專利名稱：：小兒咳喘靈顆粒的質量控制方法
技術領域：
：本發明屬于中藥
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，具體涉及小兒咳喘靈顆粒的質量控制方法。技術背景小兒咳喘靈顆粒適應小兒生理及病理特點，小兒咳喘大多由風熱襲肺或風寒郁而化熱壅遏于肺所致，治以清肺泄熱、止咳化痰、宣肺平喘。小兒咳喘靈顆粒由麻黃、石膏、苦杏仁、瓜蔞、板藍根、金銀花、甘草組成。方中麻黃苦甘溫，宣肺解表平喘；石膏辛甘大寒，清泄肺胃之熱以生津；杏仁味苦，降利肺氣而平喘咳，與麻黃相配則宣降相固，和石膏相配則清肅協同；瓜蔞化痰通腑；金銀花、板藍根疏散風熱、清熱解毒。諸藥合用，療效卓著?，F代藥效學研究證實，麻黃、杏仁抑制咳嗽中樞而鎮咳；石膏具有抗感染作用；金銀花、板藍根具有廣譜抗菌、抗病毒作用，板藍根所含的嘌呤、嘧啶及吲哚類成分，可能有干擾病毒DNA合成作用；甘草鎮咳祛痰，具有激素樣作用，能減輕炎癥反應。因此，小兒咳喘靈顆粒可使癥狀、體征改善快，縮短病程，并可減少抗病毒和抗生素藥物的劑量，延緩耐藥性的產生。小兒咳喘靈為黃棕色的顆粒，氣芳香，味甜、微苦辛，患兒易于接受，解決了小兒服用湯劑難的棘手問題，且療效滿意，無明顯不良反應，便于臨床推廣使用。目前小兒咳喘靈顆粒的處方、制法、功能主治、用法用量、規格以及鑒別如下處方麻黃62.5克金銀花625克苦杏仁312.5克板藍根625克石膏937.5克甘草312.5克瓜蔞312.5克制法以上七味，石膏、苦杏仁、甘草、板藍根、瓜蔞，加10倍量的水煎煮1小時，濾過，藥渣與麻黃、金銀花加10倍量的水煎煮1小時，濾過，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對密度為1.321.35的流浸膏，加乙醇1倍量，攪勻，冷藏1248小時，濾取上清液，回收乙醇，濃縮成相對密度為1.33的稠膏，加入適量的糊精及蔗糖粉制粒，干燥，制成1000克，即得。性狀本品為黃棕色的顆粒；味甜、微苦、辛。功能與主治宣肺、清熱、止咳、祛痰、平喘。用于上呼吸道感染，氣管炎，肺炎，咳嗽等。用法與用量開水沖服，2歲以內一次1克，3至4歲一次1.5克，5至7歲一次2克，一日34次。規格(1)每袋裝10克(2)每袋裝2克鑒別(1)取本品顆粒20克，加氨試液2毫升，加三氯甲烷40毫升，加熱回流l小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液10微升，對照品溶液5微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸-甲醇-濃氨試液(20:5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)取本品顆粒50克，加水200毫升，加氯仿振搖提取3次，每次50毫升，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，加甲醇制成l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液25微升，對照品溶液5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-三氯甲烷-丙酮(5:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。該項目下的氯仿振搖方法容易發生乳化，導致有機相和水相分離不完全，嚴重影響檢測結果，而且發生乳化的提取液中氯仿回收困難，這對環境的保護也存在威脅。此檢測項目下展開劑使用有毒溶劑苯，對藥品的生產和流通領域的監控人員的安全也是一種隱患。(3)取本品顆粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小時，濾過，棄去濾液，藥渣加甲醇60毫升，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化鋁柱G00200目，8克，內徑1.0厘米，干法裝柱)上，先用甲醇80毫升洗脫，棄去洗脫液，再用70%甲醇100毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材l克，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液5微升，對照藥材溶液2微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水(20:25:30:3:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。小兒咳喘靈顆粒的質量標準中沒有金銀花的定性鑒別手段，這也是一個目前存在的不足；而且原此檢測項目下展開劑使用有毒溶劑苯，對藥品的生產和流通領域的監控而言也存在隱患。原標準中氯仿振搖方法容易發生乳化，導致有機相和水相分離不完全，嚴重影響檢測結果，而且發生乳化的提取液中氯仿回收困難，這對環境的保護也存在威脅。
發明內容小兒咳喘靈顆粒的質量標準中沒有金銀花的定性鑒別手段，這也是一個目前存在的不足；而且原此檢測項目下展開劑使用有毒溶劑苯，對藥品的生產和流通領域的監控而言也存在隱患。原標準中氯仿振搖方法容易發生乳化，導致有機相和水相分離不完全，嚴重影響檢測結果，而且發生乳化的提取液中氯仿回收困難，這對環境的保護也存在威脅?；谝陨蠁栴}，本發明的目的在于提供改進的小兒咳喘靈顆粒的質量控制方法。具體而言，本發明的質量控制方法為取本品顆粒2克，加75%乙醇20毫升超聲10分鐘溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加IO毫升甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取對照品綠原酸適量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗,取供試品溶液、對照品溶液各1微升，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以36%醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。上述方法還可以進一歩采用采用以下方法在與靛玉紅對照品比對，制備供試品溶液時，采用回流的方法提取小兒咳喘靈顆粒。上述方法還可以進一步采用采用以下方法取小兒咳喘靈顆粒50克，加水150毫升，加熱使溶解，沿壁緩緩加入氯仿150毫升，置67'C水浴加熱回流2小時，靜置分層，分取氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，加甲醇制成l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法5試驗，吸取上述供試品溶液25微升，對照品溶液5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮按照5:4:l配比展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。上述質量控制方法，還可以進一步采用采用以下方法取小兒咳喘靈顆粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小時，濾過，棄去濾液，藥渣加甲醇60毫升，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸千，殘渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化鋁柱，先用甲醇80毫升洗脫，棄去洗脫液，再用70%甲醇100毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材l克，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5微升，對照藥材溶液2微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以環己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水按照20:25:30:3:3配比展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。本發明的質量控制方法提供小兒咳喘靈顆粒的有關金銀花的定性檢測方法，為這種廣泛用于小兒外感風寒的藥物提供了更加安全有效的鑒定方法，為藥品實際生產、流通領域質量監控和臨床應用提供了有效保障。而且通過將目前的質量控制方法中提取方法和展開劑的改進，為藥品實際生產、流通領域質量監控和臨床應用提供了有效保障。具體實施例方式隨機挑選5個批號的小兒咳喘靈顆粒(批號為:20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)。實驗例l取小兒咳喘靈顆粒不同批號(批號為:20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的顆粒各2克，加75%乙醇20毫升超聲10分鐘溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加10毫升甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取對照品綠原酸適量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，取供試品溶液、對照品溶液各1微升，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以36%醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈365nm下檢視，檢測結果如下:表1小兒咳喘靈顆粒中金銀花的檢測結果批號檢測結果20070910-1供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點20071018-1供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點20071119-1供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點20080108-1供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點20080204-1供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點實驗例21、原質量控制方法的對照實驗取小兒咳喘靈顆粒不同批號(批號為:20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的顆粒50克加水200毫升，加氯仿振搖提取3次，每次50毫升，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，加甲醇制成l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液25微升，對照品溶液5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-三氯甲烷-丙酮(5:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。2、改進質量控制方法的對照實驗取小兒咳喘靈顆粒不同批號(批號為:20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的顆粒50克，加水150毫升，加熱使溶解，沿壁緩緩加入氯仿150毫升，置67'C水浴加熱回流2小時，靜置分層，分取氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，加甲醇制成l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液25微升，對照品溶液5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-三氯甲垸-丙酮按照5:4:l酉己比展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。發明人通過對提取過程是否發生的乳化對比，實驗結果如下表2小兒咳喘靈顆粒質量控制方法中提取方法對照<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>20071018-1乳化，提取液無法分層無乳化，提取液分層完全20071119-1乳化，提取液無法分層無乳化，提取液分層完全20080108-1乳化，提取液無法分層無乳化，提取液分層完全20080204-1乳化，提取液無法分層無乳化，提取液分層完全由此可以看出采用本發明的提取方法后可以完全避免乳化現象的發生，為質量控制方法中的完全提取提供了保障，也避免了由于氯仿分離不完全導致的環境隱患。另外發明人還對供試品對于靛玉紅的比移值進行比對，實驗結果如下表3小兒咳喘靈顆粒質量控制方法中比移值(Rf)對照批號原質量控制方法改進質量控制方法20070910-1Rf=0.41Rf=0.4120071018-1Rf=0.40Rf=0.4020071119-1Rf=0.40Rf=0.4120080108-1Rf=0.41Rf=0.4020080204-1Rf=0.42Rf=0.42采用甲苯替代苯作展開劑組分，對薄層層析的分離沒有影響，比移值沒有顯著變化。實驗例31、原質量控制方法的對照實驗取小兒咳喘靈顆粒不同批號(批號為:20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)取小兒咳喘靈顆粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小時，濾過，棄去濾液，藥渣加甲醇60毫升，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化鋁柱(100200目，8克，內徑1.0厘米，干法裝柱)上，先用甲醇80毫升洗脫，棄去洗脫液，再用70%甲醇100毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材l克，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述供試品溶液5微升，對照藥材溶液2微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水(20:25:30:3:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。2、改進質量控制方法的對照實驗取小兒咳喘靈顆粒不同批號(批號為:20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的顆粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小時，濾8過，棄去濾液，藥渣加甲醇60毫升，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化鋁柱，先用甲醇80毫升洗脫，棄去洗脫液，再用70%甲醇100毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材1克，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5微升，對照藥材溶液2微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以環己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水按照20:25:30:3:3配比展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。發明人還對供試品對于靛玉紅的比移值進行比對，實驗結果如下表4小兒咳喘靈顆粒質量控制方法中薄層檢測對照批號原質量控制方法改進質量控制方法20070910-1供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點20071018-1供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點20071119-1供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點20080108-1供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點20080204-1供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點采用甲苯替代苯作展開劑組分，對薄層層析的分離沒有影響。本發明的質量控制方法提供小兒咳喘靈顆粒的檢測方法，為這種廣泛用于小兒外感風寒的藥物提供了更加安全有效的鑒定方法，為藥品實際生產、流通領域質量監控和臨床應用提供了有效保障。權利要求1.小兒咳喘靈顆粒的質量控制方法，其特征在于采用以下方法取小兒咳喘靈顆粒2克，加75％乙醇20毫升超聲10分鐘溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加10毫升甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取對照品綠原酸適量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，取供試品溶液、對照品溶液各1微升，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。2.根據權利要求1所述質量控制方法，其特征在于采用以下方法在與靛玉紅對照品比對，制備供試品溶液時，采用回流的方法提取小兒咳喘靈顆粒。3.根據權利要求2所述質量控制方法，其特征在于采用以下方法取小兒咳喘靈顆粒50克，加水150毫升，加熱使溶解，沿壁緩緩加入氯仿150毫升，置67'C水浴加熱回流2小時，靜置分層，分取氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，加甲醇制成l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液25微升，對照品溶液5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮按照5:4:l配比展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。4.根據權利要求1-3任一所述質量控制方法，其特征在于采用以下方法取小兒咳喘靈顆粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小時，濾過，棄去濾液，藥渣加甲醇60毫升，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化鋁柱，先用甲醇80毫升洗脫，棄去洗脫液，再用70%甲醇100毫升洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材1克，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5微升，對照藥材溶液2微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以環己垸-丙酮-乙酸乙酉旨-甲酸-水按照20:25:30:3:3配比展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。全文摘要小兒咳喘靈顆粒是臨床常用的兒科用藥。為了更好的保證這種兒科用藥的臨床應用的安全，本發明提供了改進的質量控制方法。本發明的具體內容為取小兒咳喘靈顆粒2克，加75％乙醇20毫升超聲10分鐘溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加10毫升甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取對照品綠原酸適量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，取供試品溶液、對照品溶液各1微升，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。文檔編號A61P11/14GK101249161SQ20081008902公開日2008年8月27日申請日期2008年4月15日優先權日2008年4月15日發明者楊文龍申請人:楊文龍