專利名稱：竹節參總皂苷、竹節參多糖的保肝作用的制作方法
技術領域：
本發明的涉及竹節參總皂苷、竹節參多糖的保肝用途。
背景技術：
肝損傷主要包括暴力性肝損傷、病理性肝損傷、化學性肝損傷等。其中暴力性肝損傷多表現明顯快速，且嚴重。而病理性肝損傷和化學性肝損傷最為常見。在化學性肝損傷中，酒精和藥物造成的肝損傷最為普遍，已經成為嚴重威脅人民生命安全和生活質量的重要因素。現在化學藥物對肝損傷的治療多采用干擾素療法，但存在用藥劑量大，費用高，毒副作用大，停藥后易復發等缺點。而中藥對肝損傷的治療多采取復方湯藥，或脫胎于復方的中成藥，其藥味眾多，導致質量難以控制。因此，急切需要開發出來源于單一植物，成分簡單，療效明確的有效部位或有效成分，用于急慢性肝損傷的治療。竹節參為五加科人參屬多年生草本植物Panax japonicus Cl Al Meyl的干燥根。原是一種名貴的民間中草藥，現已收載于《中華人民共和國藥典》，藥用功能類似人參和三七。竹節參生于山坡溝邊、陰濕地區或巖石溝澗旁。主要分布于貴州、湖南、云南、安徽、 江西、湖北等地。每年秋季采挖，除去莖葉，分出肉質根，將根莖除去外皮，曬干或陰干即可入藥。始載于《本草綱目拾遺》。竹節參甘、微苦，溫。具有活血化瘀、消腫止痛、滋補強壯等多種功效。既有類似人參的滋補強壯作用，又有類似三七的散瘀止痛、止血、祛痰作用，主要用于病后虛弱，勞嗽咳血，咳嗽痰多，跌打損傷。竹節參含有多種皂苷、揮發油、糖類和多種氨基酸。本發明要解決的技術問題是研究竹節參總皂苷、竹節參多糖的保肝用途。為解決上述問題，提供技術方案如下。竹節參總皂苷、竹節參多糖在保肝上的應用。所述保肝方面的運用包括對肝損傷的預防和治療。所述組合物包括竹節參總皂苷、竹節參多糖與藥學上可接受的載體或者常規食用輔料。本發明對四氯化碳造成的肝損傷動物模型具有的降低谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的顯著性作用。本發明包括用竹節參總皂苷、竹節參多糖與藥學上可接受載體混合。藥學上可接受的載體包括口服制劑輔料或胃腸外途徑給藥的輔料。給藥途徑可以是口服、注射、局部給藥等。根據本發明的技術方案，該組合物可以是口服制劑或注射用制劑，其中口服制劑包括膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、口服液、片劑、滴丸等。所用輔料包括淀粉、蔗糖、乳糖、糖粉、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇、異丙醇、吐溫-80、甘油、丙二醇、微晶纖維素鈉、糊精、環糊精、氯化鈉、維生素C、半胱氨酸、檸檬酸、硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉、硬脂酸鹽和明膠等常規輔料，制劑的后期制備工藝及設備均屬制藥領域的常規技術，本發明對此不作限定，故在此不予詳述。本發明組合物口服給藥的劑量為2-3次/天，0. 25 0. 50g/次。本發明竹節參總皂苷、竹節參多糖提取物是從天然的中藥竹節參中提取得到的，竹節參是常用的中草藥，有長期的中醫用藥經驗，該藥使用安全性高，無明顯毒性作用記載。竹節參總皂苷、竹節參多糖具有確切的降低模型動物谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的作用。因此，竹節參總皂苷、竹節參多糖有開發成保肝藥物的前景。實施例一竹節參總皂苷的提取、純化和制備取竹節參粗粉，加入10倍量的60%的乙醇，浸泡2小時，水浴回流提取2小時，濾過，得濾液。藥渣再用10倍量的60%的乙醇回流提取2次，每次2小時，濾過。合并3次濾液，減壓回收乙醇至無醇味，配制成藥材藥液(g/ml)為1 1的溶液。上已經處理好的 HPD-100大孔樹脂柱，一次用水、60%的乙醇洗脫。合并60%的乙醇洗脫液，回收溶劑至近干，經65°C減壓干燥，得到竹節參總皂苷。實施例二竹節參多糖的提取、純化和制備取竹節參粗粉，加入10倍量的水，浸泡2小時，直火煎煮提取1. 5小時，濾過，得濾液。藥渣再用10倍量的水直火煎煮提取2次，每次1.5小時，濾過。合并3次濾液，減壓濃縮至體積適量。加乙醇至濃度為70%進行醇沉，室溫下放置12小時以上，濾過，收集沉淀物，反復醇沉2次，合并沉淀物，經65°C減壓干燥，得到竹節參多糖。實施例三竹節參總皂苷和竹節參多糖的保肝實驗研究1.實驗材料1.1藥品試劑聯苯雙酯片(江蘇鵬鷂藥業有限公司，批號0811161)；辛伐他汀片(上海信誼萬象藥業股份有限公司，批號080201)；血脂康膠襄(北京北大維信生物科技有限公司，批
號20080708)；四氯化碳(χ1^，北京市新光化學試劑廠生產)；花生油(食用油，山東玉皇
糧油食品有限公司生產)；谷丙轉氨酶(ALT)臨床診斷試劑盒(上海科欣生物技術研究所，批號20090401)；谷草轉氨酶(AST)臨床診斷試劑盒(上海科欣生物技術研究所，批號 20090301)。竹節參多糖(Dl)、竹節參總皂苷(Zl)為本實驗室自制。1.2實驗儀器721分光光度計(上海菁華儀器廠)，LXJ-II離心機(上海醫用分析儀器廠)， Satrious電子天平(德國)；恒溫水浴鍋(上海亞榮生化儀器廠)；移液槍；，低溫高速離心機(天美Z323K)。1. 3實驗動物昆明種雄性小白鼠，體重18 22g，由中國藥科大學動物中心提供。2.實驗樣品的制備實施例一、二中制備的竹節參總皂苷和竹節參多糖。3.試驗樣品液的配制3. 1. CMC-Na溶液的配制精密稱取5gCMC_Na，IOOOmL蒸餾水，配制成濃度為0. 5% 的CMC-Na溶液。3. 2.陽性對照藥取聯苯雙酯液制備取聯苯雙酯片16片Q5mg/片)，置于研缽中碾成細粉，溶解于40ml水中，得10mg/ml的聯苯雙酯混懸液，為陽性對照藥液。3. 3.陽性對照藥血脂康藥液的配制精密稱取5g內容物，以0. 5% CMC-Na混懸， 定容至100ml，配制成濃度為0. 05g/ml的藥液樣品。
3. 4.陽性對照藥辛伐他汀藥液的配制精密稱取14g辛伐他汀片(含辛伐他汀 70mg)，IOOmlO. 5% CMC-Na混懸，配成濃度為0. 0007g/ml的藥液樣品。3. 5.高劑量竹節參多糖藥液的配制精密稱取1. 5g竹節參多糖。IOOml 0.5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 015g/ml的藥液樣品。3. 6.低劑量竹節參多糖藥液的配制精密稱取0. 75g竹節參多糖，IOOmlO. 5 % CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 0075g/ml的藥液樣品。3.7.高劑量竹節參總皂苷藥液的配制精密稱取1.5g竹節參總皂苷。IOOml 0. 5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 015g/ml的藥液樣品。3.8.低劑量竹節參總皂苷藥液的配制精密稱取0.75g竹節參總皂苷， IOOmlO. 5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 00715g/ml的藥液樣品。3. 9.高劑量竹節參總皂苷和多糖藥液的配制精密分別稱取0. 75g竹節參總皂苷和0. 75g竹節參多糖。IOOml 0. 5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 015g/ml的藥液樣品。3. 10.低劑量竹節參總皂苷藥液的配制精密分別稱取0. 375g竹節參總皂苷和 0. 375g竹節參多糖。IOOmlO. 5% CMC-Na混懸，配制成濃度為0. 0075g/ml的藥液樣品。4.實驗方法昆明種小鼠132只，18_22g，雌雄各半，隨機分成11組，每組12只。分為正常空白對照組、高脂模型組、取聯苯雙酯陽性對照組、辛伐他汀陽性對照組、血脂康陽性對照組、 竹節參總皂苷高劑量組、竹節參總皂苷低劑量組、竹節參多糖高劑量組、竹節參多糖低劑量組、竹節參多糖和竹節參總皂苷低劑量組、竹節參多糖和竹節參總皂苷高劑量組。灌胃給藥。正常對照組和高脂模型組每日按0. 2ml/10g灌胃0.5% CMCNa,給藥組每日灌胃給予 0. 2ml/10g體積的相應藥物，給藥劑量分別為取聯苯雙酯對照組0. 2g/kg、血脂康對照組為lg/kg、辛伐他汀對照組為0. 014g/kg、竹節參多糖高劑量組為0. 3g/kg、竹節參多糖低劑量組為0. 15g/kg、竹節參總皂苷高劑量組為0. 3g/kg、竹節參總皂苷低劑量組為0. 15g/kg、 竹節參多糖和竹節參總皂苷高劑量組為0. 15g多糖/kg和0. 15g皂苷/kg、竹節參多糖和竹節參總皂苷低劑量組為0. 075g多糖/kg和0. 075g皂苷/kg。共給藥6天。最后1次給藥 2小時后，除空白組外，其余8組均腹腔注射0. 的四氯化碳花生油溶液0. lmL/10g。禁食 16個小時后，于小鼠眼底靜脈叢采血約0. 5ml，分離血清(4000rp/min，10min,4°C )，利用試劑盒測定ALT、AST活力。5.結果與討論表1.竹節參多糖(Dl)、總皂苷(Zl)對小鼠血清谷丙轉氨酶(ALT)的影響(n = 10，三士 SD:)
權利要求
1.竹節參總皂苷、竹節參多糖及竹節參總皂苷和竹節參多糖組合物的保肝用途。
2.權利要求1中所述的保肝用途主要是通過對降低降低谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶達到的。
3.權利要求1中所述的保肝用途可以被用在對肝損傷的預防和治療。
4.權利要求1中所述的保肝用途，其最終實施形式包括竹節參總皂苷、竹節參多糖及竹節參總皂苷和竹節參多糖組合物與藥學上可接受的載體或者常規食用輔料。
全文摘要
竹節參總皂苷、竹節參多糖及竹節參總皂苷和竹節參多糖組合物的保肝用途，可與藥學上可接受載體混合。
文檔編號A61K36/258GK102247418SQ201010176648
公開日2011年11月23日 申請日期2010年5月19日 優先權日2010年5月19日
發明者楊小林, 石楊, 霍夢蕊 申請人:楊小林