態環境和動物產品品質帶來的安全隱患的問題，提供了一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料及其制備方法與應用。
為了解決上述技術問題，本發明公開了一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，所述檸檬酸銅在預混料中的重量份數為3.68-14.71份。
進一步地，還包括下列重量份數的原料：一水硫酸亞鐵14.5-15.5份、一水硫酸鋅10-11份、一水硫酸錳2-5份、亞硒酸鈉3-5份、碘化鉀0.5-1份、石粉53.01-64.04份。
進一步地，包括下列重量份數的原料：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、一水硫酸錳3.14份、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份、石粉53.01-64.04份。
本發明還公開了一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料的制備方法，包括以下步驟：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵14.5-15.5份、一水硫酸鋅10-11份、一水硫酸錳2-5份、亞硒酸鈉3-5份、碘化鉀0.5-1份、檸檬酸銅3.68-14.71份、石粉53.01-64.04份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
進一步地，步驟2中的亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％。
進一步地，步驟3中的石粉占稱量好的石粉質量總量的20％-30％。
進一步地，步驟4中的擴大混合時間為3-8min。
本發明還公開了一種上述含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料在制備生長豬配合飼料中的應用。
本發明還公開了一種生長豬配合飼料，含有上述生長豬微量元素預混料。
進一步地，所述生長豬微量元素預混料的質量百分含量為0.1％-0.5％。
與現有技術相比，本發明可以獲得包括以下技術效果：
1)與硫酸銅相比，添加檸檬酸銅可以使生長豬飼料中銅用量降低50％以上；
2)與硫酸銅相比，添加檸檬酸銅可以顯著降低生長豬糞銅含量；
3)與硫酸銅相比，添加檸檬酸銅可以顯著提高生長豬采食量。
當然，實施本發明的任一產品并不一定需要同時達到以上所述的所有技術效果。
具體實施方式
以下將配合實施例來詳細說明本發明的實施方式，藉此對本發明如何應用技術手段來解決技術問題并達成技術功效的實現過程能充分理解并據以實施。
本發明公開了一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，按照質量份由以下組分構成：一水硫酸亞鐵14.5-15.5份、一水硫酸鋅10-11份、一水硫酸錳2-5份、亞硒酸鈉3-5份、碘化鉀0.5-1份、檸檬酸銅3.68-14.71份、石粉53.01-64.04份；
進一步地，該生長豬微量元素預混料，按照質量份由以下組分構成：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、一水硫酸錳3.14份、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份、檸檬酸銅3.68-14.71份、石粉53.01-64.04份。
本發明還公開了一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料的制備方法，包括以下步驟：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵14.5-15.5份、一水硫酸鋅10-11份、一水硫酸錳2-5份、亞硒酸鈉3-5份、碘化鉀0.5-1份、檸檬酸銅3.68-14.71份、石粉53.01-64.04份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的20％-30％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合3-8min，制成微量元素預混料；基于逐級擴大原則，石粉分開添加，這樣能夠使各個組分混合得更加均勻。
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
本發明還公開了一種生長豬配合飼料，含有上述生長豬微量元素預混料。所述生長豬微量元素預混料的質量百分含量為0.1％-0.5％。
實施例1
一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，包括以下重量份數的組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅3.68份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉64.04份。
通過以下方法制備得到：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅3.68份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉64.04份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的25％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合5min，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
該生長豬微量元素預混料占生長豬配合飼料的質量百分含量為0.2％。
實施例2
一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，包括以下重量份數的組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅7.35份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉60.37份。
通過以下方法制備得到：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅7.35份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉60.37份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的20％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合5min，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
該生長豬微量元素預混料占生長豬配合飼料的質量百分含量為0.1％。
實施例3
一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，包括以下重量份數的組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅11.03份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉56.69份。
通過以下方法制備得到：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅11.03份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉56.69份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的30％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合5min，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
該生長豬微量元素預混料占生長豬配合飼料的質量百分含量為0.5％。
實施例4
一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，包括以下重量份數的組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅14.71份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉53.01份。
通過以下方法制備得到：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵15份、一水硫酸鋅10.14份、檸檬酸銅14.71份、一水硫酸錳3.14、亞硒酸鈉3.33份、碘化鉀0.66份和石粉53.01份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的23％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合5min，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
該生長豬微量元素預混料占生長豬配合飼料的質量百分含量為0.3％。
實施例5
一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，包括以下重量份數的組分：一水硫酸亞鐵14.5份、一水硫酸鋅11份、一水硫酸錳2份、亞硒酸鈉5份、碘化鉀0.5份、檸檬酸銅14.71份、石粉53.01份。
通過以下方法制備得到：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵14.5份、一水硫酸鋅11份、一水硫酸錳2份、亞硒酸鈉5份、碘化鉀0.5份、檸檬酸銅14.71份、石粉53.01份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的28％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合3min，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
該生長豬微量元素預混料占生長豬配合飼料的質量百分含量為0.4％。
實施例6
一種含檸檬酸銅的生長豬微量元素預混料，包括以下重量份數的組分：一水硫酸亞鐵15.5份、一水硫酸鋅10份、一水硫酸錳5份、亞硒酸鈉3份、碘化鉀1份、檸檬酸銅3.68份、石粉64.04份。
通過以下方法制備得到：
步驟1、稱量：按照以下重量份稱量以下組分：一水硫酸亞鐵15.5份、一水硫酸鋅10份、一水硫酸錳5份、亞硒酸鈉3份、碘化鉀1份、檸檬酸銅3.68份、石粉64.04份；
步驟2、預處理：將石粉分別亞硒酸鈉和碘化鉀混合制成亞硒酸鈉預混劑和碘化鉀預混劑，其中，亞硒酸鈉預混劑中的硒含量為0.5％；碘化鉀預混劑中碘含量為3.8％；
步驟3、預混合：將稱量好的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳、檸檬酸銅混合并粉碎，加入部分石粉預混，其中，石粉占稱量好的石粉質量總量的24％；
步驟4、擴大混合：將亞硒酸鈉和碘化鉀預混劑與預混后的一水硫酸亞鐵、一水硫酸鋅、一水硫酸錳和檸檬酸銅加入剩余的石粉擴大混合8min，制成微量元素預混料；
步驟5、過篩：將步驟4制成的微量元素預混料全部通過16目分子篩，30目分析篩篩上物不大于10％；
步驟6、質檢：微量元素預混料變異系數不大于5％，水分不高于10％。
該生長豬微量元素預混料占生長豬配合飼料的質量百分含量為0.2％。
下面結合具體的實驗過程來說明本發明的技術效果：
1.材料與方法
1.1受試物
檸檬酸銅：檸檬酸銅≥98.0％，銅≥34.0％，實測值為34.4％，由四川省畜科飼料有限公司生產。
五水硫酸銅：五水硫酸銅≥98.0％，銅≥24.0％，實測值為24.5％，由四川省畜科飼料有限公司提供。
1.2試驗動物與分組
試驗選用216頭健康的杜長大三元雜交生長豬，初始體重為36.44±4.28kg，按體重一致、公母各半的原則，隨機分為6個處理，每個處理6個重復，每個重復6頭豬，試驗期為30天。基礎日糧為玉米-豆粕型日糧，在基礎日糧中分別添加100mg/kg硫酸銅(對照組)和0(陰性對照組)、25、50、75、100mg/kg檸檬酸銅，添加量均以銅計。
1.3試驗日糧
試驗采用玉米-豆粕型基礎日糧，基礎日糧營養水平參考nrc豬飼養標準(2012版)配合而成，試驗基礎日糧的組成及營養水平見表1。
表1試驗基礎日糧組成及營養水平(％)
注：1)、復合預混料給每千克配合飼料提供：維生素a，6,000iu；維生素d3，1,500iu；維生素e，15iu；維生素k3，1.5mg；維生素b1，0.9mg；維生素b2，3mg；維生素b6，1.5mg；維生素b12，10μg；煙酸，17mg；泛酸，9mg；葉酸，0.32mg；生物素，0.02mg；氯化膽堿，350mg。
2)、營養水平除消化能外均為實測值。
1.4飼養管理
試驗前對豬舍進行徹底消毒，并清洗料槽、飲水器。豬舍溫度控制在
1.5樣品采集
于試驗第30天，每處理每重復選取1頭體重接近該圈平均值的豬(每處理6頭豬)進行前腔靜脈采血10ml，于室溫下傾斜放置0.5h，2000rpm離心10min制備血清，于
1.6測定指標及方法
1.6.1生長性能
于試驗開始、第30天對豬進行空腹稱重，在整個試驗期結算耗料量，記錄死亡情況。以重復為單位，計算平均日采食量(adfi)、平均日增重(adg)、耗料增比(f:g)、死亡率。
1.6.2抗氧化指標
血清抗氧化指標包括丙二醛(mda)含量、銅鋅超氧化物歧化酶(cu/zn-sod)、谷胱甘肽過氧化物酶(gsh-px)、銅藍蛋白(cup)活性。按照試劑盒的說明進行測定。
1.6.3血清和糞便微量元素含量
血清和糞便銅含量采用電感耦合等離子體質譜儀測定。
1.7數據處理與統計分析
試驗數據以重復(圈)為統計單位，采用sas9.2統計軟件處理，進行glm分析、duncan多重比較，p<0.05時差異顯著。
2.結果與分析
2.1生長性能
日糧添加不同水平檸檬酸銅對生長豬生長性能的影響見表2。由表2可知，日糧添加25和50mg/kg檸檬酸銅的adg顯著高于陰性對照組(p<0.05)，但與對照組比差異不顯著(p>0.05)。日糧添加檸檬酸銅組的adfi顯著高于陰性對照組(p<0.05)，且25和50mg/kg檸檬酸銅組的adfi顯著高于對照組(p<0.05)。試驗各組間的f：g及死亡率差異不顯著(p>0.05)。
表2日糧添加不同水平檸檬酸銅對生長豬生長性能的影響
注：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)；未標明字母或相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。
2adg為平均日增重，adfi為平均日采食量，f:g為耗料增重比。
2.2抗氧化性能
日糧添加不同水平檸檬酸銅對生長豬抗氧化性能的影響見表3。由表3可知，日糧添加100mg/kg檸檬酸銅的血清mda含量顯著低于陰性對照組(p<0.05)，但與對照組比差異不顯著(p>0.05)。血清cu/zn-sod、gsh-px和cup活性各組間均無顯著差異(p>0.05)。
表3日糧添加不同水平檸檬酸銅對生長豬抗氧化性能的影響
注：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)；未標明字母或相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。
2mda為丙二醛，cu/zn-sod為銅鋅超氧化物歧化酶，gsh-px為谷胱甘肽過氧化物酶，cup為銅藍蛋白。
2.3血液和糞便銅含量
日糧添加不同水平檸檬酸銅對生長豬血液和糞便銅的影響見表4。由表4可知，試驗各組間的血清cu含量無顯著差異(p>0.05)。日糧添加0、25、50和75mg/kg檸檬酸銅的糞便cu含量顯著低于對照組和100mg/kg檸檬酸銅組(p<0.05)，并隨著檸檬酸銅添加量的提高而提高(p<0.05)。
表4日糧添加不同水平檸檬酸銅對生長豬血液和糞便銅含量的影響
注：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)；未標明字母或相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。
3.小結
3.1日糧添加25和50mg/kg檸檬酸銅的adg顯著高于陰性對照組(p<0.05)，但與對照組比差異不顯著(p>0.05)，adfi顯著高于對照組和陰性對照組(p<0.05)；
3.2日糧添加0、25、50和75mg/kg檸檬酸銅的糞便cu含量顯著低于對照組和100mg/kg檸檬酸銅組(p<0.05)；
3.3生長豬日糧中檸檬酸銅推薦的適宜添加量為25～50mg/kg。
上述說明示出并描述了發明的若干優選實施例，但如前所述，應當理解發明并非局限于本文所披露的形式，不應看作是對其他實施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環境，并能夠在本文所述發明構想范圍內，通過上述教導或相關領域的技術或知識進行改動。而本領域人員所進行的改動和變化不脫離發明的精神和范圍，則都應在發明所附權利要求的保護范圍內。