專利名稱：：硫代嗎啉代甾族化合物、它們用于制備減數分裂調節藥物的用途以及它們的制備方法
技術領域：
：本發明涉及藥學活性的硫代嗎啉代甾族化合物、包含這些化合物的藥物組合物、這些化合物用于制備適用于調節生殖特別是減數分裂的藥物組合物、避孕藥或促生育藥物(profertilitydrug)的用途、調節生殖例如減數分裂的方法、提高卵母細胞發育成哺乳動物的可能性的方法以及制備(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇的方法。減數分裂是生殖細胞的獨特和最終事件，它是有性繁殖的基礎。減數分裂包括兩次減數分裂。在第一次分裂中，在染色體對分開為子細胞之前發生母系基因和父系基因的交換。它們僅含有半數(ln)染色體和2cDNA。第二次減數分裂的進行不伴有DNA合成。因此這次分裂導致僅含有1cDNA的單倍體生殖細胞的形成。減數分裂在雄性與雌性生殖細胞中是相似的過程，但產生卵子和精子的時間進程和分化過程卻有非常大的差異。所有的雌性生殖細胞在生命早期通常在出生之前進入第一次減數分裂前期，但是此后所有的雌性生殖細胞都以卵母細胞的形式停止在該前期(核網狀態)中直至青春期后排卵。因此，從生命的早期雌性就具有了卵母細胞儲備并直至該儲備用盡。雌性中的減數分裂直至受精后才完成，而且每個生殖細胞僅產生一個卵子和兩個流產極體(abortivepolarbody)。與此相反，雄性生殖細胞中僅有一些從青春期進入減數分裂，并在整個生命過程中產生很多生殖細胞。對于控制雄性和雌性開始減數分裂的機制知之甚少。新研究表明卵泡嘌呤、次黃嘌呤和腺嘌呤可能是卵母細胞中減數分裂停滯的原因[S.M.Downs等，Dev.Biol.，82，454-458(1985)；J.J.Epplg.等，Dev.Biol.，119，313-321(1986)；S.M.Downs，Mol.Reprod.Dev.，35，82-94(1993)]。Byskov等首次描述了胎鼠性腺培養物體系中存在擴散性減數分裂調節物質[A.G.Byskov等，Dev.Biol.，52，193-200(1976)]。減數分裂激活物質(MAS)由正在進行減數分裂的胎鼠卵巢分泌，而減數分裂抑止物質(MPS)由形態學上已分化的具有靜止的非減數分裂的生殖細胞的睪丸釋放。已表明MAS和MPS的相對濃度調節雄性和雌性生殖細胞減數分裂的開始、停止和重新開始[A.G.Byskov等，在ThePhysiologyofReproduction(E.Knobil和J.D.Neill編著)中，RavenPress，NewYork(1994)]。顯然，如果可以調節減數分裂，生殖就可以控制。最近的一篇文章[A.G.Byskov等，Nature，374，559-562(1995)]描述了某些甾醇的分離。這些甾醇從牛睪丸和卵泡液中分離出來，它們激活卵母細胞的減數分裂[T-MAS(睪丸減數分裂激活甾醇)和FF-MAS(卵泡液減數分裂激活甾醇)4，4-二甲基-5α-膽甾-8，14，24-三烯-3β-醇]。還表明微摩爾濃度的合成FF-MAS能夠以劑量依賴性的方式在被磷酸二酯酶抑制劑IBMX(3-異丁基-1-甲基黃嘌呤)停滯的大鼠卵母細胞中誘導減數分裂的重新開始[C.Hegele-Hartung等，Biol.Reprod.，64，418-424(2001)]。證明了當在FF-MAS存在下將CEO(卵丘包裹的卵母細胞)和DO(裸卵母細胞)一起體外培養可以觀察到這一作用。其它調節減數分裂的物質在以下文獻中描述。在WO98/52965A1中描述了激活減數分裂的20-芳烷基-5α-孕烷衍生物。在WO00/68245A1中公開了能夠抑制減數分裂因而可用作男性和女性避孕藥的甾族化合物。這些化合物主要是不飽和膽甾烷衍生物，其特征是3β-氫原子連接于膽甾烷骨架的C14碳原子上。在WO96/00235A1中描述了誘導減數分裂的已知為膽固醇生物合成中間體的甾醇以及某些結構相關的合成甾醇。已發現這些物質可以調節減數分裂。與膽固醇相似，這些甾醇在甾醇骨架的C17上有側鏈，且還具有Δ7、Δ8或Δ8(14)雙鍵中的至少一個。在WO96/27658A1中公開了刺激生殖細胞減數分裂的方法，其包括給予體內細胞、離體細胞或體外細胞有效量的化合物，該化合物引起內源性減數分裂激活物質累積至可誘導減數分裂的水平。公開了引起內源性減數分裂激活物質累積的這些化合物是兩性霉素B、氨基胍、3β，5α，6β-三羥基膽甾烷、梅拉通寧、6-氯梅拉通寧和5-甲氧基色胺以及它們的其它衍生物和激動劑。另外，還報道減數分裂激活物質有5α-膽甾烷-3β-醇，D-高-膽甾-8，14-二烯-3β-醇和22，25-二氮雜膽甾醇、25-氮雜-24，25-二氫羊毛甾醇、24，25-亞氨基羊毛甾醇、23-和24-氮雜膽甾醇以及25-氮雜膽甾醇衍生物。在WO97/00884A1和WO98/28323A1中描述了可用于體外、體內或離體刺激減數分裂的物質。因此所公開的化合物是天然減數分裂激活物質的激動劑，而且因此可用于治療雌性和雄性中由于減數分裂刺激不足導致的不育癥。在該文獻中還公開了一些可以是天然減數分裂激活物質拮抗劑的化合物，因此這些化合物可適合用作避孕藥。所公開的化合物還包括5α-膽甾-8-烯-3β-醇和5α-膽甾-8，14-二烯-3β-醇，其中它們在連接于膽固醇骨架的C17的側鏈上可具有氨基，該氨基通過C4間隔基連接于甾醇骨架上。C1-4烷基或C3-6環烷基連接于氨基上。此外，在WO99/58549A1中公開了有效調節減數分裂的甾醇衍生物。描述了這些化合物具有緩解雌性和雄性特別是人的不育癥的能力。作為有效調節物質的甾醇衍生物特別是(20R)-20-甲基-23-二甲氨基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇、(20R)-20-甲基-23-二甲氨基-5α-孕-5，7-二烯-3β-醇、4，4-二甲基-24-苯氨基-5α-膽甾-8，14-二烯-3β-醇、4，4-二甲基-24-(N，N-二甲基氨基)-24-氰基-5α-膽甾-8，14-二烯-3β-醇以及在甾醇骨架中具有一個或多個雙鍵的各種24-酸酰胺。在WO02/079220A2中描述了具有減數分裂調節能力的甾族化合物，這些化合物主要是具有連接于C20上的氨甲基或氨乙基基團的甾醇。氨基可以是例如含氮雜環，更具體地是哌啶環。這些化合物的一個實例是(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇。通常這些化合物對卵母細胞特別是CEO(＝卵丘包裹的卵母細胞)表現出刺激減數分裂的作用。在一個具體的實例中公開了一種硫代嗎啉代化合物。J.J.Sheets和L.E.Vickery在“ActiveSite-directedInhibitorsofCytochromeP-450scc”J.Biol.Chem.，Vol.258(19)，1983，第11446-11452頁中也描述了在C17上的側鏈中具有氨基的不飽和甾醇衍生物，描述了這些甾醇對牛腎上腺皮質膽固醇側鏈裂解細胞色素P-450(P-450scc)的作用。在該文獻中特別公開了22-氨基-23，24-雙-去甲-膽-5-烯-3β-醇和23-氨基-24-去甲膽-5-烯-3β-醇。A.T.Mangla和W.D.Nes在“SterolC-methylTransferasefromProtothecawickerhamii，Mechanism，SterolSpecificityInhibition”Bioorg.andMed.Chem.(2000)，8(5)，925-936中報道了在C17上的側鏈中具有氨基的其它不飽和衍生物。在該文獻中特別公開了23-氮雜-酵母甾醇。已發現當使用以前描述的減數分裂調節物質時體外裸卵母細胞重新開始減數分裂。但是，當刺激被粒細胞包圍的卵母細胞(CEO)減數分裂時這些化合物中的很多卻僅具有微弱的效果。體外受精率和進一步再轉移植入率以及妊娠結束時胎兒成活數都不夠高。將上述文獻的公開內容引入作為參考。本發明的一個目的是找到可用于調節雌性和雄性，特別是哺乳動物，尤其是人的生殖，特別是減數分裂的物質。本發明的另一個目的是提供包含所述新物質的新的藥物組合物。本發明的另一個優選的目的是提供所述新物質用于制備適用于調節生殖，特別是減數分裂的藥物組合物的用途。本發明的另一個優選的目的是提供調節生殖如減數分裂的新方法。本發明的另一個目的是提供治療人不育癥的方法。本發明的另一個目的是促進人卵母細胞的成熟。本發明的再一個目的是促進核、胞漿和/或膜卵母細胞的同步成熟。本發明的再一個目的是提高卵母細胞的生育力。本發明的再一個目的是提高體外成熟和受精的人卵母細胞的植入率。本發明的再一個目的是減少人胚前期染色體異常(非整倍性)的發生率。本發明的再一個目的是提高人前期胚胎的分裂率。本發明的再一個目的是提高人前期胚胎的質量。本發明的另一個目的是提供制備所述新物質的方法。根據本發明，通式I的硫代嗎啉甾族化合物可以有利地用于調節哺乳動物例如雌性和雄性，特別是人的生殖例如減數分裂其中在化合物I的I’部分中C5和C6之間、C6和C7之間、C7和C8之間、C8和C9之間、C8和C14之間、C14和C15之間的每個鍵獨立地是單鍵或雙鍵，這些鍵至少有一個是雙鍵，且其中C5、C6、C7、C8、C9、C14和C15中每個碳原子至多通過一個雙鍵連接于各自的相鄰碳原子上，條件是在該甾體骨架中沒有C5和C6之間的唯一雙鍵(這后一條件表示只具有Δ5雙鍵的化合物不包括在本發明之內)，且其中R4和R4’獨立地選自氫和甲基。本發明的甾族化合物中的通式I’的部分優選包含C8和C14之間的一個雙鍵或者包含兩個共軛雙鍵，優選C8和C9之間及C14和C15之間的兩個雙鍵或者C5和C6之間及C7和C8之間的兩個雙鍵。R4和R4’優選是相同基團，即它們都是氫或都是甲基。其余氫原子可以連接于C1、C2、C5、C6、C7上，任選連接于C8、C9、C11、C12、C14、C15、C16和C17上，這取決于各自的C原子是否是雙鍵的一部分。在C10、C13和C18中甲基分別連接于甾體骨架和側鏈上。根據本發明，更優選所述甾族化合物選自(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇化合物IA(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8(14)-烯-3β-醇化合物IB(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇化合物IC(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-孕-5，7-二烯-3β-醇化合物ID(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-5α-孕-8(14)-烯-3β-醇化合物IE。根據本發明最優選的硫代嗎啉代化合物是具有化學式IA的(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇。因此，用如果甾體骨架含有Δ8，14雙鍵系統且如果R4和R4’是甲基(化合物IA)的硫代嗎啉代衍生物誘導卵泡培養物體系成熟達到最佳性能。這些新的甾族化合物具有多個手性中心，因此這些化合物以幾種異構體形式存在。除非本文另外說明，所有這些異構體形式都在本發明的范圍之內。已令人驚奇地發現，本發明的化合物對卵母細胞特別是CEO具有很強的減數分裂刺激作用，盡管這些化合物與甾醇FF-MAS的結構差異很大。在這方面，本發明的化合物優于以前描述過的減數分裂調節物質[例如A.G.Byskov等，Nature，374，559-562(1995)]。優選的通式I的化合物是當在如下文所描述的卵母細胞測試中測試時誘導至少40％、優選至少60％、特別是至少80％的生發泡破裂的那些化合物。本發明的化合物優于以前描述的化合物的第二個方面是FF-MAS不能誘導卵泡培養物體系的成熟，而本發明的化合物卻能夠在這種情況下激活減數分裂。與WO02/079220A2中公開的化合物相比，本發明的硫代嗎啉代甾族化合物表現出更強的成熟刺激活性，特別是在體外受精中，和體外受精后更高的再轉移至雌性的輸卵管(tube)中的成功再轉移率。另外，如果刺激的卵母細胞的再轉移已經實施，所述新化合物在妊娠結束時胎兒成活數方面表現優異的特性。而且，本發明化合物在水中的溶解度高于現有技術中的化合物。如在小鼠中所示，還發現生發泡的生長受到更好的刺激。對于本發明的硫代嗎啉代化合物，當它們與WO02/079200A2中公開的最有效的化合物相比，特別是與(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(該文獻中的2號化合物)相比時，這些新化合物的上述優點也是如此。由于這一原因，這些新的甾族化合物可以例如用于體內用途以及特別地包括體外用途在內的非體內用途。該甾族化合物特別適用于哺乳動物特別是人的體外和體內受精。這些新化合物的優異性質可歸因于該化合物中結構特征的組合，即主要是雙鍵在甾體骨架中的位置和通過亞甲基間隔基與甾體骨架的C17碳原子相連的側鏈中的硫代嗎啉代基團以及C20-R20基團。優選的本發明的藥學可接受的化合物是通式I的甾族化合物的鹽。這些鹽的實例列于JournalofPharmaceuticalScience，66，2etseq.(1977)中，該文獻在此引入本文作為參考。這種鹽的實例包括有機酸如甲酸、富馬酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、草酸、琥珀酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、水楊酸、甲磺酸等的鹽。形成藥學可接受的鹽的合適的無機酸包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸等。本發明的另一個目的是提供包含至少一種通式I的硫代嗎啉代甾族化合物和至少一種藥學可接受的賦形劑的藥物組合物，所述賦形劑選自本領域熟知的賦形劑。賦形劑例如可以是至少一種載體、稀釋劑、吸收促進劑、防腐劑、緩沖劑、藥物組合物是液體時用于調節藥物的滲透壓和流變學性質的試劑、至少一種表面活性劑、溶劑、片劑崩解劑、微膠囊、填充劑、潤滑添加劑、著色劑、調味劑以及其它成分。這些物質是本領域常規使用的。本發明的硫代嗎啉代甾族化合物優選以有效量包含于藥物組合物中。固體載體的實例是碳酸鎂、硬脂酸鎂、糊精、乳糖、蔗糖、滑石粉、明膠、果膠、淀粉、硅膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟和可可脂。液體組合物包括無菌溶液劑、混懸劑和乳劑，它們可以例如口服給藥、經鼻給藥或者以軟膏的形式給藥。這些液體組合物也適用于注射或用于與離體或體內應用有關的用途。對于口服給藥，該液體可以包含藥學可接受的油和/或親脂性表面活性劑和/或與水混溶的溶劑。在此方面參考WO97/21440A1。液體組合物還可以包含本領域常規使用的其它成分，這些成分中的一些在以上的列表中已提及。另外用于經皮給予本發明化合物的組合物可以以藥貼的形式提供。用于經鼻給藥的組合物可以以液體或者粉末狀的鼻腔噴霧劑形式提供。為增加硫代嗎啉代甾族化合物的生物利用度，這些化合物還可以配制成環糊精包合物。為此目的，將這些化合物與α-、β-或γ-環糊精或其衍生物復合。外用給藥的藥膏、軟膏、洗劑和其它液體必須能夠將本發明的硫代嗎啉代甾族化合物以足夠的量遞送至需要調節減數分裂的個體。為此目的，藥物中包含上述用于調節藥物的流變學性質的賦形劑和其它添加劑、用于增強皮膚滲透能力的其它物質和護膚物質如調理劑和水分調節劑。該藥物還可以包含用于增強或調節硫代嗎啉代甾族化合物的效力或產生該藥物的其它期望作用的其它活性劑。對于腸胃外給藥，甾族化合物可以溶解或懸浮于藥學可接受的稀釋劑中。油通常與溶劑、表面活性劑、混懸劑或乳化劑組合使用，所述油例如橄欖油、花生油、豆油、蓖麻油等。對于制備注射用藥物可以使用任何液體載體。這些液體通常還包含用于調節其粘度的活性劑和用于調節液體等滲性的活性劑。硫代嗎啉代甾族化合物還可以作為可注射貯存單元(injectabledepot)或植入物給藥，它們例如可通過皮下給藥，使得可能實現硫代嗎啉代甾族化合物的緩釋。為此目的，可以使用各種技術，例如通過包含含有活性化合物的膜的貯存單元給藥，或通過緩溶貯存單元給藥。植入物可以例如包含可生物降解的聚合物或作為惰性材料的合成硅酮。硫代嗎啉代甾族化合物的使用劑量可由醫生確定并取決于所使用的具體甾族化合物、給藥途徑和使用目的。通常地，本發明的藥物組合物通過如下步驟制備將活性化合物與液體或固體輔助成分緊密混合，然后如果需要，將產物制成期望的制劑。每日給予哺乳動物例如給予人的甾族化合物通常不超過3000mg，優選不超過350mg，在某些優選情況下不超過30mg。本發明還涉及通式I的硫代嗎啉代甾族化合物用于制備用于調節生殖例如減數分裂的組合物的用途。該組合物優選可以作為藥物應用。本發明還涉及通式I的新的硫代嗎啉代甾族化合物用于制備避孕藥或促生育藥物的用途。本發明還涉及通式I的硫代嗎啉代甾族化合物用于非體內使用的用途。本發明還涉及調節生殖例如減數分裂的方法，其包括給予需要這種調節的個體有效量的至少一種通式I的硫代嗎啉代甾族化合物。本發明還涉及用于提高卵母細胞發育成為哺乳動物的可能性的方法，其包括使從哺乳動物中取出的卵母細胞與通式I的硫代嗎啉代甾族化合物接觸。本文所用的調節生殖例如減數分裂是指本發明的化合物尤其適合于刺激哺乳動物特別是人的卵母細胞的生殖例如減數分裂，因此這些作為天然減數分裂激活物質(FF-MAS)激動劑類似物的化合物可以用于治療雌性和雄性中由于減數分裂激活不足而引起的不育癥。給予包含本發明化合物的組合物的給藥途徑可以是任何能夠將活性甾族化合物有效地轉運至它的作用部位的途徑。因此，當將所述甾族化合物給予哺乳動物時，這些藥物組合物以藥物組合物的形式方便地提供，該組合物包含至少一種本發明的硫代嗎啉代甾族化合物和藥學可接受的載體。在口服使用時，這種組合物優選是片劑或膠囊劑的形式。所述硫代嗎啉代甾族化合物可以通過與已知化合物的制備相似的方法合成。因此，式I的甾族化合物的合成可以按照詳盡的甾醇和甾族化合物文獻中描述的成熟的合成途徑來進行。以下文獻可以用作合成方法的主要來源L.F.Fieser&M.FieserSteroids，ReinholdPublishingCorporation，N.Y.，1959；Rood′sChemistryofCarbonCompounds(S.Coffrey編著)ElsevierPublishingCompany，1971；以及特別是DictionaryofSteroids(R.A.Hill，D.N.Kirk，H.L.J.Makin和G.M.Murphy編著)，Chapman&Hall，這些文獻在此引入本文作為參考。最后一篇文獻包括了對涵蓋直至1990年的原文的廣泛的引用目錄。本發明還特別地涉及制備(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)的方法，該方法包括以下方法步驟a)從(20S)-20-羥甲基-孕-4-烯-3-酮開始；b)通過烷基化在C4上引入兩個烷基；c)將酮基還原為羥基；d)用酰基，優選用苯甲酰基保護所得的羥基；e)通過溴化/脫去溴化氫引入Δ7雙鍵；f)通過在酸存在下加熱使二烯Δ5，7異構化為二烯Δ8，14；g)將20-羥基氧化為醛基；h)用硫代嗎啉將醛基還原胺化，并通過還原反應除去苯甲酰基。該第一合成方法的相應的合成路線如圖1(路線1)所示。根據該路線，首先(20S)-20-羥甲基-孕-4-烯-3-酮1側鏈中的羥基被保護為甲硅烷基醚例如三異丙基甲硅烷基(TIP)醚，得到化合物2(方法步驟a)。為制備化合物3，在堿如叔丁醇鉀存在下通過用甲基碘烷基化來在甾體骨架的C4中引入兩個甲基(方法步驟b)。在下一步中，用常規還原劑如氫化鋁鋰或硼氫化鈉還原3-酮基(方法步驟c)。然后將所得的醇4保護為例如苯甲酸酯(化合物5，方法步驟d)。然后經溴化/脫去溴化氫反應順序引入第二個雙鍵(方法步驟e)。然后將化合物6中所得的Δ5，7-二烯系統通過在鹽酸存在下加熱使之異構化為Δ8，14-二烯系統，得到化合物7(方法步驟f)。在這一酸催化步驟中，只有側鏈中的羥基被去保護，并得到化合物7。結果側鏈中的羥基與Dess-Martin-Periodinane發生選擇性氧化反應，得到醛8(方法步驟g)，其作為通過還原胺化在側鏈中引入硫代嗎啉基團的中間體。為此目的，可以使用不同的還原劑如硼氫化鈉或三(乙酰氧基)硼氫化物。還原胺化后，在LiAlH4的還原條件下在同一容器處理中將3-苯甲酸酯去保護(方法步驟h)。結果得到本發明的甾族化合物I。在方法步驟d)中代替形成苯甲酸酯可以將另外的保護酰基如乙酰基引入。如果立即形成乙酸酯而不是苯甲酸酯，方法步驟f)中的羥基去保護不僅發生在側鏈還發生在C3位。在這種情況下，相應的醛的選擇性氧化必須小心進行以防止C3位的羥基氧化。如果方法步驟d)中形成苯甲酸酯，只有側鏈中的羥基發生氧化。由于方法步驟d)后所得到的產物開始結晶，如果使用苯甲酸酯保護基團，中間體8的純化可能更簡單。這還能夠減少純化步驟。因此優選形成苯甲酸酯。關于合成C4位沒有甲基和/或甾體骨架中有另一個雙鍵模式的甾族化合物的方法參見WO02/079220A2，其相關的公開內容引入本文作為參考。以下給出實施例以更詳細地描述本發明。實施例1(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)a)(20S)-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-4-烯-3-酮(方法步驟a)在室溫下，向30g(20S)-20-[(羥甲基)-孕-4-烯-3-酮和13.5g咪唑在300ml二氯甲烷中的溶液中滴加26ml的三異丙基甲硅烷基氯。將反應混合物在相同的溫度下攪拌20小時，然后傾倒入水中。用乙酸乙酯萃取水層。合并有機層，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發，得到45.4g粗制(20S)-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-4-烯-3-酮，為棕色油狀物，使用時未進一步純化。MS(C1+)487(M+H)b)(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3-酮(方法步驟b)在50℃的溫度下，將45.4g粗制(20S)-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-4-烯-3-酮在320ml四氫呋喃中的溶液加入42.3g叔丁基鉀在950ml叔丁醇的溶液中。將混合物在相同的溫度下攪拌10分鐘。然后加入50ml甲基碘，繼續攪拌1小時。將反應混合物傾倒入水中，用乙酸乙酯萃取。合并有機層，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發。殘余物經柱色譜純化，得到27.3g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3-酮，為淡黃色固體。MS(C1+)515(M+H)c)(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇(方法步驟c)在室溫下，向27.3g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3-酮在500ml四氫呋喃中的溶液中小心分批加入1.24g氫化鋁鋰。將反應混合物攪拌1小時，然后冷卻至0℃。依次加入2.5ml水、2.5ml1N氫氧化鈉溶液和7.5ml水。將混合物通過硅藻土(celite)過濾。減壓蒸發濾液。殘余物經柱色譜法純化，得到18.2g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇，為淡黃色固體。MS(C1+)517(M+H)d)(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇乙酸酯(方法步驟d)在室溫下，向18.2g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇在175ml吡啶中的溶液中加入6.24ml乙酸酐。將反應混合物攪拌20小時，然后傾倒入冰/鹽酸的混合物中，用乙酸乙酯萃取。合并有機層，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發，得到16.2g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3-醇乙酸酯，為白色固體，使用時未進一步純化。MS(C1+)559(M+H)e)(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5，7-二烯-3β-醇乙酸酯(方法步驟e)在70℃下，向16.2g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇乙酸酯在100ml苯和100ml己烷的混合物中的溶液中分批加入4.93g1，3-二溴-5，5-二甲基-乙內酰脲。30分鐘后將混合物冷卻至0℃，過濾。真空蒸發濾液。向所得殘余物中加入160ml甲苯和7.8ml2，4，6-三甲基吡啶。將混合物回流2.5小時。冷卻后，用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌反應混合物。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，并真空蒸發。殘余物經柱色譜法純化，得到12.5g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5，7-二烯-3β-醇乙酸酯，為白色固體。MS(C1+)557(M+H)f)(20S)-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-3β，21-二醇(方法步驟f)將16.1g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5，7-二烯-3β-醇乙酸酯、210ml乙醇、28ml苯和28ml濃鹽酸的混合物回流6小時。冷卻后，將混合物傾倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并減壓濃縮。殘余物從二氯甲烷和甲醇中重結晶，得到4.48g(20S)-21-羥基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-3β-醇MS(E1+)358(M)g)(20S)-3β-羥基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醛(方法步驟g)在室溫下，向1g(20S)-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-3β，21-二醇在10ml二氯甲烷中的溶液中加入5.4ml0.5MDess-Martin-Periodinane溶液。將混合物攪拌1小時，傾倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并減壓濃縮。殘余物經柱色譜純化后，得到230mg(20S)-3β-羥基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醛，為白色固體。MS(EI+)356(M)h)(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(方法步驟h)在室溫下，將38mg三(乙酰氧基)硼氫化鈉加入42mg(20S)-3β-羥基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醛和20μl硫代嗎啉在3ml四氫呋喃中的溶液中。將混合物攪拌2小時，傾倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并減壓濃縮。殘余物經柱色譜純化后，得到15mg(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇，為白色固體。MS(E1+)443(M)NMR譜與其結構一致。X射線結構分析也證實了該結構。實施例2根據反應路線1圖1的反應重復實施例1的反應，制備中間體化合物5、6、7和8的苯甲酸酯類似物。為此目的，將幾個方法步驟中的反應條件作如下修改方法步驟a)TIPSCI、咪唑、CH2Cl2，室溫，4小時反應時間方法步驟b)叔丁基鉀、甲基碘、叔丁醇，室溫，30分鐘反應時間方法步驟c)LiAlH4、四氫呋喃，室溫，30分鐘反應時間方法步驟d)苯甲酰氯、吡啶，0℃，1小時反應時間；結晶；4步52％方法步驟e)1，3-二溴-5，5-二甲基-咪唑烷-2，4-二酮、苯、己烷，70℃，30分鐘反應時間；然后2，4，6-三甲基吡啶、甲苯、回流，2小時反應時間方法步驟f)HCl、乙醇，回流，4小時反應時間，色譜，2步70％方法步驟g)Dess-Martin-Periodinane、CH2Cl2，室溫方法步驟h)硫代嗎啉、NaBH(OAc)3、四氫呋喃，室溫，6小時反應時間；然后與LiAlH4反應，室溫；18小時反應時間，色譜，乙醇(2x)結晶，收率2步19％，并純化(純度＞93％)。這一反應順序的總收率計算為8步6.9％。本文以下詳細描述反應順序和反應條件a-d)(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇苯甲酸酯(化合物5，參見路線圖1)(方法步驟a、b、c、d)該化合物的合成與實施例1方法步驟a、b、c、d中描述的乙酸酯路線類似，其描述也見于OrganicLetters，5，1837-1839(2003)。苯甲酰化后僅進行一步結晶作為純化步驟。步驟a、b、c、d的總收率是52％。e)(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5，7-二烯-3β-醇苯甲酸酯(化合物6，參見路線圖1)(方法步驟e)在70℃下，向30.0g(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基甲硅烷基)氧基)甲基]-孕-5-烯-3β-醇苯甲酸酯在160ml苯和160ml己烷的混合物中的溶液中分批加入9.81g1，3-二溴-5，5-二甲基-乙內酰脲。30分鐘后將混合物冷卻至0℃并過濾。真空蒸發濾液。向所得殘余物中加入280ml甲苯和12.7ml2，4，6-三甲基吡啶。將混合物回流2.5小時。冷卻后用0.5N鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌反應混合物。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并真空蒸發，得到31.8g粗制(20S)-4，4-二甲基-20-[((三異丙基)氧基)甲基]-孕-5，7-二烯-3β-醇苯甲酸酯，使用時未進一步純化。f)(20S)-3β-苯甲酰氧基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醇(化合物7，參見路線圖1)(方法步驟f)將31.8g(20S)-4，4-二甲基-20-[(三異丙基)氧基]甲基]-孕-5，7-二烯-3β-醇苯甲酸酯、467ml乙醇、67ml苯和67ml濃鹽酸的混合物回流5小時。冷卻后將混合物傾倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，用二氯甲烷萃取，用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并減壓濃縮。殘余物經柱色譜法純化后，得到15.7g(20S)-3β-苯甲酰氧基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醇。g)(20S)-3β-苯甲酰氧基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醛(化合物8，參見路線圖1)(方法步驟g)在0℃下，向17.6g(20S)-3β-苯甲酰氧基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醇在470ml四氫呋哺和4.1ml吡啶中的溶液中加入17.3mlDess-MartinPeriodinane。將混合物攪拌30分鐘，暖至室溫，傾倒入pH為7的檸檬酸鹽緩沖液中，用二氯甲烷萃取，用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并減壓濃縮，得到17.6g粗制(20S)-3β-苯甲酰氧基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醛，使用時未進一步純化。h)(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物I，參見路線圖1)(方法步驟h)在室溫下，將3.9g三(乙酰氧基)硼氫化鈉加入8.8g粗制(20S)-3β-苯甲酰氧基-4，4，20-三甲基-孕-8，14-二烯-21-醛和2.7ml硫代嗎啉在400ml四氫呋喃中的溶液中。將混合物攪拌2小時，然后分批加入10.56g氫化鋁鋰，用NaOH和水終止反應，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并減壓濃縮。殘余物經柱色譜和從乙醇中兩次連續結晶來純化，得到1.67g(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4，-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇，為白色固體(1.43g+0.24g，兩次結晶獲得的產物)。所有的化合物都經1H-NMR和MS表征。經X射線結構分析最終證明(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)的結構。化學和理化特征以及制劑(溶解度)可以證明引入含氮側鏈增加所述化合物在水中的溶解度(濁度法測量)。發現FF-MAS在水中的溶解度只有＜0.1％mg/l。測量(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)在水中溶解度為～4mg/l。卵母細胞體外成熟和受精(生物測試體系)a)卵丘包裹的卵母細胞測定測試的詳細描述MI停止的卵母細胞的激活可通過生發泡(GV)的消失來評價。稱為生發泡破裂(GVB)的GV的消失后，排出第一個極體(PB)(C.Grndahl，J.L.Ottesen，M.Lessl，P.Faarup，A.Murray，FCGrnvald，C.Hegele-Hartung，I.Ahnfelt-Rnne，″Meiosis-activatingsterolpromotesresumptionofmeiosisinmouseoocytesculturedinvitroincontrasttorelatedoxysterols″，Biol.Reprod.，58，1297-1302(1998)；C.Hegele-Hartung，J.Kuhnke，M.Lessl，C.Grndahl，J.Ottesen，H.M.Beier，S.Eisner，U.Eichenlaub-Ritter，″Nuclearcytoplasmicmaturationofmouseoocytesaftertreatmentwithsyntheticmeiosis-activatingsterolinvitro″，Biol.Reprod.，61，1362-1372(1999))。從體重為13-16克的未成熟雌性小鼠(C57BL/6J×DBA/2JF1)獲得卵丘包裹的卵母細胞(CEO)，這些小鼠在控制的溫度(20-22℃)、光照(燈光06:00-18:00)和相對濕度(50-70％)下飼養。小鼠接受腹膜內注射含20IUFSH的0.2ml促性腺激素。48小時后用頸脫臼處死動物。解剖取出卵巢，在Hx-培養基(見下)中在立體顯微鏡下用一副27號針手工破裂卵泡分離卵母細胞。將顯示具有完整生發泡的卵丘包裹的卵母細胞置于α-極限必需培養基(不含核糖核苷的α-MEM，補充有8mg/ml人血清白蛋白(HSA)、0.23mM丙酮酸、2mM谷氨酰胺、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素)中。為使卵母細胞維持在生發泡期，在培養基中補充3mM次黃嘌呤，稱為Hx-培養基。從溶解在乙醇中的含1mg/ml的儲備液制備(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)稀釋液。向對照物中加入乙醇(3.8μl/ml)不影響對照水平。將CEO(35-45CEO，在0.4mlHx-培養基中)在37℃下于含5％CO2空氣的濕潤氣氛中培養24小時。對照孔(相同培養基而不加受試化合物)總是與測試孔同時培養。培養期結束時分別計數有生發泡(GV)、生發泡破裂(GVB)和有極體(PB)的CEO數。％GVB定義為正在進行GVB的CEO數占該孔CEO總數的百分比，計算方法為％GVB＝(GVB數+PB數/CEO總數)×100％PB定義為顯示排出一個極體的CEO數占該孔CEO總數的百分比。結果圖2表示通過GVB和PB(n＝5；*p＜0.05)監測的(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)對CEO減數分裂的激活。新化合物IA在1μM(p＜0.01；n＝10)、3μM(p＜0.05；n＝7)和10μM(p＜0.001；n＝6)時顯著增強減數分裂的激活。用其它新化合物重復相同實驗IB(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8(14)-烯-3β-醇IC(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇ID(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-孕-5，7-二烯-3β-醇，和IE(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-5α-孕-8(14)-烯-3β-醇。在次黃嘌呤(Hx)存在下的CEO減數分裂激活的結果顯示在表1中。對于每個化合物進行兩次實驗，將結果與作為對照的Hx-培養基和濃度為10μM的FF-MAS相比較。此外，還使用化合物IE測定了在Hx存在下CEO減數分裂激活的濃度依賴性，化合物IE是除了化合物IA之外最有效的受試化合物。與Hx-培養基、FF-MAS和(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(WO02/079220A2中公開的2號化合物)相比較的減數分裂激活的濃度依賴性顯示在表2中。b)體外受精(IVF)為研究(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)對IVF率的影響，使CEO在新化合物存在或不存在下體外成熟，然后進行IVF。FF-MAS和(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(WO02/079220A2公開的2號化合物)作為對照化合物。由于臨床處置中的體外成熟培養基將不含有次黃嘌呤，所以該新化合物未在任何培養基中使用，其因自發的減數分裂成熟導致卵母細胞幾乎100％的減數分裂激活。因此隨后的IVF的變化可能是由于受試化合物對胞漿成熟的作用。年齡為21-24天的未成熟雌性小鼠(C57BL/6J×DBA/2JF1)作為卵母細胞供者。動物皮下注射10IU孕馬血清促性腺激素(PMSG)以誘導卵泡生長。48小時后通過頸脫臼處死動物，解剖取出卵巢。用8周的雄性小鼠(C57BL/6J×DBA/2JF1)作為精子供者。通過用一副27號針手工破裂卵泡從卵巢中分離出卵母細胞。選出顯示完整GV的球形裸卵母細胞(NkO)和CEO并置于補充有8mg/ml人血清白蛋白(HSA)、0.23mM丙酮酸、2mM谷氨酰胺、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的α-極限必需培養基(不含核糖核苷的α-MEM，GibcoBRL，Gaithersburg；Cat.No.22561)。將卵母細胞在含有0.4ml各自的卵母細胞培養基的4孔培養皿中在培養基中洗滌三次，不覆蓋油層。在37℃下5％CO2空氣的濕潤氣氛中在(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(化合物IA)、FF-MAS和(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(后兩者是對比化合物)存在下培養卵母細胞。卵母細胞培養基中補充有6.4％胎牛血清(FBS)。新化合物IA和提及的兩個對比化合物的溶液從含有1mg/ml溶于無水乙醇中的化合物的儲備液來制備。對照組與相應量的乙醇一起培養。18-19小時的培養時間后，將卵母細胞進一步處理以進行體外受精。只有顯示GVB或PB的卵母細胞定義為“體外成熟的卵母細胞”。不用受試化合物將卵母細胞簡單地洗滌，然后轉移至預先準備好的授精皿中，其中每500μl培養基中含有約600000個獲能精子(從雄性小鼠的附睪中獲得)。然后將培養皿在37℃和確定的氣體條件(含5％CO2的空氣)下，在上述用于卵母細胞成熟的補充有8mg/mlHAS、0.23mM丙酮酸、100IU青霉素/ml和100μg鏈霉素/ml的改良α-MEM中培養。授精22-24小時后檢查卵母細胞以檢查受精情況并記錄前核(PN)的數和2細胞期胚胎的數。受精率由到達PN或2-細胞胚胎期的卵母細胞數相對于授精的總數來確定。結果圖3表示新化合物IA和兩個提及的化合物(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(2號化合物)或FF-MAS組與載體對照組相比具有更高的小鼠卵母細胞受精率(*p＜0.05；***p＜0.001；n＝18)。圖3a給出了占實驗中使用的卵母細胞總數(每個實驗每組中大約每組100個卵母細胞)的百分比的值。圖3b給出了根據載體組標準化的作為刺激因子的數據。再轉移實驗體外受精根據以上IVF實驗中所述的進行。再轉移前一天，使處于動情前期周期狀態的雌性受者小鼠(代孕母親)與切除輸精管的雄性小鼠交配以引起假孕。一天后進行陰道檢查。具有陽性無精陰道栓的動物(交配成功)進入實驗。該日定為妊娠第0日(＝無菌交配后第0日，p.c.第0日)。無菌交配后第0日在麻醉下將18個2細胞胚胎轉移至代孕母親的右側輸卵管中。對側輸卵管保留不用(檢查假孕)。妊娠第19日處死代孕母親。取出胚胎并檢查。立即取出卵巢和子宮，記錄植入位點、成活胎兒、死亡胎兒以及再吸收的數。將顯然未妊娠的子宮置于10％硫化銨水溶液中約10分鐘將子宮內膜中可能的植入位點染色。將每個成活胎兒分別稱重，并通檢查性腺確定其性別。在生育力試驗中，將269只小鼠隨機分為6組，并植入7-10個體外受精卵。體外受精在載體(第1組)或物質(第2至6組)存在下進行。各組如表3中所示分配。主要感興趣的是與載體對照相比所述物質的提高生育力的能力。另外，還研究了與物質FF-MAS相比的提高。主要感興趣的變量是植入點數和成活胎兒數。方法必須認為植入點和成活胎兒的數據具有二態特征，即它可以速率或以在轉移卵的數方面成功和失敗的數來表示。因此，D.Collett″ModellingBinaryData″，2ndedition，Chapman&Hall/CRC，BocaRaton描述的方法是數據分析的適宜方法。由于一組的成功比值與另一組的成功比值相比適于解釋這些數據，因此該分析集中于比值比的計算。一組與另一組相比的比值比定義為比值比(第1組，第2組)＝or1，2＝比值(第1組)/比值(第2組)其中組的比值可以用該組的失敗數除成功數來估算。為表述任何實驗結果的顯著性，比值比的95％置信區間的計算如下[exp(log(or1，2)/1.96·se(log(or1，2)))；exp(log(or1，2)+1.96·se(log(or1，2)))]其中se(log(or1，2))是log比值比的標準誤(相應公式參見D.Collett(2003))。如果下置信限大于1，則可以說一組的比值顯著高于另一組的比值。與載體對照的比較計算所有組的成功數(即植入點數和成活胎兒數)和失敗數(即轉移卵數減去植入點數或成活胎兒數)作為計算比值比的基礎。表4顯示這些數和六組所得的比值。五組與載體對照相比的比值比和它們的置信區間顯示在表5中。對于植入點數，化合物IA的兩種劑量都顯示比值的顯著增加。這一新化合物在1μM時使成功植入的比值增加了51％，而在10μM時導致55％的更高的成功植入的機會。FF-MAS和2號化合物((20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇)都沒有顯示比值的顯著增加。較低劑量的化合物IA使成活胎兒的成功比值增加了70％。其它組與載體對照相比均未顯示顯著性差異。與FF-MAS的比較第3-6組與FF-MAS(第2組)比較的比值比以及它們置信區間顯示在表6中。由于所有的置信區間都包括值1，所以在四種物質組和FF-MAS之間不能得出顯著性差異的結論。圖4表示每個轉移的2細胞胚胎的植入率，其在用FF-MAS(10μM)與1μM和10μM的新化合物IA處理的情況中達到更高的數。存活幼崽數顯示在圖5中。用FF-MAS和新化合物IA(1μM和10μM)處理后再次記錄存活幼崽數。每組的妊娠率顯示在圖6中。引人注意地，新化合物IA在濃度為0.1μM時已經對2細胞和胚泡率顯示了有益的作用，在濃度為1μM時這一作用趨于更高。應理解本文描述的實施例和實施方案只是為舉例說明的目的，根據其的各種修改和變化以及本申請中描述的特征的組合對于本領域技術人員來說是顯而易見的并包括在所述發明的精神和范圍內以及所附的權利要求的范圍內。本文引用的全部出版物、專利和專利申請在此引入本文作為參考。表1在Hx存在下CEO減數分裂的激活表2在Hx存在下CEO減數分裂的激活*)(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇表3*)(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇表4每組成功數、失敗數和比值*)(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇表5與載體對照相比的比值比和置信限*)(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇表6與FF-MAS相比的比值比和置信限*)(20S)-20-[(哌啶-1-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇權利要求1.通式I的硫代嗎啉代甾族化合物其中在化合物I的I’部分中C5和C6之間、C6和C7之間、C7和C8之間、C8和C9之間、C8和C14之間、C14和C15之間的每個鍵獨立地是單鍵或雙鍵，這些鍵至少有一個是雙鍵，條件是在該甾體骨架中沒有C5和C6之間的唯一雙鍵，且其中R4和R4’獨立地選自氫和甲基。2.根據權利要求1的甾族化合物，其中通式I’的部分中C8和C14之間存在一個雙鍵，或者C8和C9之間及C14和C15之間存在兩個雙鍵，或者C5和C6之間及C7和C8之間存在兩個雙鍵。3.根據權利要求1和2之任一項的甾族化合物，其選自(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8(14)-烯-3β-醇(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-孕-5，7-二烯-3β-醇(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-5α-孕-8(14)-烯-3β-醇4.一種藥物組合物，其含有至少一種權利要求1-3之任一項的通式I的硫代嗎啉代甾族化合物和至少一種藥學可接受的賦形劑。5.根據權利要求4的藥物組合物，其中所述通式I的甾族化合物以有效量被包含。6.根據權利要求1-3之任一項的通式I的硫代嗎啉代甾族化合物用于制備用于調節生殖特別是減數分裂的藥物組合物的用途。7.根據權利要求6的用途，用于非體內使用。8.根據權利要求1-3之任一項的通式I的硫代嗎啉代甾族化合物用于制備避孕藥或促生育藥物的用途。9.一種調節生殖特別是減數分裂的方法，其包括給予需要這種調節的個體有效量的至少一種根據權利要求1-3之任一項的通式I的硫代嗎啉代甾族化合物。10.一種提高卵母細胞發育成為哺乳動物的可能性的方法，其包括使從哺乳動物中取出的卵母細胞與權利要求1-3之任一項的硫代嗎啉代甾族化合物接觸。11.一種制備(20S)-20-[(硫代嗎啉-4-基)甲基]-4，4-二甲基-5α-孕-8，14-二烯-3β-醇的方法，其包括a)從(20S)-20-羥甲基-孕-4-烯-3-酮開始；b)通過烷基化在C4上引入兩個烷基；c)將酮基還原為羥基；d)用酰基保護所得的羥基；e)通過溴化/脫去溴化氫引入Δ7雙鍵；f)通過在酸存在下加熱使二烯Δ5，7異構化為二烯Δ8，14；g)將17-羥基氧化為醛基；h)用硫代嗎啉將醛基還原胺化，并通過還原反應除去酰基。12.根據權利要求11的方法，其中所述酰基是苯甲酸酯基團。全文摘要本發明涉及通式(I)的硫代嗎啉代甾族化合物，其可以有利地用于刺激人卵母細胞的減數分裂，該甾族化合物的特定特征是通過亞烷基間隔基連接于該甾體骨架的C文檔編號A61P15/08GK1829731SQ200480021569公開日2006年9月6日申請日期2004年7月13日優先權日2003年7月28日發明者托爾斯滕·布盧姆,伯恩哈德·林登塔爾,凱特加·普雷萊,米夏埃勒·彼得斯－科蒂格申請人:舍林股份公司