專利名稱：酵母葡聚糖注射液提高奶牛口蹄疫疫苗免疫效力的應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于獸用藥物制劑技術領域，涉及水溶性酵母葡聚糖在畜禽方面的應用， 更具體地說是，酵母葡聚糖注射液在提高奶牛口蹄疫疫苗免疫效力方面的應用。
背景技術：
酵母葡聚糖是一種從酵母中提取并精制而成的純天然活性免疫調節劑，能有效地 激活巨噬細胞，并誘導機體產生一系列的免疫應答反應，從而提高機體的免疫功能。此外， 葡聚糖具有清除游離基、抗輻射、抗腫瘤、溶解膽固醇、預防高脂血癥作用及病毒、真菌、細 菌等引起的感染，故廣泛用于醫藥、食品、化妝品、飼料等行業。從酵母細胞壁提取得到的酵母葡聚糖是不溶于水的，水不溶性酵母葡聚糖添加在 飼料中，可促進動物的免疫器官發育，增加淋巴細胞數量，增強體液免疫，對動物具有較好 的防病、治病作用。近年來，通過有關專家的試驗研究，經硫酸化、羧甲基和乙酰化等化學修 飾方式，將水不溶性酵母葡聚糖制成水溶性葡聚糖。水溶性葡聚糖的研制成功，使酵母葡聚 糖不僅能通過口服，也可通過注射途徑給動物應用，這將大大拓寬酵母葡聚糖的應用范圍 和明顯提高其生物利用度。由于水溶性酵母葡聚糖對哺乳動物的特異性和非特異性免疫功能均具有良好的 刺激作用，可提高機體免疫系統的抗病能力，且具有用量少、純天然、無殘留等優點，所以， 水溶性酵母葡聚糖在動物養殖業中將會具有廣闊的應用前景。目前已有羧甲基水溶性酵母 葡聚糖產品的出售，主要作為生物添加劑應用于化妝品的生產，但尚未見到有關將水溶性 酵母葡聚糖作為注射液給哺乳動物應用的報道，更沒有將其作為免疫增強劑用在提高奶牛 口蹄疫疫苗免疫效力的研究報道。口蹄疫是口蹄疫病毒引起的急性、熱性、高度接觸性傳染病，由于該疫病具有快 速、大面積傳播的特性，每次流行都造成較大的經濟損失，而且人畜共患，并且有較強的變 異性，因此引起世界各國的高度重視，國際獸疫局將其列為A類傳染病的首位。我國也將其 列為一類傳染病的第一位。按照我國政府有關規定，如發現本病的流行，需采取撲殺病畜、 銷毀病尸和封鎖、隔離、消毒疫區等一系列綜合性防疫措施。根據國內外動物疫病防疫的實踐經驗，結合我國的具體國情，應用疫苗進行預防 接種，是提高動物疫病防疫水平最為重要的措施之一。口蹄疫油乳劑滅活苗不含活病毒，具 有安全性好、免疫持續期長等優點，是預防豬、牛、羊等口蹄疫流行的有效手段。但是該疫苗 是滅活苗，僅能刺激機體產生體液免疫，對細胞免疫刺激作用很小，其免疫效果受到一定影 響。本發明主要目的是在現有疫苗免疫的基礎上，給牛接種口蹄疫油乳劑滅活苗的同 時，將酵母葡聚糖增強劑通過注射途徑給牛應用，旨在通過酵母葡聚糖的免疫增強作用來 啟動和調節牛自身的非特異性免疫功能，并特異地提高牛口蹄疫滅活苗的抗體水平，從而 增強該疫苗的免疫效力，最終通過牛自身免疫抵抗力的增強和滅活苗免疫效果的提高，來 較好地預防口蹄疫在我國的發生和流行，這對防止口蹄疫這一重大疫病的流行具有十分重要的實際生產意義。本發明通過開發新型酵母葡聚糖免疫增強劑注射液，不僅可增強牛口蹄疫滅活苗 的免疫效力，也可為增強牛用其他疫苗的免疫效力奠定基礎，進而提高牛群對疫病的抵抗 能力，以保障養牛業的健康發展，同時也可彌補現有佐劑的不足，減少動物性食品的化學藥 物殘留，這對保障食品安全和人類健康，具有重要的現實意義。

發明內容
本發明公開了酵母葡聚糖注射液在增強奶牛細胞免疫功能方面的應用，其中的酵 母葡聚糖注射液為2% 6%羧甲基酵母葡聚糖水溶液。本發明所述的增強奶牛細胞免疫功能指的是提高奶牛的淋巴細胞轉化率。本發明進一步公開了酵母葡聚糖注射液在提高奶牛口蹄疫滅活苗抗體水平方面 的應用，其中的酵母葡聚糖注射液為2 % 6 %的羧甲基葡聚糖水溶液。本發明主要目的是在現有疫苗免疫的基礎上，給奶牛接種口蹄疫油乳劑滅活苗的 同時，將酵母葡聚糖增強劑通過后海穴或頸部皮下途徑給奶牛注射，旨在通過酵母葡聚糖 的免疫增強作用來啟動和調節牛自身的非特異性免疫功能，并特異地提高奶牛口蹄疫滅活 苗的抗體水平，從而增強該疫苗的免疫效力，最終通過牛自身免疫抵抗力的增強和滅活苗 免疫效果的提高，來較好地預防口蹄疫在我國的發生，這對防止口蹄疫這一重大疫病的流 行具有十分重要的實際生產意義。本發明在給奶牛注射口蹄疫油乳劑滅活苗的同時，注射適合劑量的酵母葡聚糖溶 液可增強滅活苗對體液免疫的刺激作用，具有安全性好、免疫持續期延長等特點，可以更有 效的起到預防牛口蹄疫流行的作用。本發明通過開發新型酵母葡聚糖免疫增強劑，不僅可增強牛口蹄疫滅活苗的免疫 效力，也可為增強牛用其他疫苗的免疫效力奠定基礎，進而提高牛群對疫病的抵抗能力，以 保障養牛業的健康發展，同時也可彌補現有滅活苗對激活細胞免疫功能較弱的不足，減少 動物性食品的化學藥物殘留，這對保障食品安全和人類健康，具有重要的現實意義。本發明的具體實驗數據及結果如下試驗一、酵母葡聚糖注射液對奶牛細胞免疫功能的影響本試驗研究了不同濃度的水溶性酵母葡聚糖注射液對奶牛的安全性和細胞免疫 功能的影響，為酵母葡聚糖作為免疫增強劑在動物臨床上應用提供科學依據。1材料與方法1.1 材料1. 1. 1酵母葡聚糖羧甲基酵母葡聚糖(購于安琪酵母股份有限公司)。1. 1.2試驗動物育成母奶牛(體重400 450kg/頭)，15頭，天津某奶牛場飼養 的臨配種前的育成母奶牛。2. 2 方法1. 2. 1酵母葡聚糖注射液的配制將羧甲基葡聚糖用注射用水分別配制成2% 6%的水溶液備用。1.2. 2試驗分組將15頭健康育成母奶牛分成5組，每組3頭，1 4組按120mg/ 頭、200mg/頭、280mg/頭、360mg/頭劑量，分別經后海穴注射5 6ml/頭酵母葡聚糖注射液；第4組，僅注射生理鹽水作為空白對照組。1. 2. 3臨床觀察奶牛注射酵母葡聚糖注射液后，觀察它們的臨床表現和體溫變 化，并詳細記錄。1.2. 4采血和檢測按照常規方法飼養奶牛。奶牛在試驗前和注射后的4d、8d、 12d靜脈采血，加肝素制成抗凝血，用MTT法測定淋巴細胞的轉化率。2結果與分析2. 1酵母葡聚糖注射液對奶牛的安全性在奶牛試驗前一天和注射藥物后，對所有被試牛連續測溫4d，其體溫均正常；注 射部位無腫脹、發炎、化膿等異常反應；飲食、活動如試驗前，無明顯變化。說明奶牛注射 360mg/頭大劑量的酵母葡聚糖注射液是安全的。2. 2酵母葡聚糖注射液對奶牛淋巴細胞轉化率的影響在奶牛試驗前、藥物注射后的4d、8d、12d，測定各組外周血淋巴細胞轉化率試驗結 果見表1-1。表1-1表明在注射第4d時，4組所有奶牛淋巴細胞轉化值均比注射前有所上 升，4組之間差異不顯著；在注射第8d時，注射酵母葡聚糖注射液的4組奶牛淋巴細胞轉化 值達到最高峰，其中200mg/頭劑量組淋巴細胞轉化值最高，與注射生理鹽水的空白對照組 比較差異極顯著；在注射后12d，所有注射葡聚糖免疫增強注射劑奶牛的淋巴細胞轉化值 均出現下降，略高于試驗前的水平，4組之間差異不顯著。表1-1注射不同劑量羧甲基葡聚糖免疫增強注射劑奶牛的淋巴細胞轉化值
權利要求
1.酵母葡聚糖注射液在增強奶牛細胞免疫功能方面的應用，其中的酵母葡聚糖注射液 為2% 6%羧甲基酵母葡聚糖水溶液。
2.權利要求1所述的應用，其中的增強奶牛細胞免疫功能指的是提高奶牛的淋巴細胞轉化率。
3.酵母葡聚糖注射液在提高奶牛口蹄疫滅活苗抗體水平方面的應用，其中的酵母葡聚 糖注射液為2% 6%的羧甲基葡聚糖水溶液。
全文摘要
本發明公開了酵母葡聚糖注射液在提高奶牛口蹄疫疫苗免疫效力方面的應用。同時本發明也公開了酵母葡聚糖注射液在增強奶牛細胞免疫功能方面的應用，其中的酵母葡聚糖注射液為2％～6％羧甲基酵母葡聚糖水溶液。使用本發明制備的酵母葡聚糖注射液，安全、無不良反應，能有效增強奶牛機體細胞免疫功能和提高接種口蹄疫滅活苗奶牛的抗體水平，增強動物抗病能力。
文檔編號A61K31/716GK102048686SQ201010581330
公開日2011年5月11日 申請日期2010年12月9日 優先權日2010年12月9日
發明者任衛科, 孫英峰, 張健, 張莉, 李秀麗, 池晶晶, 王東, 王建國, 王成龍, 王英珍, 鄢明華, 韓偉 申請人:天津市畜牧獸醫研究所