專利名稱：提高機體免疫功能藥物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種可提高機體免疫功能藥物，特別是一種以中草藥及其提取物為原料制備的中藥組合物，本發明還涉及該藥物的制備方法。
背景技術：
本發明藥物根據《治癥準繩》和《古今錄驗方》中的枸杞丸，加減而成。同時，亦參照了《太平圣惠方》中枸杞粥。
無花果《綱目》“甘、平，無毒”歸經“手足太陰，手陽明經”《隨息居食譜》曰“健胃、清熱、潤腸”等功能。有補益中氣，養血安神，緩和藥性，久服延年益壽之功。枸杞子，其性平味甘，入肝腎經，有滋肝補腎，益經養血，有延年益壽之功。甘草《本徑》曰性“味甘，平”；《別錄》“無毒”《珍珠》“生甘，平，炙甘，溫”，具有和中緩急，潤肺，解毒，調和諸藥的功效。甘草于無花果、枸杞子配伍可以提高療效，降低毒性。大豆提取物含有大豆異黃酮類物質，是天然的植物雌激素，此外具有抗氧化、抗癌、改善血液流體動力學、降低血脂、防止骨質疏松等明顯的保健作用，并且無毒物副作用。

發明內容
本發明藥物是由下列組分為原料制成的(用量為重量份)無花果40-60，枸杞子20-30，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味劑1-3制備本發明藥物的原料優選重量(份)配比是無花果50，枸杞子25，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味劑2所述大豆提取物是將大豆用水煮沸、離心過濾后，經吸附樹脂洗脫，然后噴霧干燥而得到的；
所述甜味劑是蔗糖、葡萄糖、果糖、阿斯巴甜(Aspartame)低聚糖、木糖醇。
本發明藥物中，無花果為君藥，枸杞子為臣藥，甘草為佐藥，大豆提取物作為使藥。
本發明所述藥物的劑型是沖劑、顆粒劑、粉劑、片劑或膠囊。
將上述各組分制成本發明藥物的制備方法是1、無花果、枸杞子、甘草有效成分提取取無花果、枸杞子、甘草，加8倍藥量的水煮沸，2小時后傾出上清液，反復3次；將上述煎煮液離心過濾。濾液減壓濃縮，加入95％乙醇至醇的濃度為50％，濾除上清液，沉淀用水溶解，再加入95％食用乙醇至醇的濃度為50％，沉淀經噴霧干燥得到有效成分；2、大豆提取物的制備將大豆加8倍藥量的水煮沸，1小時后傾出上清液，反復3次。將上述煎煮液離心過濾；濾液減壓濃縮，然后加在吸附樹脂上，用10％的乙醇洗脫，經噴霧干燥得到大豆提取物；3、制粒將淀粉、甜味劑與上述二提取物混合、制粒，得到本發明藥物。
本發明藥物可用下述兩種方法進行定性分析，方法是1、硫酸——苯酚反應取本發明藥物0.1g，用少量蒸餾水溶解，置試管中，加入10％的硫酸——乙醇液。水浴100℃10分鐘，顯紅棕色。
2、三氯化鐵反應稱三氯化鐵0.1g，用30％的乙醇定容于50ml，將本發明藥物0.1g用少量蒸餾水溶解，用毛細管點在濾紙上，噴灑三氯化鐵試劑，加熱，顯藍黑色斑點。
對本發明藥物進行了下述藥理、藥效學實驗，1、抗體生成細胞(PFC)檢測 當小鼠口服劑量1.5g/日/kg時，與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)，當小鼠劑量3g/日/kg時與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)。
2、血清溶血素的測定 當小鼠口服劑量3g/日/kg時，與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)，當小鼠劑量10g/日/kg時與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)。
3、小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗 當小鼠劑量3g/日/kg時，與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)，當小鼠口服劑量10g/日/kg時與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)。
4、小鼠碳廓清實驗 經口給予小鼠不同劑量的受試物4周后，與對照組比較，當計量10g/日/kg時，小鼠吞噬指數( )提高19％(p＜0.01)。
5、大鼠高血脂試驗 經口服給藥3g/日/kg，4周后，與高血脂動物組比較血小板凝集率、6-酮-PGF1α和TXB2均有明顯下降有顯著性差異(p＜0.05)或非常顯著性差異(p＜0.01)。
上述結果表明本發明藥物具有明顯提高機體免疫功能并且可改善血液中血小板、6-酮-PGF1和TXB2功能及改善紅細胞指數作用。
具體實施例方式
實施例1藥物(沖劑)的制備取無花果500g、枸杞子250g、甘草250g，加8倍藥量的水煮沸3次，每次2小時。煎煮液用欄式離心機離心濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度d＝1.18，加入95％食用乙醇至醇的濃度為50％，濾除上清液，沉淀用水溶解，再加入95％食用乙醇至醇的濃度為50％，沉淀經噴霧干燥得到有效部位。
另取大豆1000g，加8倍藥量的水煮沸3次，每次1小時。煎煮液用欄式離心機離心濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度d＝1.16，上大孔吸附樹脂(型號AB-8，柱床φ10cm×50cm)用10％的乙醇洗脫，經噴霧干燥得到大豆提取物。
取藥用淀粉，藥用蔗糖，與上述二提取物混合，干法制粒，得到藥物沖劑100袋×3克/袋。
實施例2藥理、藥效學實驗一、實驗方法及條件1.劑量 小鼠效劑量分為三個劑量組。低1.5g/日/kg體重、中3.0g/日/kg體重、高10.0g/日/kg采取灌胃法，每日灌胃一次，對照組灌蒸餾水。各組小鼠連續給予受試物4周后，測定各項指標。
2.儀器與試劑752分光光度計，AE100電子天平，電熱三用水箱，隔水式恒溫培養箱，螺旋測微器，KA-1000型臺式離心機，80-2型臺式離心機，玻片架，二氧化碳培養箱，超凈工作臺，24孔增養板，顯微鏡，實驗數據用微軟公司Excel軟件進行方差分析統計。
二、實驗項目與結果1.抗體生成細胞(PFC)檢測腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。5d后，取小鼠脾臟制成細胞濃度為5×106個/ml的脾細胞液。溶解瓊脂糖制成1％的溶液，于48.0℃水浴保溫，與等量2倍濃度的Hank’s液混合，分裝至小試管中。每管0.50mL，加入0.050mL 10％SRBC和0.010mL脾細胞懸液，迅速混勻，傾倒在玻片上。于37.0℃恒溫箱中溫育1h，將補全體加在玻片槽中，再溫育1.5h。計數空斑。
結果見表1。
表1 本發明藥物對正常小鼠PFC的影響(X±SD)單位log10空斑數

*與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)**與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)2.血清溶血素的測定腹腔注射0.2mL2％(V/V)SRBC免疫每只小鼠。5d后，摘眼球取血于離心管內，放置1h，2000r/min離心10min，收集血清。小鼠血清用SA液稀釋400倍，依次加入稀釋的小鼠血清1.00mL、10％(v/v)的SRBC0.50mL、補體(用SA液1∶10稀釋)1.00mL。另設不加血清的對照管(SA液代替)。置37.0℃水浴20min后冰水浴終止反應。2000r/min離心10min。取上清液1.00mL，都試劑3.00mL于試管內，同時取10％(v/v)的SRBC0.25ml加都試劑4.00mL作為半數溶血管。放置10min后，540nm波長處測定光密度值。試驗結果以半數溶血值(HC50)表示。結果見表2
表2 本發明藥物對正常小鼠血清溶血素的影響(X±SD)

*與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)**與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)3.小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗小鼠腹腔注射20％雞紅細胞懸液1.0mL，間隔30min，勁椎脫臼處死動物，剪開腹壁皮膚，腹腔注入Hank’s液2.0ml。按揉腹腔，吸出腹腔洗液1.0mL，分別滴于2張載玻片上，37.0℃恒溫箱中溫育30min然后經1∶1丙酮甲醇溶液固定，4％(v/v)Giesma-磷酸緩沖液染色，再用蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計數巨噬細胞，每張片計數100個。以吞噬百分率和吞噬指數表示小鼠巨噬細胞的吞噬能力。
結果見表3。
表3 本發明藥物對正常小鼠的巨噬細胞吞噬率的影響

*與對照組比較有顯著性差異(p＜0.05)**與對照組比較有非常顯著性差異(p＜0.01)4.小鼠碳廓清實驗對每只小鼠尾靜脈注射稀釋4倍的印度墨汁，0.1mL/10g體重。待墨汁注入后立即記時。分別于注入墨汁后1、10min取血0.020mL加至2.00mL碳酸鈉溶液中，600nm波長處測定光密度值，以碳酸鈉溶液作對照。另取肝臟和脾臟稱重。以吞噬指數( )來表示巨噬細胞吞噬功能。結果見表4。
表4本發明藥物對正常小鼠的碳廓清的影響(X±SD)

**與對照組比較有顯著性差異(p＜0.01)
5.大鼠血小板凝聚試驗大鼠分為三組。I組正常基礎飼料，II組高脂肪飼料(正常飼料+5％豬油+1.5％膽固醇)，III組高脂肪飼料+“本發明藥物”沖劑，3g/日/kg，4周。采用ADP誘導比濁法，測定各組大鼠血小板凝聚率，ADP誘導濃度為4μM。血漿中6-酮-PGF1α和TXB2水平的測定在試驗進行4周時取血，用放免分析方法測定。
結果見表5。
表5本發明藥物對大鼠血小板凝聚的影響

**與I組比較有顯著性差異(p＜0.01)##與II組比較有顯著性差異(p＜0.01)三、結論上述藥理研究表明1、本發明藥物劑量1.5g/日/kg時，能夠顯著提高小鼠抗體生成細胞(PFC)數，與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)，當小鼠劑量3g/日/kg時與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)；2、本發明藥物能夠提高小鼠血清溶血素的百分數，當小鼠口服劑量3g/日/kg時，與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)，當小鼠劑量10g/日/kg時與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)；3、本發明藥物能夠提高小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的能力，當小鼠劑量3g/日/kg時，與對照相比較有顯著性差異(p＜0.05)，當小鼠口服劑量10g/日/kg時與對照相比較有非常顯著性差異(p＜0.01)；4、本發明藥物能夠提高小鼠吞噬指數( )，當計量10g/日/kg時，小鼠吞噬指數( )提高1 9％(p＜0.01)；本發明藥物經大鼠口服給藥3g/日/kg，4周后，與高血脂動物組比較血小板凝集率、6-酮-PGF1和TXB均有明顯下降，且有非常顯著性差異(p＜0.01)。
權利要求
1.一種提高機體免疫功能藥物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成無花果40-60，枸杞子20-30，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味劑1-3。
2.根據權利要求1所述的藥物，其原料優選重量(份)配比是無花果50，枸杞子25，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味劑2。
3.根據權利要求1所述的藥物，所述大豆提取物是將大豆用水煮沸、離心過濾后，經吸附樹脂洗脫，然后噴霧干燥而得到的。
4.根據權利要求1所述的藥物，所述甜味劑是蔗糖、葡萄糖、果糖、阿斯巴甜、低聚糖、木糖醇。
5.根據權利要求1所述的藥物，其劑型是沖劑、顆粒劑、粉劑、片劑或膠囊。
6.根據權利要求1所述的藥物的制備方法是取無花果、枸杞子、甘草，加8倍藥量的水煮沸，2小時后傾出上清液，反復3次；將上述煎煮液離心過濾。濾液減壓濃縮，加入95％乙醇至醇的濃度為50％，濾除上清液，沉淀用水溶解，再加入95％食用乙醇至醇的濃度為50％，沉淀經噴霧干燥得到有效成分；將大豆加8倍藥量的水煮沸，1小時后傾出上清液，反復3次，將上述煎煮液離心過濾，濾液減壓濃縮，然后加在吸附樹脂上，用10％的乙醇洗脫，經噴霧干燥得到大豆提取物；將淀粉、甜味劑與上述二提取物混合、制粒。
全文摘要
一種提高機體免疫功能藥物及其制備方法。本發明藥物由無花果40－60，枸杞子20－30，甘草25，大豆提取物3，淀粉10，甜味劑1－3為原料制成(用量為重量份)。該藥物的制備方法是取無花果、枸杞子、甘草，加水煮沸，將煎煮液離心過濾。濾液減壓濃縮，加入95％乙醇，濾除上清液，沉淀用水溶解，沉淀經噴霧干燥得到有效成分；將大豆加水煮沸，將煎煮液離心過濾，濾液減壓濃縮，然后加在吸附樹脂上洗脫，經噴霧干燥得到大豆提取物；將淀粉、甜味劑與上述二提取物混合、制粒。本發明的藥物具有明顯提高機體免疫功能并且可改善血液中血小板、6－酮－PGF
文檔編號A61P37/04GK1507904SQ0215662
公開日2004年6月30日 申請日期2002年12月17日 優先權日2002年12月17日
發明者楊霽初, 張詩夢, 劉海燕, 馬芳 申請人:楊霽初, 張詩夢, 劉海燕, 馬芳