專利名稱：一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種花椒提取物。
背景技術：
解脲支原體及人型支原體引起的泌尿生殖道感染，在性傳播疾病中發病率最高， 不僅可以引起廣泛的非淋菌性生殖道感染，如前庭大腺炎、腔道炎、宮頸炎等下生殖道感 染，也可引起子宮內膜炎、輸卵管炎、卵巢炎、盆腔炎等上生殖道感染，導致不孕、不育及胎 兒宮內感染、流產等不良后果。男性可并發前列腺炎、附睪炎、女性宮頸與輸卵管炎等。由于 支原體缺乏細胞壁，所以青霉素、β -內酰胺類藥物等干擾細胞壁合成的抗生素治療基本無 效；支原體對影響細胞蛋白合成的抗生素敏感，如四環素、喹諾酮類以及大環內酯類藥物， 所以臨床上一般將這3類藥物作為治療支原體感染的首選藥。而近年越來越多的報道顯示解脲支原體(UU)對此3類藥物的耐藥性有逐年增 加的趨勢，由于耐藥性的出現，抗生素的療效顯著下降，例如解脲支原體對四環素耐藥率 1996年僅為8. 6%，2000年則上升為46. 4%，2006年12月上升為68. 3 %。環丙沙星的耐 藥率為80%，對左氧氟沙星耐藥率在26. 8% 48. 3%之間。對大環內酯類藥物如紅霉素維 持在30% 50%的水平。同類藥物羅紅霉素和阿奇霉素的療效如今也不容樂觀。對羅紅 霉索耐藥水平最高達到77. 8%，而阿奇霉素為66. 7%。臨床上持續性、復發性泌尿生殖道 感染及耐藥問題已經成為日益常見和棘手的問題，按目前的發展趨勢，抗生素在對耐藥解 脲支原體感染疾病的治療上，將面臨無藥可醫的局面。同樣的人型支原體也存在著對抗生 素類藥物的耐藥性逐年增加的問題。傳統中醫藥在此類疾病的治療上有獨特的優勢和很好的療效，其特色在于強調整 體，辨證論治。中醫藥治療支原體感染雖有很多優勢，但大多停留在臨床大處方用藥上，且 在治療上存在著病程長、療程長、服用不便之弊，因此目前尚無無此類藥物開發。

發明內容
本發明是要解決目前解脲支原體和人型支原體對抗生素的耐藥性增加，而導致治 療效果差的問題，提供一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物。本發明具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物是由以下方法提 取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為30 55°C，分離溫 度為25 45°C，萃取壓力為15 35MPa，分離壓力為4 6MPa，CO2流量為4 12L/h，萃 取時間為1 2小時，即得到花椒提取物。本發明的具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物的優點如下1、本發明的花椒提取物通過安全性毒理學實驗可知該產品安全無毒副作用；2、使用以本發明的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對感染解脲支原體 和人型支原體標準株的小鼠進行治療，治療10天后，感染率由原來的100%降低到20%，由此可知，本發明的花椒提取物具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用；3、使用以本發明的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對感染解脲支原體 耐藥株的小鼠進行治療，治療10天后，感染率由原來的100%降低到20%，而陽性對照組 (環丙沙星栓)的感染率僅降低到80% ；使用以本發明的花椒提取物為原料的花椒提取物 中藥制劑對感染人型支原體耐藥株的小鼠進行治療，治療10天后，感染率由原來的100% 降低到20%，而陽性對照組(環丙沙星栓)的感染率僅降低到90%;由此可知，本發明的花 椒提取物具有抗耐藥解脲支原體和耐藥人型支原體感染作用；4、使用以本發明的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑進行止癢和抗炎作 用研究，與空白對照相比有顯著性差異，說明花椒提取物具有止癢和抗炎作用。
具體實施例方式本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的 任意組合。
具體實施方式
一本實施方式的具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒 提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫 度為30 55°C，分離溫度為25 45°C，萃取壓力為15 !35MPa，分離壓力為4 6MPa，CO2 流量為4 12L/h，萃取時間為1 2小時，即得到花椒提取物。本實施方式所述的花椒提取物可以與藥學上可接受的載體或賦形劑制成口服 (丸劑、顆粒劑、口服液、片劑、膠囊或軟膠囊)、外用(灌洗劑、凝膠劑、栓劑、噴霧劑或泡騰 劑)或無菌注射液的劑型。其中可接受的載體為可可豆油、半合成甘油脂肪酸酯類、甘油、 明膠、泊洛沙姆、羊毛脂、硬脂酸聚烴氧GO)酯、蜂蠟、半合成甘油脂肪酸酯類、可可豆脂、 香果脂類、氫化油類、聚乙二醇類、泊洛沙姆、殼聚糖、吐溫、卡波姆類、微晶纖維素、糊精、淀 粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、環糊精、β -環糊精等。本實施方式的花椒提取物通過安全性毒理學實驗可知該產品安全無毒副作用；使 用以本實施方式的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對感染解脲支原體和人型支 原體標準株的小鼠進行治療，治療10天后，感染率由原來的100%降低到20%，由此可知， 本實施方式的花椒提取物具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用；使用以本實施方式的 花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對感染解脲支原體耐藥株的小鼠進行治療，治療 10天后，感染率由原來的100%降低到20%，而陽性對照組(環丙沙星栓)的感染率僅降 低到80% ；使用以本實施方式的花椒提取物為原料的花椒提取物中藥制劑對感染人型支原 體耐藥株的小鼠進行治療，治療10天后，感染率由原來的100%降低到20%，而陽性對照組 (環丙沙星栓)的感染率僅降低到90 % ；由此可知，本實施方式的花椒提取物具有抗耐藥解 脲支原體和耐藥人型支原體感染作用；使用以本實施方式的花椒提取物為原料的花椒提取 物中藥制劑進行止癢和抗炎作用研究，與空白對照相比有顯著性差異，說明花椒提取物具 有止癢和抗炎作用。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是萃取溫度為35 50°C。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一不同的是萃取溫度為40 45°C。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一不同的是萃取溫度為40°C。其 它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是分離溫度為 30°C。其它與具體實施方式
一至四之一相同。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是分離溫度為 35 40°C。其它與具體實施方式
一至四之一相同。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 20 30MPa。其它與具體實施方式
一至六之一相同。
具體實施方式
八本實施方式與具體實施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 22 ^MPa。其它與具體實施方式
一至六之一相同。
具體實施方式
九本實施方式與具體實施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 25MPa。其它與具體實施方式
一至六之一相同。
具體實施方式
十本實施方式與具體實施方式
一至六之一不同的是萃取壓力為 33MPa。其它與具體實施方式
一至六之一相同。
具體實施方式
十一本實施方式與具體實施方式
一至十之一不同的是分離壓力 為5MPa。其它與具體實施方式
一至十之一相同。
具體實施方式
十二 本實施方式與具體實施方式
一至十一之一不同的是C02流量 為6 10L/h。其它與具體實施方式
一至十一之一相同。
具體實施方式
十三本實施方式與具體實施方式
一至十一之一不同的是C02流量 為8L/h。其它與具體實施方式
一至十一之一相同。
具體實施方式
十四本實施方式與具體實施方式
一至十三之一不同的是萃取時 間為1.5小時。其它與具體實施方式
一至十三之一相同。
具體實施方式
十五本實施方式的具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花 椒提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界(X)2萃取釜中，萃取 溫度為40V,分離溫度為30°C，萃取壓力為33MPa，分離壓力為5MPa，0)2流量為8L/h，萃取 時間為1. 5小時，即得到花椒提取物。按照重量份數比稱取20份本實施方式提取的花椒提取物與等量吐溫80混勻，得 混合物，另取80份聚氧乙烯單硬脂酸酯(S40)，置水浴上加熱使其溶化，加入到上述混合物 中，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，即得到花椒提取物中藥制劑。將制得的花椒提取物中 藥制劑用50°C水浴溶化，然后再稀釋至相應濃度，進行試驗。為說明本實施方式制備的花椒提取物的有效性和安全性，進行以下試驗l、Balb/c小鼠生殖道解脲支原體標準株的感染及花椒提取物中藥制劑干預試驗， 具體試驗方法如下a、取Balb/c小鼠的陰道分泌物進行培養，選取解脲支原體陰性者，正 常喂養，適應環境3天；b、小鼠頸部皮下注射苯甲酸雌二醇0. 2mg/次/只，每周一次，連續 四次；c、在第二周注射雌性激素的同時，用微量移液器吸取解脲支原體標準株20yL，置入 小鼠陰道約0. 5cm處，將解脲支原體標準株菌液注入小鼠陰道，每天接種一次，連續3天，每 次接種菌濃度為5Xl(f(XU/mL ；感染一周后，取陰道分泌物培養，解脲支原體陽性者，視為 造模成功；解脲支原體陰性者，繼續接種菌株，量同前，1周后進行UU(解脲支原體)培養， 所有培養基均變為粉紅色，顯示造模成功；d、將造模成功小鼠隨機分為模型組、治療組、陽性對照組，每組10只，另設10只不感染解脲支原體的正常對照組，每天給予相應的藥物治 療，連續10天，給藥M小時后，取陰道分泌物進行解脲支原體培養，觀察藥物對解脲支原體 感染的治療作用。實驗結果見表1。正常對照組給予相應的空白基質；模型對照組給予相應的空白基質；陽性對照組給予環丙沙星栓；治療組陰道給予上述花椒提取物中藥制劑40mg (其中含相當于花椒0. 2g的花椒 提取物)。表1小鼠生殖道解脲支原體的感染及花椒提取物中藥制劑干預試驗結果
權利要求
1.一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物，其特征在于具有抗解 脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉 末狀，裝入超臨界(X)2萃取釜中，萃取溫度為30 55°C，分離溫度為25 45°C，萃取壓力為 15 35MPa，分離壓力為4 6MPa，CO2流量為4 12L/h，萃取時間為1 2小時，即得到 花椒提取物。
2.根據權利要求1所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取溫度為35 50°C。
3.根據權利要求1所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取溫度為40 45°C。
4.根據權利要求1或2所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提 取物，其特征在于分離溫度為30°C。
5.根據權利要求1或2所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提 取物，其特征在于分離溫度為35 40°C。
6.根據權利要求5所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取壓力為20 30MPa。
7.根據權利要求5所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取壓力為25MPa。
8.根據權利要求6所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于分離壓力為5MPa。
9.根據權利要求8所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于(X)2流量為6 10L/h。
10.根據權利要求9所述的一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取 物，其特征在于萃取時間為1. 5小時。
全文摘要
一種具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用的花椒提取物，涉及一種花椒提取物。本發明是要解決目前解脲支原體和人型支原體對抗生素的耐藥性增加，而導致治療效果差的問題。本發明的花椒提取物是由以下方法提取得到的將花椒粉碎至粉末狀，裝入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為30～55℃，分離溫度為25～45℃，萃取壓力為15～35MPa，分離壓力為4～6MPa，CO2流量為4～12L/h，萃取時間為1～2小時，即得到花椒提取物。本發明的花椒提取物無毒，具有抗解脲支原體和人型支原體感染作用及抗耐藥解脲支原體和耐藥人型支原體感染作用。應用于抗支原體感染領域。
文檔編號A61K36/758GK102058709SQ201110022658
公開日2011年5月18日 申請日期2011年1月20日 優先權日2011年1月20日
發明者潘五九, 王偉明 申請人:黑龍江省中醫研究院