專利名稱：：一種巖黃連總堿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種巖黃連總堿的制備方法。技術(shù)背景巖黃連是廣西民間用于治療肝炎的特效秘方中草藥，原植物為罌粟科紫堇屬石生黃堇(CorydalisSaxicolaBunting.)即巖黃連。臨床已上市的劑型為注射劑，屬公認(rèn)治肝良藥。巖黃連注射液有效成分是巖黃連總堿，目前臨床上主要用于治療急性黃疸性肝炎、慢性乙型中、重度肝炎，尤其是黃疸型肝炎，其清除肝細(xì)胞內(nèi)病毒，修復(fù)肝損傷細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞再生及促進(jìn)膽汁排泄之功效已為臨床所公認(rèn)。巖黃連總堿的提取方法一般采用酸水或乙醇提取，但這樣提取的巖黃連總堿含量在20%左右，其中巖黃連堿的含量約2~3%。顯然，這么低的含量對(duì)于制備注射劑將存在許多缺陷，其質(zhì)量不穩(wěn)定，不易保存，常會(huì)出現(xiàn)色澤變深，晶體析出，成分變化等情況。CN03126590.1公開了一種制備巖黃連總堿的方法，其通過將粗提物經(jīng)陽離子樹脂或大孔樹脂，或先經(jīng)生物堿沉淀，再通過氧化鋁吸附柱處理制得。CN200610024364.9公開了一種制備巖黃連總堿的方法，其將粗提物先經(jīng)酸溶解，再通過大孔吸附樹脂柱、用水和乙醇洗脫得到。這兩種方法所得巖黃連總堿的含量高于50%。含量的提高有利于藥物療效和制備藥物制劑，但這兩種方法都要用到樹脂柱，對(duì)工業(yè)化生產(chǎn)來說這不僅要增加設(shè)備成本，還會(huì)延長生產(chǎn)周期。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明公開了一種制備巖黃連總堿的制備方法，本發(fā)明的方法無需特殊的工業(yè)設(shè)備，生產(chǎn)周期短，有利于工業(yè)化大生產(chǎn)。巖黃連總堿粗提物的制備一般包括取巖黃連藥材，用酸水、乙醇或含酸乙醇提取，得巖黃連總堿粗提物。本發(fā)明將巖黃連總堿粗提物經(jīng)反復(fù)酸溶堿沉后即可得到含量大于50%的巖黃連總堿。所述的"反復(fù)"是2以上，因?yàn)樵囼?yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)酸溶堿沉6次后巖黃連總堿的含量提高已不大，考慮到生產(chǎn)成本，優(yōu)選2-6次。因此，本發(fā)明制備無需過樹脂柱即可達(dá)到50%以上含量，大大降低了生產(chǎn)成本。上述用于提取和溶解粗提物的酸優(yōu)選選自鹽酸、硫酸、醋酸或酒石酸。上述用于沉淀的堿優(yōu)選氫氧化鈉、氨水、石灰乳或碳酸鈉。上述乙醇的濃度優(yōu)選30%~95%，為體積百分比。上述酸水或含酸乙醇中酸的濃度優(yōu)選0.5~5%，為體積百分比。上述所述的提取可以用回流、滲漉或浸漬方法提取。提取時(shí)所用溶劑的量優(yōu)選巖黃連藥材重量的10-80倍。在將巖黃連總堿粗提物用酸溶解時(shí)可以選擇攪拌、溫浸、加熱回流等方法，優(yōu)選用加熱回流的方式。在酸水溶解后用堿沉淀時(shí)優(yōu)選用堿調(diào)pH至5~9。在中藥有效部位提取物的制備時(shí)，本領(lǐng)域常用的方法是過大孔樹脂以使提取物得到精制，發(fā)明人在研究巖黃連總堿精提物時(shí)意外發(fā)現(xiàn)，巖黃連總堿粗提物不用大孔樹脂，而是反復(fù)用酸溶水沉即可達(dá)到精制目的，表1中是粗提物經(jīng)酸溶堿沉后含量的變化表1巖黃連總堿粗提物酸溶堿沉次數(shù)與純度、轉(zhuǎn)移率的變化<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>另外，可見，當(dāng)酸溶堿沉兩次以上即可使巖黃連總堿的含量大于50%，酸溶堿沉次數(shù)越多，藥物含量越高。試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，當(dāng)酸溶堿沉6次以上，含量的增加己有限，因此，考慮生產(chǎn)成本，優(yōu)選酸溶堿沉26次。具體實(shí)施方式實(shí)施例1取巖黃連藥材，用藥材重量10倍量的1%鹽酸水溶液浸泡8小時(shí)，回流提取3次，每次加10倍量的上述溶劑，每次1.5小時(shí)，合并提取液，過濾，加堿調(diào)節(jié)PH至67，濃縮至相對(duì)密度1.2，加至相當(dāng)于藥材重量8倍量含1.0%的鹽酸水溶液回流，提取2次，每次1.5h,過濾，酸水液合并，用30%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.06，冷藏24h后，離心，沉淀每次加相當(dāng)于沉淀重量8倍量1.0%的鹽酸溶液回流，提取2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用30%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀每次加相當(dāng)于沉淀重量8倍量的1.0%的鹽酸溶液回流，提取2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用30%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心沉淀60'C減壓干燥，即得巖黃連總堿?？偵飰A的重量含量以巖黃連堿計(jì)為53.35%。實(shí)施例2取巖黃連藥材，用相當(dāng)于藥材重量10倍量0.5%硫酸水溶液浸泡12小時(shí)，再用40倍量的1%鹽酸水溶液滲漉，流速5ml/min，滲漉液加堿調(diào)節(jié)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度1.12，加至相當(dāng)于藥材重量8倍量含0.5%的硫酸水溶液回流，提取2次，每次lh，過濾，酸水液合并，用碳酸鈉調(diào)PH至67，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀每次加相當(dāng)于沉淀重量8倍量0.5%的硫酸溶液回流，提取2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用碳酸鈉溶液調(diào)PH至67，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀如上法重復(fù)2次，再于60'C減壓干燥，即得巖黃連總堿。總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為67.34%。實(shí)施例3取巖黃連藥材，用藥材重量10倍量的2.0%醋酸水溶液浸泡2~12小時(shí)，回流提取3次，每次加IO倍量的上述溶劑，每次1.5小時(shí)，合并提取液，過濾，加堿調(diào)節(jié)PH至78，濃縮至相對(duì)密度1.15,加至相當(dāng)于藥材重量8倍量含2.0%的醋酸水溶液回流，提取2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用碳酸鈉調(diào)PH至78，濃縮至相對(duì)密度至1.06，冷藏24h后，離心，沉淀每次加相當(dāng)于沉淀重量8倍量2.0°/。的醋酸溶液回流，提取2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用碳酸鈉調(diào)PH至78，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀6(TC減壓干燥，即得巖黃連總堿。總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為53.35%。實(shí)施例4取巖黃連藥材，用相當(dāng)于藥材重量8倍量的80%乙醇浸泡12小時(shí)，回流提取3次，每次加8倍量上述溶劑，每次2h，合并提取液，過濾，減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.13，加至相當(dāng)于藥材重量IO倍量的含1%鹽酸水溶液回流，提取2次，每次lh，過濾，酸水液合并，用30n/。氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6-7，濃縮至相對(duì)密度至1.10，濃縮液冷藏24h后，離心，沉淀每次加相當(dāng)于沉淀重量8倍量0.5%的鹽酸溶液回流，提取2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用30%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀6(TC減壓干燥，即得巖黃連總堿。總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為57.67%。實(shí)施例5取巖黃連藥材,用相當(dāng)于藥材重量IO倍量的80%乙醇浸泡12小時(shí)，再用60倍量的80%乙醇滲漉，流速5ml/min，滲漉液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.10，加至相當(dāng)于藥材重量10倍量的含1%硫酸水溶液溫浸提取，共2次，每次lh，過濾，酸水液合并，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至67,濃縮至相對(duì)密度至1.08，濃縮液冷藏24h后，離心，沉淀每次用相當(dāng)于沉淀重量10倍量1.0%的硫酸溶液水浴回流，共3次，每次lh，濾過，酸水液合并，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至67，濃縮至相對(duì)密度至1.07，冷藏24h后，離心，沉淀，沉淀如上法重復(fù)1次，再于6(TC減壓干燥，即得巖黃連總堿。總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為65.78%。實(shí)施例6取巖黃連藥材，用相當(dāng)于藥材重量60倍量的70%乙醇浸漬5天，提取液濾過，減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.12，加至相當(dāng)于藥材重量10倍量的含1.0%硫酸水溶液回流提取，共2次，每次lh，過濾，酸水液合并，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.12，濃縮液冷藏24h后，離心，沉淀每次用相當(dāng)于沉淀重量12倍量的0.5%硫酸水溶液水浴回流，共2次，每次lh，濾過，酸水液合并，用50%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀6(TC減壓干燥，即得巖黃連總堿。總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為59.35%。實(shí)施例7取巖黃連藥材，用相當(dāng)于藥材重量10倍量的含1.0%鹽酸的70%乙醇浸泡12小時(shí)，回流提取3次，每次加10倍量上述溶劑，每次1.5小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液回收乙醇，加堿調(diào)PH至67，濃縮至相對(duì)密度1.11，加至相當(dāng)于藥材重量10倍量的含1.0%鹽酸水溶液回流提取，共3次，每次lh，過濾，酸水液合并，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至I.IO，濃縮液冷藏24h后，離心，沉淀每次用相當(dāng)于沉淀重量12倍量0.5%的鹽酸溶液水浴回流，共2次，每次lh，濾過，酸水液合并，用50%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.06，冷藏24h后，離心，沉淀6(TC減壓干燥，即得巖黃連總堿?？偵飰A的重量含量以巖黃連堿計(jì)為55.14%。實(shí)施例8取巖黃連藥材，用相當(dāng)于藥材重量12倍量的含1.0%鹽酸的60%乙醇浸泡12小時(shí)，再用50倍量的上述溶劑滲漉，流速8ml/min，滲漉液回收乙醇，加堿調(diào)節(jié)PH至67，濃縮至相對(duì)密度I.IO，加至相當(dāng)于藥材重量IO倍量的含1.0%鹽酸水溶液回流提取，共2次，每次lh，過濾，酸水液合并，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.09，濃縮液冷藏24h后，離心，沉淀每次用相當(dāng)于沉淀重量12倍量0.5%的鹽酸溶液回流，共2次，每次1.5h，濾過，酸水液合并，用50%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至6~7，濃縮至相對(duì)密度至1.05，冷藏24h后，離心，沉淀，沉淀如上法重復(fù)3次，再于6(TC減壓干燥，即得巖黃連總堿。得總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為69.77%。實(shí)施例9取巖黃連藥材，用相當(dāng)于藥材重量50倍量含1.5%鹽酸的70%乙醇浸漬5天，提取液濾過，濾液回收乙醇，加堿調(diào)節(jié)PH至6-7，濃縮至相對(duì)密度1.12，加至相當(dāng)于藥材重量10倍量的含1%鹽酸水溶液回流提取，共2次，每次1.5h，過濾，酸水液合并，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至67，濃縮至相對(duì)密度至UO，濃縮液冷藏24h后，離心，沉淀每次用相當(dāng)于沉淀重量12倍量0.5%的鹽酸溶液回流，共2次，每次lh，濾過，酸水液合并，用50%氫氧化鈉溶液調(diào)PH至67，濃縮至相對(duì)密度至1.06，冷藏48h后，離心，沉淀60'C減壓干燥，即得巖黃連總堿。得總生物堿的重量含量以巖黃連堿計(jì)為58.82%。權(quán)利要求1、一種巖黃連總堿的制備方法，其特征是包括下列步驟取巖黃連藥材，用酸水、乙醇或含酸乙醇提取，濃縮得巖黃連總堿粗提物；巖黃連總堿粗提物經(jīng)酸溶解、再用堿沉淀，反復(fù)2～6次后，即得。2、權(quán)利要求l的制備方法，其中所述酸選自鹽酸、硫酸、醋酸或酒石酸。3、權(quán)利要求l的制備方法，其中所述堿選自氫氧化鈉、氨水、石灰乳或碳酸鈉。4、權(quán)利要求l的制備方法，其中乙醇的濃度是30%~99.5%，為體積百分比。5、權(quán)利要求l的制備方法，其中酸水或含酸乙醇中酸的濃度是0.5~5%，為體積百分比。6、權(quán)利要求1的制備方法，其中提取用回流、滲漉或浸漬方法提取。7、權(quán)利要求l的制備方法，其中提取用溶劑的量是巖黃連藥材的10~80倍。8、權(quán)利要求l的制備方法，其中濃縮前用堿調(diào)pH至59。9、權(quán)利要求l的制備方法，其中巖黃連總堿粗提物經(jīng)酸溶解時(shí)用加熱回流溶解。10、權(quán)利要求l的制備方法，其中用堿沉淀時(shí)用堿調(diào)pH至59。全文摘要本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種巖黃連總堿的制備方法。本發(fā)明在制得巖黃連總堿粗提物基礎(chǔ)上，再經(jīng)反復(fù)酸溶堿沉即可得到含量大于50％的巖黃連總堿提取物。文檔編號(hào)A61K36/185GK101229235SQ200810019088公開日2008年7月30日申請(qǐng)日期2008年1月11日優(yōu)先權(quán)日2008年1月11日發(fā)明者俊成,毛春芹,王巧晗,郁紅禮,陸兔林,芳黃申請(qǐng)人:南京弘景醫(yī)藥科技有限公司