專利名稱：：一種富硒猴頭菌菇膠囊的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種富硒猴頭菌菇膠囊的制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：微量元素硒具有抗癌抗腫瘤以及提高機(jī)體免疫力，抗氧化保護(hù)心血管、提高紅細(xì)胞的攜氧能力、拮抗和降低某些有毒元素及物質(zhì)的毒性、保護(hù)視器官的健全功能等保健作用。近年來(lái)，各種具有補(bǔ)硒功能的保健品不斷涌現(xiàn)，已成為保健品市場(chǎng)一支生力軍。目前國(guó)內(nèi)外普遍采用的無(wú)機(jī)強(qiáng)化劑主要為亞硒酸鈉，主要用于制備口服液，亞硒酸鈉片和亞硒酸鈉強(qiáng)化食鹽等。有研究表明，有機(jī)硒對(duì)動(dòng)物的毒性明顯低于無(wú)機(jī)硒，且有機(jī)硒在動(dòng)物組織中的保留量大于無(wú)機(jī)硒。有機(jī)硒作為重要的硒源引起了人們的重視。微生物由于生長(zhǎng)速度快，收獲周期短，培養(yǎng)方便，各種條件易于控制，因此微生物無(wú)機(jī)硒的轉(zhuǎn)化成為生物源有機(jī)硒的主要來(lái)源。且不少微生物具有良好的富硒能力。目前常見(jiàn)的有機(jī)硒富硒產(chǎn)品有富硒酵母，富硒香菇，富硒靈芝等。猴頭菌菇是著名的藥食兩用菌，含有多肽、多糖和酰胺等高分子化合物，對(duì)消化系統(tǒng)的癌變、潰瘍及神經(jīng)衰弱等疾患具有顯著療效。并有抗?jié)儭⒖鼓[瘤、助消化、抗衰老、提高機(jī)體耐缺氧能力、增加心肌血液輸出量、加速機(jī)體血液循環(huán)、降血糖、降血脂、保肝護(hù)肝等作用。猴頭富硒除了能有效將無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒從而降低毒性以外，更有可能提高猴頭中有效成分保健功效。達(dá)到1+1>2的良好效果。猴頭對(duì)硒的轉(zhuǎn)化率較高，且人體對(duì)菌類有機(jī)硒的利用率較高，可以達(dá)到70%-90%。在猴頭的培養(yǎng)料中加入一定量的硒能夠提高子實(shí)體的產(chǎn)量并且能夠提高猴頭中有效成分的含量。使得富硒猴頭菇成為一種極具開(kāi)發(fā)潛質(zhì)的具有優(yōu)良功效的保健食品。猴頭作為一種傳統(tǒng)各藥學(xué)典籍中早有記載。猴頭栽培工藝簡(jiǎn)單，設(shè)備要求低，富硒猴頭毒性低，安全性高。研究猴頭菌富硒將為人們的日常攝取提供新的硒源。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明中的猴頭菌(拉丁名稱(Hericiumerinaceus(Bull.:Fr.)Pers.)，廣布種，是現(xiàn)有技術(shù)中已知菌種，并可以從商業(yè)途徑購(gòu)買獲得。本發(fā)明中，發(fā)明人還直接從安徽黃山的野生猴頭菌子實(shí)體分離到該菌種，保存于安徽省微生物防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室菌種庫(kù)(液氮及凍干保存)，菌株編號(hào)RCEF0923，需要時(shí)可向本室購(gòu)買，亦可用其它食用菌廠或研究所提供的猴頭菌菌種。本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種制備富硒猴頭菌菇粉的方法，該方法采用在猴頭菌菇培養(yǎng)基中添加定量的亞硒酸鈉，即Na2SeO3的方法，通過(guò)微生物轉(zhuǎn)化后，制成的富硒猴頭菌菇粉，所得產(chǎn)品中有機(jī)硒和多糖的含量高，食用安全、方便，可滿足各類人群的補(bǔ)硒要求。本發(fā)明的另一目的在于提供一種富硒猴頭菌菇膠囊，該膠囊的內(nèi)容物為本發(fā)明的富硒猴頭菌菇粉。本發(fā)明一方面提供了一種制備富硒猴頭菌菇粉的方法，該方法包括以下步驟(1)斜面試管培養(yǎng)將分離純化的菌種接種于斜面試管中培養(yǎng)；(2)三角瓶培養(yǎng)將斜面試管培養(yǎng)得到的菌種接種到三角瓶培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(3)發(fā)酵罐培養(yǎng)將三角瓶培養(yǎng)得到的菌種接入發(fā)酵罐培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；(4)富硒猴頭菌菇的栽培在20-27°C向盛有培養(yǎng)基的容器中，接種培養(yǎng)基重量1.0-3.0%的步驟；(3)得到的菌種，培養(yǎng)，直到猴頭子實(shí)體長(zhǎng)出；(5)富硒猴頭菌菇粉的制備將步驟⑷得到的富硒猴頭菌菇干燥、粉碎，得到富硒猴頭菌菇粉；在步驟(2)-(4)的培養(yǎng)基中均含有亞硒酸鈉。與現(xiàn)有技術(shù)不同的是，本發(fā)明還將發(fā)酵培養(yǎng)后的菌種再次進(jìn)行接種，直到猴頭子實(shí)體長(zhǎng)出，如此操作不但省去了現(xiàn)有技術(shù)中，制備富硒猴頭菌菇時(shí)分離純化發(fā)酵罐培養(yǎng)基的操作步驟，而且制備得到的富硒猴頭菌菇中有機(jī)硒和多糖的含量均得以提高。優(yōu)選的，在所述的步驟(1)中，所述的斜面試管培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有180-220g的土豆、18-22g的葡萄糖、l_2g的磷酸二氫鉀、0.7-0.8g的硫酸鎂、18_22g的瓊月旨，并且所述培養(yǎng)基的PH值為4.5-6。更優(yōu)選的，所述的斜面試管培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有200g土豆、20g葡萄糖、Ig磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂、20g瓊脂，并加水至1L，并且所述培養(yǎng)基的PH值為5.02。優(yōu)選的，在所述的三角瓶培養(yǎng)基和發(fā)酵罐培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中均含有，45-55g的麥麩、18-22g的葡萄糖、1.8-2.2g的蛋白胨、1.8-2.2g的酵母粉、1.3-1.7g的磷酸二氫鉀、0.7-0.8g的硫酸鎂、80-120mg的亞硒酸鈉，并且所述培養(yǎng)基的pH值為4.5_6。更優(yōu)選的，在三角瓶培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有50g麥麩、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氫鉀、0.75g硫酸鎂、109.7mg亞硒酸鈉，并用水補(bǔ)足至1L，并且所述培養(yǎng)基的PH值為5.0。優(yōu)選的，在所述的步驟(3)中，所述的發(fā)酵罐培養(yǎng)包括一級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)和二級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)。優(yōu)選的，在所述的步驟(4)的培養(yǎng)基中含有750_800g的玉米芯、180_220g的麥麩、8-12g的蔗糖、8-10g的石膏和87.76-109.70mg的亞硒酸鈉，更優(yōu)選的，所述的培養(yǎng)基中含有780g的玉米芯、200g的麥麩、IOg的蔗糖、IOg的石膏和109.7mg的亞硒酸鈉。優(yōu)選的，在所述的步驟⑵中，三角瓶培養(yǎng)的條件為在24_26°C溫度下，120-160轉(zhuǎn)/分鐘的振動(dòng)速度下，在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)間為5-7天。更優(yōu)選的，所述的振動(dòng)速度為140轉(zhuǎn)/分鐘。優(yōu)選的，所述步驟(3)的發(fā)酵培養(yǎng)條件為首先將發(fā)酵罐中的液體培養(yǎng)基滅菌，將滅菌后的培養(yǎng)基冷卻，再將三角瓶培養(yǎng)后的菌種接入培養(yǎng)基中培養(yǎng)。更優(yōu)選的，所述的滅菌條件為在50L氣升式發(fā)酵罐中裝入20L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度為25°C-27°C,pH值為4.5_6，并加入0.045-0.055%培養(yǎng)基重量的食用消泡劑，在14.7XIO4Pa壓力下，通入蒸汽加熱到115_125°C，保持30-45分鐘。優(yōu)選的，在所述的步驟(3)中，所述的培養(yǎng)條件如下培養(yǎng)溫度為25-26°C，通氣量為10.5V/V·min，壓力保持4.903-7.0845XIO4Pa,培養(yǎng)4-6天。優(yōu)選的，在所述的步驟(4)中的培養(yǎng)條件如下，首先將所述的培養(yǎng)基物料混合均勻后，加入適量的水，其重量份為物料水=12，拌勻裝入聚丙烯塑料袋中滅菌，將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置于無(wú)菌通風(fēng)室中冷卻至24°C_25°C，向培養(yǎng)基接種其總重量的1.7%的液體菌種；放入培養(yǎng)室中培養(yǎng)；溫度保持在25V_28°C濕度保持在95%-100%培養(yǎng)80-100天。更優(yōu)選的，培養(yǎng)90天。本發(fā)明另一方面還提供了一種富硒猴頭菌菇膠囊，該膠囊的內(nèi)容物為本發(fā)明的富硒猴頭菌菇粉末。與現(xiàn)有技術(shù)不同的是本發(fā)明將發(fā)酵罐生產(chǎn)出的菌種接種到固體培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，直到得到猴頭子實(shí)體，本發(fā)明得到的猴頭菌菇膠囊的內(nèi)容物是干燥并粉碎后的猴頭子實(shí)體。其中的硒含量達(dá)到114.05士8.0911^/1^，多糖含量達(dá)到25.38士0.321^/1^。然而采用現(xiàn)有技術(shù)，直接將發(fā)酵罐的菌種分離提取并干燥得到的富硒猴頭菌中的硒含量?jī)H為400-700μg/100g。此外，由于本發(fā)明是將猴頭子實(shí)體粉碎干燥得到的猴頭菌菇粉末，再將粉末裝入膠囊得到富硒猴頭菌菇膠囊，所以制備方法更為簡(jiǎn)單，相對(duì)與現(xiàn)有的技術(shù)，本發(fā)明方法的猴頭菌菇在制備過(guò)程中的損耗小。本發(fā)明方法生產(chǎn)的富硒強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)食品具有獨(dú)特的先進(jìn)性1、猴頭菌菇是著名的藥食兩用菌，含有多肽、多糖和酰胺等高分子化合物，有抗?jié)儭⒖鼓[瘤、助消化的作用。對(duì)消化系統(tǒng)的癌變、潰瘍及神經(jīng)衰弱等疾患具有顯著療效。用猴頭作為富硒載體，其安全性和有效性易于被人接受和認(rèn)可；2、動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明所得產(chǎn)品安全無(wú)毒；3、經(jīng)藥理試驗(yàn)證實(shí)，所述產(chǎn)品富硒猴頭菌菇子實(shí)體提取物的抑菌效果略優(yōu)于普通猴頭子實(shí)體提取物的抑菌效果。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果證明小鼠經(jīng)口給予富硒猴頭菇凍干粉21天后，能促進(jìn)小鼠腸道中益生菌的增殖。說(shuō)明該產(chǎn)品具有調(diào)節(jié)腸道菌群功能。4、本發(fā)明的生產(chǎn)方法工藝簡(jiǎn)單，設(shè)備要求低，不僅適合企業(yè)，也適用于農(nóng)戶創(chuàng)業(yè)。投入少，經(jīng)濟(jì)效益好。生產(chǎn)原料主要為麥麩、玉米芯等農(nóng)業(yè)廢料，具有很高的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1該富g猴頭If菇粉末的牛產(chǎn)方法,甸J舌下述母產(chǎn)工序A、液體菌種培養(yǎng)將分離純化的菌種接種于斜面試管中，斜面試管培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有200g土豆、20g葡萄糖、Ig磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂、20g瓊脂，并且所述培養(yǎng)基的pH值為5.02。再將接種菌種的斜面試管放入25°C培養(yǎng)箱，培養(yǎng)時(shí)間為7天，待菌絲長(zhǎng)滿試管；在500ml三角瓶中裝入200ml培養(yǎng)基，用1.2Kg/cm2高壓滅菌30分鐘，待冷卻至室溫時(shí)，將經(jīng)1支斜面試管的菌種接種到500ml三角瓶培養(yǎng)基上，并置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱，溫度25士1°C，140轉(zhuǎn)/分鐘條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為5天；在50L氣升式發(fā)酵罐中裝入20L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度大于95°C、pH值為4.5-6，并加入食用消泡劑，加入量為培養(yǎng)基重量的0.03%，在14.7XIO4Pa壓力下，通入蒸汽加熱到121°C，并保壓30-45分鐘；滅菌后，冷卻至20°C時(shí)將4瓶上述培養(yǎng)好的500ml搖瓶菌種接入培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25-26°C，通氣量為10.5V/V·min，保壓4.903-7.0845XIO4Pa,經(jīng)5天通氣培養(yǎng)，達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后即可。終培養(yǎng)體積為20L。三角瓶和發(fā)酵罐中的每IL液體培養(yǎng)基均含有50g麥麩、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氫鉀、0.75g硫酸鎂、109.7mg亞硒酸鈉，并且所述培養(yǎng)基的pH值為5.0。B、富硒猴頭菇袋料栽培所述菌種的固體基質(zhì)培養(yǎng)基原料重量配比為在IOOOg培養(yǎng)基中含玉米芯780g、麥麩200g、蔗糖10g、石膏IOg和亞硒酸鈉109.70mg。將固體物料混合均勻后，加入適量的水，其重量份為物料水=12;拌勻裝入聚丙烯塑料袋中滅菌；將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置于無(wú)菌通風(fēng)室中冷卻至24°C，以固體培養(yǎng)基重量的1.7%的接種量接入步驟A得到的發(fā)酵罐中的液體菌種；將接種后的物料放入培養(yǎng)室中培養(yǎng)；溫度保持在25°C，濕度保持在95%，培養(yǎng)90天后，猴頭子實(shí)體長(zhǎng)出，菌刺變長(zhǎng)；C、富硒猴頭菌菇粉末生產(chǎn)低溫干燥將步驟B得到的子實(shí)體，采用50°C以下溫度干燥，粉碎，得到富硒猴頭菌菇粉末。D、富硒猴頭菌菇膠囊的生產(chǎn)將步驟C得到的富硒猴頭菌菇粉末裝入膠囊中，得到富硒猴頭菌菇膠囊。實(shí)施例2富硒猴頭菌菇的膠囊的檢測(cè)將實(shí)施例1方法制備得到的富硒猴頭菌菇膠囊進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)下表有機(jī)硒含量(mg/kg)蛋白質(zhì)含量(mg/kg)多糖含量(mg/kg)~114.05+8.09mg/kg22.61+0.57mg/kg25.38+0.32mg/kg~實(shí)施例3富硒猴頭菌菇粉末安全性的評(píng)價(jià)急性毒性試驗(yàn)，給藥量每次5.6g/kg·Bff受試動(dòng)物，一次性給予。富硒猴頭菌粉急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，富硒猴頭菌膠囊無(wú)急性毒性作用，5.6mg/kg*BW給藥濃度下，未測(cè)出明顯的LD5(i。用藥后動(dòng)物未出現(xiàn)明顯的中毒癥狀及死亡情況，連續(xù)觀察一周，動(dòng)物全部存活，活動(dòng)自如，毛發(fā)光滑，飲食正常，呼吸、鼻、眼、口腔無(wú)異常分泌物。體重增加。一周后解剖動(dòng)物，肉眼及顯微鏡觀察重要臟器，未出現(xiàn)明顯的病理學(xué)改變，因此急性實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示富硒猴頭菌菇膠囊安全無(wú)毒。實(shí)施例4富硒猴頭菌菇膠囊的體外抑菌實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)選取大腸桿菌(Escherichiacoli)——革蘭氏陰性，金黃色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus)——革蘭氏陽(yáng)性，白假絲酵母(Candidaalbicans)——真菌,考察猴頭菌菇的抑菌能力。試驗(yàn)方法將實(shí)施例1得到的粉碎干燥的猴頭菌菇的子實(shí)體處理，(水提物普通猴頭和富硒猴頭凍干粉各20g，分別加入400ml蒸餾水，超聲浸提lh，真空減壓濃縮至200ml。乙醇提取物普通猴頭和富硒猴頭凍干粉各20g，分別加入400ml乙醇，超聲浸提lh，真空減壓濃縮至干。用200ml蒸餾水溶解。乙酸乙酯提取普通猴頭和富硒猴頭凍干粉各20g，分別加入400ml乙酸乙酯，超聲浸提lh，真空減壓濃縮至干。用200ml蒸餾水溶解。丙酮提取物普通猴頭和富硒猴頭凍干粉各20g，分別加入400ml丙酮，超聲浸提lh，真空減壓濃縮至干。用200ml蒸餾水溶解。并加入下表1的溶液中，加入量為IOOyL,其抑菌率通過(guò)下表中的“富硒”一欄得以體現(xiàn)；下表中的“普通”表示普通的猴頭菌菇子實(shí)體粉末，它的處理方法同實(shí)施例1得到的猴頭菌菇的子實(shí)體粉末，在表1溶液中的加入量與富硒猴頭菌菇的加入量相同。表1猴頭菌制備物對(duì)十種供試菌的抑菌圈<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由表1可見(jiàn)，普通猴頭子實(shí)體粉末和富硒猴頭子實(shí)體粉末對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白假絲酵母均有一定程度的抑制作用。尤以對(duì)大腸桿菌的抑制作用最為明顯。富硒猴頭子實(shí)體提取物的抑菌效果略優(yōu)于普通猴頭子實(shí)體提取物的抑菌效果。抑菌物質(zhì)的提取方法一超聲浸提為優(yōu)，以乙醇為溶劑的提取物的抑菌效果最好。本實(shí)驗(yàn)中猴頭多糖和水煎液的抑菌效果不明顯。最低抑菌濃度(英文簡(jiǎn)稱MIC)的測(cè)定富硒猴頭醇提物的MIC采用微量稀釋法，富硒猴頭乙醇提取物真空減壓濃縮至干，加入蒸餾水配成藥液，過(guò)濾除去細(xì)菌，二倍法梯度稀釋。各組最終藥物濃度如表2-3所示表2MIC實(shí)驗(yàn)濃度梯度<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>度(mg/ml:接種時(shí)，先用培養(yǎng)基講菌液調(diào)至IXIO6IXIO8個(gè)/ml。每孔帶藥培養(yǎng)基100μL，菌液50μL0表3MIC的測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表2-3可以看出，本發(fā)明的富硒猴頭菌菇粉末對(duì)大腸桿菌大腸桿菌G+和金黃色葡萄球菌抑菌效果最為明顯，對(duì)白假絲酵母的抑菌效果稍弱。實(shí)施例5富硒猴頭菌菇粉末對(duì)小鼠腸道的調(diào)節(jié)作用富硒猴頭菇粉末對(duì)實(shí)驗(yàn)老鼠體重的影響，實(shí)驗(yàn)方法50只小鼠隨機(jī)分為5組，分別為蒸餾水對(duì)照組，普通猴頭菇凍干粉組和富硒猴頭凍干粉高、中、低3個(gè)劑量組，每組10只。高、中、低劑量組分別給予富硒猴頭菇凍干粉3g/d/kg·BW、0.06g/d/kg·Bff和0.006g/d/kg·BW。普通猴頭菇凍干粉對(duì)照組給予0.06g/d/kg·Bff普通猴頭菇凍干粉，空白對(duì)照給蒸餾水。灌胃給藥，灌胃容量0.2ml/10g體重。每天一次，持續(xù)3周。除灌胃外，小鼠給予正常飼料和飲水。表4富硒猴頭菌菇粉末對(duì)實(shí)驗(yàn)老鼠體重的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從表4可以看出，富硒猴頭菌菇粉末對(duì)實(shí)驗(yàn)老鼠體重的影響很小。表5不同劑量富硒猴頭菇粉末對(duì)小鼠腸道大腸桿菌的影響(lgCFU/g，X±s,η=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)驗(yàn)期間小鼠糞便中腸桿菌屬的變化如表5所示，實(shí)驗(yàn)期間小鼠糞便中腸桿菌無(wú)與對(duì)照組相比無(wú)明顯變化(Ρ>0.05)。經(jīng)口給予富硒猴頭凍干粉21天后，小鼠腸道中的大腸桿菌生長(zhǎng)繁殖未受明顯抑制表6不同劑量富硒猴頭菇粉末對(duì)小鼠腸道雙岐桿菌的影響(lgCFU/g，X土S，n=<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與正常對(duì)照組比較，*Ρ<0.05表6不同劑量富硒猴頭菇粉末對(duì)小鼠腸道乳酸菌的影響(lgCFU/g，X±S,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>與正常對(duì)照組比較，*Ρ<0.05實(shí)驗(yàn)期間小鼠糞便中乳酸菌的變化如表6所示，對(duì)照組小鼠糞便中腸桿菌屬無(wú)明顯變化，實(shí)驗(yàn)期間菌數(shù)無(wú)顯著性變化(ρ>0.05)；實(shí)驗(yàn)組小鼠經(jīng)口給予富硒猴頭菇凍干粉以后，高劑量組小鼠腸道中乳酸菌的數(shù)量增加，達(dá)到顯著水平(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后第3d，實(shí)驗(yàn)組小鼠乳酸菌數(shù)量與對(duì)照相比仍然較多。說(shuō)明富硒猴頭凍干粉對(duì)乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖有一定的促進(jìn)作用。根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布的《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》中“調(diào)節(jié)腸道菌群功能”的判定依據(jù).證實(shí)小鼠經(jīng)口給予富硒猴頭菇粉末21天后，能促進(jìn)小鼠腸道中益生菌的增殖，起到調(diào)節(jié)腸道菌群功能的效果。權(quán)利要求一種制備富硒猴頭菌菇粉末的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)斜面試管培養(yǎng)將分離純化的菌種接種于斜面試管中培養(yǎng)；(2)三角瓶培養(yǎng)將斜面試管培養(yǎng)得到的菌種接種到三角瓶培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(3)發(fā)酵罐培養(yǎng)將三角瓶培養(yǎng)得到的菌種接入發(fā)酵罐培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；(4)富硒猴頭菌菇的栽培在20-27℃向盛有培養(yǎng)基的容器中，接種培養(yǎng)基重量1.0-3.0％的步驟(3)得到的菌種，培養(yǎng)，直到猴頭子實(shí)體長(zhǎng)出；(5)富硒猴頭菌菇粉末的制備將步驟(4)得到的富硒猴頭菌菇干燥、粉碎，得到富硒猴頭菌菇粉末；在步驟(2)-(4)的培養(yǎng)基中均含有亞硒酸鈉。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述的步驟(1)中，所述的斜面試管培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有180-220g的土豆、18-22g的葡萄糖、l_2g的磷酸二氫鉀、0.7-0.8g的硫酸鎂、18-22g的瓊脂，并且所述培養(yǎng)基的pH值為4.5-6；優(yōu)選的，所述的斜面試管培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有200g土豆、20g葡萄糖、lg磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂、20g瓊脂，并且所述培養(yǎng)基的pH值為5.02。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，在所述的三角瓶培養(yǎng)基和發(fā)酵罐培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有，45-55g的麥麩、18-22g的葡萄糖、1.8-2.2g的蛋白胨、1.8-2.2g的酵母粉、1.3-1.7g的磷酸二氫鉀、0.7-0.8g的硫酸鎂、80_120mg的亞硒酸鈉，并且所述培養(yǎng)基的PH值為4.5-6，優(yōu)選的，在三角瓶培養(yǎng)基的每1升液體培養(yǎng)基中含有50g麥麩、20g葡萄糖、2g蛋白胨、2g酵母粉、1.5g磷酸二氫鉀、0.75g硫酸鎂、109.7mg亞硒酸鈉，并且所述培養(yǎng)基的PH值為5.0。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的發(fā)酵罐培養(yǎng)包括一級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)和二級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述的步驟(4)的培養(yǎng)基中含有750-800g的玉米芯、180-220g的麥麩、8_12g的蔗糖、8_10g的石膏和87.76-109.70mg的亞硒酸鈉，優(yōu)選的，所述的培養(yǎng)基中含有780g的玉米芯、200g的麥麩、10g的蔗糖、10g的石膏和109.70mg的亞硒酸鈉。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述的步驟(2)中，三角瓶培養(yǎng)的條件為在24-26°C溫度下，120-160轉(zhuǎn)/分鐘的振動(dòng)速度下，在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)間為5-7天；優(yōu)選的振動(dòng)速度為140轉(zhuǎn)/分鐘。7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)的發(fā)酵培養(yǎng)條件為首先將發(fā)酵罐中的液體培養(yǎng)基滅菌，將滅菌后的培養(yǎng)基冷卻，再將三角瓶培養(yǎng)后的菌種接入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，優(yōu)選的，所述的滅菌條件為在50L氣升式發(fā)酵罐中裝入20L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度為25°C-27pH值為4.5_6，并加入0.04-0.05%培養(yǎng)基重量的食用消泡劑，在14.7X104Pa壓力下，通入蒸汽加熱到115-125°C，保持30-45分鐘。8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的培養(yǎng)條件如下培養(yǎng)溫度為25-26°C，通氣量為10.5V/V*min，壓力保持4.903-7.0845X104Pa,培養(yǎng)4-6天。9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在所述的步驟(4)中的培養(yǎng)條件如下，首先將所述的培養(yǎng)基物料混合均勻后，加入適量的水，其重量份為物料水=12，拌勻裝入聚丙烯塑料袋中滅菌，將滅菌后的培養(yǎng)基放置于無(wú)菌通風(fēng)室中冷卻至24°C-25向培養(yǎng)基接種其總重量的1.7%的液體菌種；放入培養(yǎng)室中培養(yǎng)；溫度保持在25°C-28°C，濕度保持在95%-100%培養(yǎng)80-100天，優(yōu)選的，培養(yǎng)90天。10.一種富硒猴頭菌菇膠囊，該膠囊的內(nèi)容物為權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述方法制備得到的富硒猴頭菌菇粉末。全文摘要本發(fā)明提供了一種制備富硒猴頭菌菇膠囊的方法，該方法包括以下步驟(1)斜面試管培養(yǎng)；(2)三角瓶培養(yǎng)；(3)發(fā)酵罐培養(yǎng)；(4)富硒猴頭菌菇的栽培在20-27℃向盛有培養(yǎng)基的容器中，接種培養(yǎng)基重量1.0-3.0％的步驟(3)得到的菌種，培養(yǎng)，直到猴頭子實(shí)體長(zhǎng)出；(5)富硒猴頭菌菇粉末的制備將步驟(4)得到的富硒猴頭菌菇干燥、粉碎，并且在步驟(1)-(4)的培養(yǎng)基中均含有亞硒酸鈉。本發(fā)明還提供了一種富硒猴頭菌菇膠囊，該膠囊的內(nèi)容物為上述所述方法制得的富硒猴頭菌菇粉末。本發(fā)明得到的富硒猴頭菌菇膠囊具有安全性和有效性高，產(chǎn)品的抑菌效果好和制備方法簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。文檔編號(hào)A61P1/00GK101829159SQ20101019073公開(kāi)日2010年9月15日申請(qǐng)日期2010年6月3日優(yōu)先權(quán)日2010年6月3日發(fā)明者孫自偉,李好,李春如,樊美珍,王偉申請(qǐng)人:樊美珍