專利名稱：用于改善毛發(fā)生長的包含可溶于非極性溶劑的斑蝥提取物作為活性成分的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種刺激毛發(fā)生長的組合物，其包含作為活性成分的斑蝥的非極性溶劑提取級分。
背景技術(shù)：
已知脫發(fā)，即毛發(fā)損失的原因包括遺傳因素、雄性激素睪酮分泌過多、皮脂分泌過多、毛囊中的血流減少、應(yīng)激、飲食、空氣污染、毛發(fā)條件等。迄今，開發(fā)的毛發(fā)損失預(yù)防劑的代表藥物是非那司提(美國專利5,547,957)。它是2，5α-還原酶的特異性抑制劑，2，5α-還原酶為使雄性激素睪酮(androgenic testosterone)代謝成二氫睪酮(DHT)的酶，二氫睪酮為雄激素性脫發(fā)的主要原因。該化合物已由Merck Co.U.S.A.以商品名“PROPECIA”商品化，并已獲得美國FDA批準(zhǔn)。然而，為了保持毛發(fā)損失治療的效果，必須連續(xù)服用該片劑。而且，孕婦不能施用PROPECIA，因?yàn)橛锌赡芪铡Ｍ瑫r(shí)，在PROPECIA的臨床研究中，已報(bào)道當(dāng)男性長期使用其時(shí)，會經(jīng)歷一些性的副作用，例如對性的渴望變少、勃起功能障礙或精液量減少。
最初，米諾地爾為引入用于治療高血壓的直接血管擴(kuò)張劑。在發(fā)現(xiàn)米諾地爾具有毛發(fā)生長的副作用后，其局部用溶液劑已作為毛發(fā)損失治療劑商品化(韓國專利10-2003-0020446，美國專利4,596,812；4,139,619)。已知米諾地爾在生長新的毛發(fā)中的功效歸于復(fù)雜的藥物機(jī)理。米諾地爾為美國FDA批準(zhǔn)的用于刺激毛發(fā)生長的唯一局部用藥物，但是具有例如皮膚刺激、癢、發(fā)紅、毛發(fā)損失的加重等副作用。同樣，為了保持其毛發(fā)生長效應(yīng)，該藥物必須連續(xù)使用。
斑蝥(cantharis)為亮綠色軟體斑蝥(blister beetle)——一種芫菁科的甲蟲，其包括Epicauta gorhami Marseue、Lytta vesicaforia Latreille、Mylabris cichorii Linne和Mylabris phalerata Pallas等。術(shù)語斑蝥也被應(yīng)用到有毒的粉末狀甲蟲制劑，所述制劑用作利尿藥、對抗刺激劑和催欲劑，包含斑蝥素及少量脂質(zhì)和芳香劑。因?yàn)樵诳诜o藥后斑蝥誘導(dǎo)非常高的毒性，因此，它通常僅局部施用用于有限的用途。它被用于皮膚血瘀斑或滲血(Herbology，pp 646-647，Young Lim Publishing Company，Korea出版于1991年)。
韓國專利Laid-Open公布2003-0070780公開了一種草藥組合物，其包含包括斑蝥在內(nèi)的幾種草藥，并公開了基于其的抗炎硬膏劑。韓國專利Laid-Open公布1995-0007864公開了一種泡沫溶液和一種治療方法，所述泡沫溶液是通過共同研磨斑蝥與三種草藥，用醇提取它們并過濾醇溶液來制備的，所述治療方法為其中將所述泡沫溶液用于穴位以形成水皰，然后從所述水皰中除去有毒滲出物。
在日本專利Laid-Open公布2561116中介紹了一種由14種草藥組分制成的生發(fā)油。斑蝥被包含于該生發(fā)油中。然而，其可誘導(dǎo)副作用例如皮膚刺激，甚至形成痂，因?yàn)楫?dāng)施用到皮膚上時(shí)，斑蝥也具有嚴(yán)重的毒性。
為完成本發(fā)明，本發(fā)明人對毛發(fā)生長進(jìn)行了深入細(xì)致和徹底的研究，用不同溶劑中的斑蝥提取級分篩選藥理學(xué)活性和皮膚毒性后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，斑蝥在己烷和非極性有機(jī)溶劑中的提取級分對毛發(fā)生長具有極好的刺激活性，而對皮膚具有低刺激。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種基于斑蝥的可溶于非極性溶劑的提取級分的組合物，其具有極好的毛發(fā)生長刺激活性和對皮膚低的副作用。
技術(shù)方案根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，(提供了)用于刺激毛發(fā)生長的組合物，其包含作為有效成份的斑蝥的可溶于非極性溶劑的提取級分。在本發(fā)明中有用的斑蝥選自Epicauta gorhami Marseue、Lytta vesicaforia Latreille、Mylabris cichorii Linne、Mylabris phalerata Pallas等及其組合。
用于提取斑蝥的非極性溶劑選自己烷、丙酮、氯仿、二氯甲烷和乙酸乙酯，優(yōu)選己烷。
優(yōu)選地，基于100重量份的組合物，用非極性溶劑提取的斑蝥提取物的含量為0.001至10重量份。
在提取前，使用常規(guī)方法干燥斑蝥。根據(jù)典型的方法在有機(jī)溶劑中提取干燥的斑蝥或其粉末。
包含在本發(fā)明的組合物中的斑蝥的可溶于非極性溶劑的提取級分可通過下述方法制備(1)細(xì)碎地切割或研磨干燥的斑蝥，(2)用約2至30重量份的水、具有一至四個(gè)碳原子的低級醇或其組合提取其一次或數(shù)次，使用冷沉淀、超聲粉碎或回流冷卻，然后過濾、真空濃縮或干燥該提取物以得到粗提物，并(3)將所述粗提物在水中的懸浮液加入到約1至20體積的非極性溶劑中，將其分級分離(fractioning)一次至五次，在真空壓力下濃縮各級分。任選地，還可進(jìn)行典型的分級分離過程。
當(dāng)評價(jià)對毛發(fā)生長和皮膚的效應(yīng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)在該方法中制備的斑蝥的可溶于非極性溶劑的提取級分具有極好的毛發(fā)生長刺激活性，而皮膚刺激極小。
特別地，斑蝥的可溶于己烷的提取級分顯示出最優(yōu)的毛發(fā)生長刺激效應(yīng)。用像己烷的有機(jī)溶劑例如丙酮、氯仿、二氯甲烷和乙酸乙酯提取的提取級分也高度刺激毛發(fā)生長和誘導(dǎo)較小的皮膚刺激。
正如根據(jù)本發(fā)明用于刺激毛發(fā)生長的組合物組分可使用斑蝥的可溶于非極性溶劑的提取級分及其他成分制備。那些是當(dāng)將其局部施用于頭皮上時(shí)可改善毛發(fā)生長的毛發(fā)生長刺激劑或成分，或具有不同于上述成分的功能的任何其他有效成分。
根據(jù)本發(fā)明用于刺激毛發(fā)生長的組合物可被配制用作醫(yī)藥或非醫(yī)藥供應(yīng)品或化妝品。
優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明用于刺激毛發(fā)生長的組合物可被配制成局部用的劑型，其包括醫(yī)藥或非醫(yī)藥供應(yīng)品和化妝品，所述醫(yī)藥或非醫(yī)藥供應(yīng)品例如液體、洗劑、乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑、氣霧劑等，所述化妝品例如洗發(fā)劑、洗發(fā)香波和沖洗劑、生發(fā)油、發(fā)乳、發(fā)油、噴霧劑等。
為了制備根據(jù)本發(fā)明的用于刺激毛發(fā)生長的組合物，有效組分可與在供外用的醫(yī)藥或非醫(yī)藥供應(yīng)品或化妝品中使用的常規(guī)添加劑一起配制。詳細(xì)地，可使用溶劑例如水、有機(jī)溶劑、混合溶劑、多種溶液、增溶劑、表面活性劑、滲透促進(jìn)劑、增濕劑、增稠劑、pH調(diào)節(jié)劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、著色劑、香料等。
優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的刺激毛發(fā)生長的組合物直接涂敷或噴霧在頭皮上。
本發(fā)明組合物的劑量可根據(jù)個(gè)體的情況例如年齡、毛發(fā)損失階段等以及處方而改變。通常，可將適宜量的組合物施用在頭皮上，每天一次或數(shù)次，持續(xù)一周至數(shù)月。
實(shí)施本發(fā)明的最佳方式根據(jù)下述實(shí)施例可更好地理解本發(fā)明，提出所述實(shí)施例是為了闡述，而不應(yīng)解釋為限制本發(fā)明。
實(shí)施例用于刺激毛發(fā)生長的組合物1)斑蝥的可溶于己烷的提取級分的制備過濾在2升甲醇中冷沉淀300g斑蝥48小時(shí)得到的溶液，減壓濃縮。重復(fù)該過程三次。得到約30g斑蝥粗提物。用300的己烷將在300純水中的斑蝥粗提物懸浮液分級分離三次，在減壓下濃縮可溶于己烷的級分。得到約13g的斑蝥的可溶于己烷的油狀提取級分。
2)供外用的刺激毛發(fā)生長的組合物的制備將在實(shí)施例1)中制備的斑蝥的可溶于己烷的提取級分溶解在40％乙醇和Lauroglycol FCC(Gateffosse，F(xiàn)rance)(9∶1)的混合物中以得到供外用的3％的組合物。如下評價(jià)其藥理學(xué)活性和皮膚刺激。將純水用作對照。將含有5％米諾地爾的Minoxyl溶液(Hyundai Pharm.Ind.Co.，Korea)用作參照1，將實(shí)施例1)的粗斑蝥提取物在純水中的1％的溶液作為參照2。
2-1)毛發(fā)生長使用C57BL/6小鼠測定在實(shí)施例2中制備的組合物的毛發(fā)生長活性。
在購買4周齡小鼠并使其適應(yīng)無菌動物實(shí)驗(yàn)室2周后，除去小鼠背部的毛發(fā)，使小鼠穩(wěn)定一天。每個(gè)試驗(yàn)組使用8只小鼠。
從毛發(fā)被除去后的第二天直至毛發(fā)產(chǎn)生的時(shí)間作為從過渡期至毛發(fā)生長期進(jìn)行的對照組毛發(fā)生長周期，以200的劑量一天一次地將根據(jù)本發(fā)明的組合物、對照和參照施用于小鼠的除去毛發(fā)的背部。
用數(shù)字照相機(jī)對小鼠背部毛發(fā)除去區(qū)域和毛發(fā)生長區(qū)域照相。使用圖像分析程序(Image-pro Express 4.5，Mediacybemetics Co.，U.S.A.)數(shù)字化照片中的區(qū)域。毛發(fā)生長比例被計(jì)算為毛發(fā)生長區(qū)域與毛發(fā)除去區(qū)域的百分比。將結(jié)果列在下文表1中。
2-2)皮膚刺激使用C57BL/6小鼠測定由實(shí)施例2中制備的組合物引起的皮膚刺激。
利用在實(shí)施例2-1)中相同的方法施用樣品。在施用后第4天，如下評價(jià)皮膚刺激的程度0；無刺激，1；輕微紅斑，2；紅斑，3；輕微的痂，和4；痂。將結(jié)果列在下文表1中。
正如從表1的數(shù)據(jù)顯而易見的是，本發(fā)明組合物的毛發(fā)生長活性是極好的。其毛發(fā)生長比例比參照1的米諾地爾的兩倍還高。然而，與對照組相比，其在皮膚刺激方面沒有顯示出任何顯著性差異。
與米諾地爾相比，參照2的斑蝥粗提物也產(chǎn)生極好的毛發(fā)生長比例。但是，其誘導(dǎo)了嚴(yán)重的皮膚刺激，例如痂形成，這使其不適于外用。
表1

*平均值±SD(n＝8)*與參照1有顯著性差異(P＝0.05)與對照有顯著性差異(P＝0.05)本發(fā)明的方案制備實(shí)施例1用于刺激毛發(fā)生長的局部溶液2的制備通過將實(shí)施例1中制備的斑蝥的可溶于己烷的提取級分溶解在40％乙醇中制備2％的外用溶液。
制備實(shí)施例2用于刺激毛發(fā)生長的局部溶液3的制備通過將實(shí)施例1)中制備的斑蝥的可溶于己烷的提取級分溶解在10％Transcutol(Gateffosse，F(xiàn)rance)中制備2％的外用溶液。
制備實(shí)施例3用于刺激毛發(fā)生長的生發(fā)油1的制備斑蝥的可溶于己烷的提取級分 1g乙醇 40樟腦 1g維生素B6 0.2g甘草酸 0.1g生育酚乙酸酯 0.1g
香料 0.2純水 適量至100均勻混合所有的成分并在室溫溶解。
制備實(shí)施例4用于刺激毛發(fā)生長的生發(fā)油2的制備斑蝥的可溶于己烷的提取物級分 1g聚乙二醇4000 50L-薄荷醇 1g甘油 2g香料 0.2聚氧乙烯氫化蓖麻油 0.5純水 適量至100均勻混合所有的成分并在室溫溶解。
工業(yè)實(shí)用性如在上文中描述的，根據(jù)本發(fā)明的用于刺激毛發(fā)生長的組合物可顯示出極好的毛發(fā)生長活性，而皮膚刺激極小。
因此，本發(fā)明的組合物可在藥材、非藥材和化妝品領(lǐng)域中得到用于毛發(fā)生長的多種應(yīng)用。
盡管已公開了用于闡述性目的的本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案，但本領(lǐng)域技術(shù)人員會理解，在不背離如在所附的權(quán)利要求中公開的本發(fā)明的范圍和精神下，各種修飾、增加和取代是可能的。
權(quán)利要求
1.用于刺激毛發(fā)生長的組合物，其包含作為活性成分的用非極性溶劑提取的斑蝥提取級分。
2.如權(quán)利要求1中定義的組合物，其中所述非極性溶劑選自己烷、丙酮、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯及其組合。
3.如權(quán)利要求1中定義的組合物，其中基于100重量份的所述組合物，所述用非極性溶劑提取的斑蝥提取級分的含量為0.001至10重量份。
4.如權(quán)利要求1至3之一定義的組合物，其中所述組合物是供外用的。
5.如權(quán)利要求4中定義的組合物，其中所述組合物被配制用于醫(yī)藥或非醫(yī)藥供應(yīng)品或化妝品。
全文摘要
本文公開了一種刺激毛發(fā)生長的組合物，其包含作為活性成分的斑蝥的可溶于非極性溶劑的提取級分。與常規(guī)組合物相比，所述組合物顯示出極好的毛發(fā)生長活性，而皮膚刺激極小。其可在不同領(lǐng)域中用于毛發(fā)生長，包括醫(yī)藥和非醫(yī)藥供應(yīng)品以及化妝品。
文檔編號A61P17/14GK101090705SQ200680001511
公開日2007年12月19日 申請日期2006年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月20日
發(fā)明者池相哲, 金成庸 申請人:廣東制藥株式會社