專利名稱：：吡咯衍生物的阻轉異構體的制作方法第1/15頁吡n^性物的阻轉異構體駄領域本發明涉及具有優異的鹽皮質激素受體拮抗作用的吡咯衍生物的阻轉異構體和含有該異構體的用于高血壓、心絞痛、急性冠狀綜合癥(acutecoronarysyndrome)、充血性心力衰竭、腎病、動脈硬化、腦梗塞、纖維化或原發性醛固酮增多癥的預防或治療藥物。
背景技術：
：已知鹽皮igmm受體(MR)(醛固酮受體)在調節身體電解質平衡和血壓中起到重要作用(例如，見非專利文獻l)，并且已知鹽頗、麟受體賺抓例如具有甾體結構的螺內酯和依普利酮(eplerenone)，可用于高血壓和心力衰竭的治療。進一步地，作為具有非甾體骨架的鹽皮質激素受體拮抗劑，已知有在WO2006/012642(專利文獻l)中記載的吡RM行生物。但是，本發明的具有駄(I)的化合物的阻轉異構體是未知的。:AdvancesinPhysiologyEducation^26(1):8-20(2002):WO2006/01264
發明內容本發明人致力于開發一種優異的用于心血管疾病的預防或治療藥物，并對各種吡RMf生物的藥理活性進行了深入研究。結果他們發現，具有通式(I)的化合物存在阻轉異構體，并且其中一個阻轉異構體具有極其優異的鹽^Mm素受體拮抗作用(體外和體內活性)和藥效的持續性，并且還具有極好的溶解性、口月艮吸收性、血藥濃度、代謝穩定性和安全性等性質，可用作藥物，作為預防或治療藥物(特別是治療藥物)用于例如高血壓、心絞痛、急性冠狀^癥、充血性心力衰竭、腎病、動脈硬化、腦梗塞、纖維化、原發性醛固酮增多癥或心臟、皿等疾病，更^^用于充血性心力衰竭、腎病、高血壓等，特別用于高血壓，從而完成本發明。本發明提供具有優異的鹽i^^激素受體^C作用的具有通式(I)的化，的阻轉異構體和含有該異構體的藥物(預防或治療藥物(特別是治療藥物))，所述藥物用于高血壓、心絞痛、急性冠狀綜合癥、充血性心力衰竭、腎病、動脈硬化、腦麟、纖維化、原發性醛固酮增多癥或心臟疾病(更tfc^用于充血性心力衰竭、腎病和高血壓；特別,用于高血壓)。艮P，本發明涉及(1)下艦式(I)所示的化合物的阻轉異構體[化l](其中R1是C1~C3烷基，基-C1《3烷基；并且R2是氫原子或CK3烷氧基)。進一步地，本發明涉及以下方面(2)頓式(I)的每個化合物的一對阻轉異構體中，表現出更強的鹽皮質激素受體賺作用的阻轉異構體；(3)根據(1)或(2)的阻轉異構體，其中W是甲基或2-羥乙基；(4)根據(1)到(3)中任意一項的阻轉異構體，其中W是氫原子或甲氧基；(5)根據(1)或(2)的阻轉異構體，其中W是2-羥乙基并且R2是氫原子；(6)根據(1)或(2)的阻轉異構體，其中W是甲基并且R2是氫原子；(7)根據(1)或(2)的阻轉異構體，其中W是2-羥乙基并且R2是甲氧基；(8)(-)-1-(2-羥乙基>4-甲基-1^[4-(甲磺酰基)苯基]-5-[2~(三氟甲蜀苯基]-舊-吡隊3-甲翻安；(9)(+)-1,4-二甲基-]^-[4"<甲磺酰萄苯閨-5-[2-(三氟甲萄苯蜀-1&吡^3-甲醐安；(10)(-)-l-(2-羥乙基)-5-[4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基]4-甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯基]-lH畫吡備3畫甲,(11)藥物，其含有根據(l)到(10)中任意一項的阻轉異構體作為活性成分；(12)用于心血管疾病的預防或治療藥物，其含有根敏l)到(10)中任意一項的阻轉異構體作為活性成分；(13)用于高血壓的預防或治療藥物，其含有根敬l)到(10)中任意一項的阻轉異構體作為活性成分；(14)藥物組合物，其含有根據(l)到(10)中任意一項的阻轉異構體和可藥用載體。JdM式(i)中的"ck:3烷基"的例預括具有i到3個碳原子的直,^:鄉基，例如甲基乙基正丙基和異丙基等，im甲基。上述通式(1)中的"羥基-C1《3烷基"是指用一個羥基取代上述提及的"CK3烷基"得到的基團，其例賴括2-羥乙基2-羥基-l-甲基乙基2-羥丙基和3-羥丙基等，2-羥乙基。±式(I)中的"C1《3烷氧基"是指由J^TCK3烷基"形成的CK3烷基氧基，是含有1到3個碳原子的直,誠支^^氧基，例如甲氧基乙氧基正丙氧基或異丙氧基等，甲氧基。"阻轉異構體'是指基于因肝內旋轉受限制而產生的軸向(axial)或平面手性(planarchirality)的結構異構體。本發明具有賦(I)的化儲有兩種阻轉異構體，這是源于連接鄰位被三氟甲基取代的苯基和取代吡咯環之間的鍵由于空間位阻導致旋轉受限制而產生的軸向手性。本發明盼'阻轉異構體"是具有逾《(I)的化合物的兩個阻轉異構體中的任何一個。但是，iM具有更優異的藥理活性、穩定性、體內動力學性質、安全性等，從而具有作為藥物的有利性質的阻轉異構體。本發明具有通式(I)的化合物的阻轉異構體表現出優異的鹽皮質麟受體拮抗作用和高血漿濃度以及血中滯留性，藥理學作用和體內動力學性質例如口服吸收性、體內分布和血中滯留性等優異，并皿于例如腎和肝等器官高度安全。6進一步地，本發明具有(I)的化，的阻轉異構體非常穩定。例如，即働每阻轉異構條室溫下在甲醇中艦7誠在60。C下在乙腈-令隊二甲酸緩沖液中處理4小時，也未觀察到外消旋化。因此，本發明具有通式(I)的化合物的阻轉異構體可用作例如藥物，特另何用作治療或預防各種心血管疾病({高血壓、心絞痛、急性冠^^綜合癥、充血性心力衰竭、腎病、動脈硬化、腦梗塞、纖維化、原發性醛固酮增多癥或心臟疾病)的藥物。具體實施例方式本發明具有通式(I)的化合物的阻轉異構體可通過將f頓WO2006/012642中描述的方法制備的外消旋化合物進行光學拆分而得到。阻轉異構體的光學拆分與由于sp3不對稱碳原子等弓胞的對映異構體的拆分本質上相同，其例預賄l)艦結晶的方法；(2)艦酶反應的方法；和(3)ffl51色譜法的方法。但是，不限于這些方法。在下文中，代表性的光學拆分方法將被詳細描述。①ilil結晶進行的光學拆分(a)優先結晶^^(preferentialcrystallization)這是一種利用夕卜消旋混合物自然結晶盼性質的光學拆分方法，可以不需要不X^爾因素即可實現光學拆分。(b)非對映鵬這種方法中，使被稱為光學拆分劑的手性化合物作用于外消旋化合物來將化合物衍生為兩種非對映體，禾,這些非對映體間的溶解性差異通過分級結晶實現非對映體的分離。M51反復重結晶可以提高光學純度。M從所得到的單個非對映體中除去拆分齊阿得到目標對映體。在本發明中，衍生為共^#性的結晶性非對映體后進行分級結晶的方法^ttt的。例如，在熱拆分外消旋的醇，外消旋的醇被手性羧酸衍生為非對映體酯，通過重結晶從其中除去難溶性的非對鵬，將所得的單個非對映體酯7城軍，由此得到光學活性的醇。(c)包埋配位化合物法這是一種利用手性主體分子，以外消旋化合物的一個對映體作為客體^f，非對映異構選擇性地形成包埋配位化合物，并通過重結晶提高光學純度的光學拆分方法。(d)優先富集^(preferentialenrichment)這種方法的特征是，M31外消旋晶體的重結晶在母液中弓胞一個對,的濃縮。同時，與母液中那個對映體具有相反手性的、低光學純度的結晶被沉積。(2)酶反應在對外消旋化合物fOT酶例如脂肪酶進行加成反應的情況下，在某些底物盼瞎況下，只有一個光學活性化合物發生反應。這是一種禾,這種性質的方法，其中在酶反應之后，得到的產物通過重結晶法或色譜法分離和純化，然后在適當條件下除去被附加上的官能團以得到目標光學活性化合物。另一方面，還有一種方法，其中夕卜消旋化合物預先被特異性地1針布，經1針布的外消旋化合物進行,軍反應，然后通aJ^的相同方式僅得到一個光學活性化合物。(3卿色譜法直接進行光學拆分當^ffl摻入了結合有糖等的衍生物的不對稱因素的固定相作為載體時，可以使色譜中的保留時間具有差異，從而可以實IM分。禾,這種性質，通過使用手性柱的高效液相色譜法可以進行直接的拆分。作為手性柱，可以列舉例如CHIRALPAKAD-HCHIRALCELOJ-RHpAICEL)等。在本發明的阻轉異構體〗細作藥物時，具有Jd^ffi^(I)的化合物的阻轉異構體可以單獨或與合適的可藥用賦形劑、稀釋劑等混合，以片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、或糖漿等形式通過口服給藥，或以注射劑、栓劑、貝占劑或外用劑等形式通過非胃腸邀合藥。這些制劑通過公知的方法使用添加劑，例如賦形劑、潤滑劑、粘合劑、崩解抓乳化劑、穩定劑、矯味矯臭劑^#釋齊轉來制備。阻轉異構體的用量根據癥狀、年齡等不同而不同。但是，的給藥量是，在成人口服給藥盼瞎況下，以0.02mg/kg(雌0.1mg/kg)的劑量作為下限、100mg/kg(優選10mg/kg)的劑量作為上限，在非胃腸道給藥盼瞎況下，以每次0.002mg/kg(0.01mg/kg)的劑量作為下限、lOmg/kgClmg/kg)的齊糧作為上限，根據癥狀每天給藥1到6次。在下文中，iM實施例、試驗例和制劑例更加詳細地描述本發明。但是，本發明的范圍不限于這些。實施例(實施例l)(+/_)_1,4_二甲基]^[4-(甲磺酰基)苯基]-5-[2-(三氟甲蜀苯萄-1&吡^3-甲,安該化合物MWO2006/012642的實施例16描述的方法進行合成。LH—NMR(400MHz,CDC1)S:7.90(2H，d,J=8.6Hz)'7.83—7.80(33H,m)，7.70—7.58(3H,m)，7.34(1H，d,J=7.4Hz)，7.30(1H,s)，3.32(3H，s)，3.05(3H,s)，2.09(3H,s).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:437.21203231147，實測值437.1157.(實施例2)實施例1的化合物的光學拆分{頓(+A)-l,4-二甲基-N-[4-(甲磺酰萄苯萄-S-[2-(三氟甲蜀苯蜀-lH-吡咯-3-甲醐安的乙醇溶液(44mg/mL)5mL，按照下述HPLC條件進行97鄉分，從含有異構體A的流分(tR=llmin)得到固體形式的異構體A86mg，從含有異構體B的流分(tR=18min)得到固體形式的異構體B87mg。M4頓手性柱的HPLC進行的分離采用下述斜牛裝置ShimadzuClass-VP系統(LC-8/SCL40AVP/SPD-10AVP);色譜柱CHIRALPAKAD-H(2cmx25cm)半分級分離柱(semi-fractionationcolumn);流速8.0mL/min;洗脫溶劑乙醇(100%，等度洗脫)；檢測UV(254nm)異構體A:(-)-l,4-二甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯基]-5-[2-(三氟甲萄苯基]-lH國吡[a]21:—18°(c=l.0,EtOH).DLH—NMR(500MHz,CDC1)S:7.92(2H，d,J=8.3Hz)，7.85—7.80(33H,m)，7.69—7.64(2H，m)，7.61(1H，t,J=7.3Hz)，7.35(1H，d,J=7.3Hz)，7.31(1H，s)3.33(3H，s)，3.06(3H,s),2.10(3H，s).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:437.1147,實測值437.1138.保留時間4.lmin.M使用手性柱的HPLC進行的分析釆用下述條件。(在下文中，使用相同的劍牛進行分析。4頓手性HPLC觀啶保留時間。)分析裝置ShimadzuClass-VP系統(LC-10ADVP/SCI^10AVP/SPD-M10AVP/CTO10ACVP/DGU12A);色譜柱CHIRALPAKAD-H(0.46cmx25cm);流速l.OmL/min;洗脫竊!j:乙醇(100%，等度洗脫)；儘UV(254nm)異構體B:(+)-l,4-二甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯基]-S-[2-(三氟甲萄苯蜀-lH-吡22:+18。(c=l.2，EtOH).D^—畫R(500MHz，CDC1)3:7.91(2H，d,J=8.8Hz)'7.85—7.80(33H,m)，7.68—7.64(2H,m)，7.61(1H，t，J=7.3Hz)，7.35(1H，d，J=7.3Hz)，7.31(1H，s)，3.33(3H，s)，3.06(3H,s)，2.10(3H，s).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:437.2120323'乂1147'實測值437.1153.保留時間6.3min.(實施例3)(+/-)-1-(2-羥乙基)-4-甲^^-[4-(甲磺酰基)苯蜀-5-[2-(三氟甲基)苯基]-111-吡^3-甲醐安fflaiWO2006/012642的實施例16描述的方法得到4-甲基5-[2-(三氟甲基)苯閨-lH-吡n^3-羧酸甲酉旨后，4頓該化合物作為原料進4亍下述反應。10甲萄苯蜀-lH-吡P^3-羧酸甲酯(1.4g,4.9mmd)溶于甲醇(12mL)中，向其中加入5M氫氧化鈉7jC溶液(10mL)，將得到的混合物加熱回流3小時。將混^t)^4卩到室溫以后，往其中加入甲酸(5mL)以停止反應。將混合物減壓后，向其中加入7KOOmL)以懸浮所lf^渣。過濾收集所出的固體并用水洗3次。將得到的固體ME千燥，由此得到固體形式的4-甲基-5-[2-(三氟甲萄苯基]-111-吡^3-羧酸(1.1g，83%)。將得到的固體懸浮于二氯甲烷(10mL)，向其中加入草酰氯(0.86mL,10mmo1)，將得到的混合物在室溫攪拌2小時。混，被鵬、鵬后，^躬戔渣溶于四氫呋喃(lOmL)中，依次往溶液中加入4-(甲磺酰基)苯胺鹽,(1.0g，4.9mmo1)和N,N-二異丙基乙胺(2.8mL，16mmo1)，將得到的混合物加熱回流18小時。混合物冷卻到室溫以后，減壓蒸餾除去翻IJ，往歹爐中加入乙腈(10mL)和3M鹽酸(100mL)。將析出的固體粉碎，過濾收集并用7尺洗，然后減壓干燥，由此得到固體形式的4-甲基—N-[4-(甲磺酰基)苯蜀-5-[2-(三氟甲萄苯基]-lH-吡^3-甲,安(1.4g，89%)。丄H—NMR(400MHz，DMSO—d6)S11.34(1H，brs，)，9.89(1H,s)，7.97(2H，d,J=6.6Hz)，7.87—7.81(3H,m),7.73(1H，t,J=7.4Hz)，7.65—7.61(2H，m)，7.44(1H,d,J=7.8Hz),3.15(3H，s)，2.01(3H，s將氫化鈉(0.12g,3mmol,60%分散于礦物油中)溶解于N,N-二甲基甲醐安(1.5mL)中，向其中加入4-甲基-N-[/K甲磺酰萄苯萄-H^三氟甲萄苯閨-lH-吡t^3-甲醐安(0.47g，1.1腿ol)，將得到的混，在室溫下攪拌30min。然后，向其中加入1,3,2-二氧硫雜環戊烷-2,2-二氧化物(1,3》dioxathiolane-2,2-dioxide)(0.14g，1.2mmo1)，得到的混合物在室溫下攪拌。l小時后，再次向其中加入氫化鈉(40mg,1.0mmo1,油性，60%)，得到的混合物在室溫下攪拌30併中。然后，向其中加入1,3》二氧硫雜環J[fe^-2,2-二氧化物(12mg，O.llmmol)，得到的混合物在室溫下攪拌1小時。將混合物減壓、，后，往殘渣中加入甲醇(5mL)，M51濾除去不溶的物質，濾液被再次、MI。向魂查中加入四氫呋喃(2mL)和6M鹽酸(2mL)，得到的混合物在6(TC下攪拌16小時。將反應7賴倒室溫，接著溶于乙酸乙酯中，用7K和飽和鹽水洗凈。有機層M^7jC硫M干燥并過濾。然后，將濾液減壓M，殘渣用賺柱色譜(乙酸乙酯)純化，由此得到目標化合物(0.25g，48%)。丄H—NMR(400MHz,CDC1)S:7.89—7.79(m,6H)，7.66—7.58(m，23H),7.49(s,1I-I),7.36(d，1H，J=7.4I-Iz),3.81—3.63(m，4H),3.05(s,3H)'2.08(s,3H).HR-MS(ESI)按CHFNOS[M+H]十.計算，理論值m/z:467.2222324_1252，實湖他467.1246.按chfnos分析計算c,56.65;h,4,54;n,6.0.1.;f,12.22;2221324S,6.87.實測值C,56.39;H，4.58;N，5.99;F，12.72;S,6.92.(實施例4)實施例3化合物的光學拆分按照與實施例2相同的方法進fi14次拆分，由此從含有異構體C的流分(fe=10min)得到固體形式的異構體C74mg，從含有異構體D的流分(tR=11min)得到固體形式的異構體D71mg。異構體C:(+)-l-(2-羥乙基M-甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯蜀-5-[2-(三氟甲萄苯基]-lH-吡n^3-甲醐安21:+7,1°(c=l.0,EtOH).DLh—畫R(400MHz，CDC1)S:7.91(s，1H)，7.87—7.79(m,5H)，7.637—7.58(m，2H),7.51(s，1H)，7.35(d，1H，J=7.OHz),3.78—3.65(m,4H),3.05(s，3H)，2.07(s，3H).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:467.2222324,"""""1252,實測值467.1260.保留時間4.Omin.異構體D:(-)-l-(2-羥乙基M-甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯蜀-5-[2-(三氟甲萄苯基]-lH-吡備3-甲,安12[a]21:_7.2°(c=1.1，EtOH).DLh—NMR(400MHz，CDC1)5:7.88—7.79(m,6H)，7.67—7.58(m,23H),7.50(s,IH)，7.36(d,1H，J=7.5Hz),3.79—3.65(m，4H),3.05(s,3H)，2.08(s，3H).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:467.1252,實測值467.1257.保留時間4.5min.(實施例5)(+/-)-1-(2-羥乙基)-5-[4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基H-甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯蜀-lH-吡f^3-甲醐安該化合物MilW02006/012642中描述的方法進行合成。丄H-廳R(500MHz'CDC1)3:7.91(2H，d，J=8.3Hz),7.82(2H,d,J3=8.3Hz)，7.69(1H,s),7.46(1H，s)，7.32(1H,d，J=2.OHz)，7.28—7.27(1H，m),7.14(1H,dd，J=8.3和2.OHz)，3.92(3H，s),3.82一3.66(4H，m)，3.06(3H，s)，2.10(3H，s).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:497.23243251358，實測值497.1361.(實施例6)實施例5化合物的光學拆分按照與實施例2相同的方法進行7次拆分，由此從含有異構體E的流分(tR=11min)得到固體形式的異構體E50mg，從含有異構體F的流分(tR=14min)得到固體形式的異構體F41mg。異構體E:(-)-l-(2-羥乙基)-5-[4-甲氧基-2-(三氟甲萄苯基H-甲基-N-["甲磺酰基)苯基]-18-吡^3-甲醐安DLH—NMR(500MHz，CDC1)S:7.90(2H，d，J=8.3Hz)，7.83—7.79(33H，m)，7.48(1H，s)，7.32(1H,d，J=2.4Hz)，7.28—7.25(1H，m),7.14(1H,dd，J=8.3和2.4Hz)，3.92(3H，s)，3.81-3.65(4H，m)，3.06(3H,s)，2.09(3H,s)，1.82(1H，brs).HR—MS(ESI)按CHFNOS[M+H]+計算，理論值m/z:497.23243251358,實測值497.1359.保留時間4.lmin.異構體F:(+)-l-(2-羥乙基)-5-[4-甲氧基-2-(三氟甲萄苯蜀4-甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯蜀-lH-吡^3-甲醐安23:+l.6°(c=0.8,EtOH).DLH—函R(500MHz，CDC1)S:7.91(2H,d，J=8.8Hz)，7.81(2H,d，J3=8.8Hz)，7.69(1H,s)，7.46(1H，s)，7.32(1H，d，J=2.4Hz),7.28—7.25(1H，m),7.14(1H，dd，J=8.3和2.4Hz)，3.92(3H,s)，3.82—3.66(4H，m),3.05(3H,s),2.09(3H,s).HR—MS(ESI)按C23H24F3N205S[M+H]+計算，理論值m/z:497.1358，實測值497.1340.保留時間4.7min.(微例l)構^131^接人鹽皮質受體(hMR^NM_000901)的配體結合域(LBD，對應于羧基末端約308個氮基酸的區域)和酵母轉錄因子GAL4的DNA結合域(對應于氨基^^147個氨基酸的區域)得到、并且表達GAL4-hMR受體的質粒pM-hMR-LBD。使用具有結合GAL4的DNA結合域的序列(UAS序列)、并且含有螢光素因的報道質粒(例如StratageneCloningSystem公司的質粒pFR-Luc)，進行了報道分析。將先前得到的質粒pM-hMR-LBD和報道質粒Mii脂質轉染法轉染到來源于AI臺兒的腎臟細胞株HEK293中。在第二天，《頓胰蛋白酶處理并收集細胞，準備白色的96孑L板(Costar,Inc.生產)，4頓含有5%的己用活性炭處理過的FBS(胎牛血清)的DMEM培養翻每細胞以95pL孔的量分注到各孔中。對于每個待觀'J化合物，f頓將待測化合物以規定的濃度溶解于二甲基亞砜中得到的溶液，將該溶液用適當的培養釋并加入到白色96L板中的細胞中，使最終濃度達到0.1%。當加入待測化合物時，使lnM的醛固酮共存。加AH甲基亞砜的一組孑L被標記為對照1組；加入1nM醛固酮的一組孔被iH己為對照2組。力口入完鉱培養過夜。在第二天，除去培養基，根據包裝說明書制備螢光素酶底物(WakoPureChemicalIndustries,Ltd)，并以50mL/孔的量加入到射L中，然后，攪拌約30併中。4頓Analyst(MolecularDevicesCorporation生產)測定斜L的發光3M，并作為螢光素酶活性。將對照1組的螢光素酶活性值為0%、對照2組的螢光素酶活性值為勵％時，加入待測化合物的組中在待測化合物各用量下的螢光素酶相對活性值作圖繪制曲線。根據曲線，將最大值以Imax(%)的形式算出，顯示Imax/2值的待測化合物的濃度以ICmax50(M)的形式算出。表1顯示了ICmax50值。(結果)如下列表1所示，本發明的阻轉異構體與相應的外消旋化合物相比，表現出顯著的鹽皮質激素受體^[活性。(表l)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(i微例2)糊短尾銜cyn畫lgusmonkey)(雄性)，在待測化，給藥前一天猴子被禁食。向待測化合物中加入0.5y。MC(甲基纖維素)溶液以審恪給藥樣品，使給藥劑量為3mg/2mIAg。使用管子將每^合藥樣品灌入短尾猴的胃中。給藥后，再給予約5mL7j^。每W合藥樣品給予三只短尾猴作為一組。關于采血，在給藥前、給藥后30射特tU、2、4、6、8、24和48小時使用肝素處理過的注射筒/AJ!織脈采血約1mL。將采集的血樣離心分離(15000xg,3min,4。C)以獲得血漿。將得到的血漿儲^冰箱(-20。C)中直到進fi^頁處理。標準溶液和內標(IS)溶液的制備將各待測化合物溶解于乙腈中，得到各待測化合物1mg/mL的溶液。用乙腈稀釋各待測化合物溶液制淑示準溶液。另夕卜，將華法，內(sodiumwarfarin)(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.)溶于乙腈中制成500ng/mL的IS溶液。血漿樣品的預處理:取50mL血漿樣品并向其中加入50乙腈。作為校正曲線，將50|iL各標準溶液(乙腈溶液)加入到50pL空白血漿中。對所有樣品，加入IS的乙睛溶液150mL，攪拌所得的混合物，然后進行離心分離(約1800xg,30mii^4。C)。在^f頓Sirocco蛋白沉淀板(WatersCorporation)進4f31濾后，濾液用流動相適當稀釋，作為LC-MS/MS分析用樣品。待測化合物的定量通過LC-MS/MS法分析各待測化，的血漿濃度。HPLC:LC國10Avp系歹ll，Promience(ShimadzuCorporation)色譜柱X畫BridgeRP18,2.0mmI.D.x50mm^2.5jim(WatersCorporation)流動相A^0mM甲MI安7j^溶液，B=乙腈MS:API4000(AB齢SSC正X,Inc.)離子化方法渦輪增壓離子噴射(Turboionspmy)(正離子或負離子)離子化模式大氣壓化學電離(APCI)16檢測模式MRM分析根據各藥物的血漿濃度，<柳WinNonlinProfessional(版本4.0.1,PharsightCoiporation)計算藥物代謝動力學參數。順便說的是，4柳非隔室模型(Noncompartmentmodel)作為用于計算所述參數的模型。(結果)對實施例l、實施例2的異構體B、實施例3、實施例4的異構體D、實施例5和實施例6的異構體E這些化合物進行了評價。結果如表2所示，異構體B、異構體D和異構體E是在微例1中被證明具有高活性的阻轉異構體，與相應的夕卜消旋化合物實施例1、實施例3和實施例5的化，相比，血漿濃度大幅提高。(表2)待測化，AUC1(ngh/mL)Cmax2(n^mL)實施例l86042異構體B3446184實施例3332異構體D7187681實施例57667380異構體E263901330、AUC(ng'h/mL):血漿濃度(MLC-MS/MS法測定)與時間((K48小時)曲線下面積；2:Cmax(ng/mL):最大濃度(制劑例l)M劑異構體B乳糖玉米淀粉硬脂,_250mg50.0mg128.770.01.3將戰配方的粉末混合，過60目篩，將250mg該粉末^A3號明l^^囊中制得膠囊劑。(制劑例2)片劑異構體D50.0mg乳糖124.0玉米淀粉25.01.0200mg將戰處方的粉末混合，4頓壓片機壓片制得片劑(200mg/片)。、血管舒張作用、心臟保護作用、腎病抑制作用、抗動脈硬化作用和利尿作用等，并且安全性也高，因此可以用作高血壓、心絞痛、急性冠狀綜合癥、充血性心力衰竭、腎病、動脈硬化、腦梗塞、纖維化或原發性醛固酮增多癥的預防或治療藥物。18權利要求1.下述通式(I)所示的化合物的阻轉異構體(其中R1是C1～C3烷基或羥基-C1～C3烷基；并且R2是氫原子或C1～C3烷氧基)。2.式(I),的每個化合物的一對阻轉異構體中，表現出更強的鹽皮質激素受體^C作用的阻轉異構體。3.根據權利要求1或2的阻轉異構體，其中W是甲基或2-羥乙基。4.根據權利要求l-3中任意一項的阻轉異構體，其中f是氫原子或甲氧基。5.根據權利要求1或2的阻轉異構體，其中R1是2-羥乙基并且W趨原子。6.根據權利要求1或2的阻轉異構體，其中R1是甲基并且R2錢原子。7.根據權利要求1或2的阻轉異構體，其中R是2-羥乙基并且W是甲氧基。8.(-)-H2-羥乙基M-甲基-N-[4-(甲磺酰基)苯蜀-5-[2-(三氟甲蜀苯基]-lH-吡t^3誦甲醐安。9.(+)-l,4-二甲基-N-[冬(甲磺酰基)苯基]-S-p-(三氟甲蜀苯閨-lH-吡n^^甲10.(-)-l-(2-羥乙基)-5-[4-甲氧基-2-(三氟甲萄苯蜀4-甲基N-[l(甲磺酰基)苯基]-lH-吡B^3-甲翻安。11.藥物，其含有根據權利要求110中任意一項的阻轉異構體作為活性成分。12.用于心血管疾病的預防或治療藥物，其含有根據權利要求1~10中任意一項的阻轉異構體作為活性成分。13.用于高血壓的預防或治療藥物，其含有根據^l利要求110中任意一項的阻轉異構體作為活性成分。14.藥物組合物，其含有根據權利要求110中任意一項的阻轉異構體和可藥用載體。全文摘要本發明提供一種用于心血管疾病的預防或治療藥物。一種所述通式(I)所示的化合物的阻轉異構體(其中R¹是C₁～C₃烷基或羥基-C₁～C₃烷基；并且R²是氫原子或C₁～C₃烷氧基)。文檔編號A61P9/10GK101679243SQ200880011200公開日2010年3月24日申請日期2008年4月8日優先權日2007年4月9日發明者吉田樹里,朝生祐介,林法幸,青木一真,鶴岡弘幸申請人:第一三共株式會社