專利名稱：一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法
技術領域：
本發明屬于中藥有效部位群的提取純化技術領域，更具體涉及一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，該方法能有效提取出空心蓮子草中的總黃酮和總皂苷。
背景技術：
2S 胃〒胃[Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb]力 禾斗 (Amaranthaceae)蓮子草屬(Alternanthera)多年生宿根草本植物，曾收載于《中國藥典》 1977年版一部，具有清熱解毒、涼血利尿的功效。近20年的文獻報道，空心蓮子草具有抗病毒、調節免疫、抗肝損傷等作用，臨床上用于治療蕁麻疹、流行性感冒、乙型腦炎、流行性出血熱等病毒性疾患。蓮子草屬植物含有多種化學成分，迄今已從中分離鑒定的化學成分包括三萜類、黃酮類、生物堿、內酰胺、有機酸類、植物留醇類、氨基酸和無機鹽等。本實驗室近20多年對空心蓮子草的抗病毒研究表明，乙酸乙酯部位和正丁醇部位為主要活性部位。 因此，開發空心蓮子草有效部位群提取物具有重要意義。目前關于空心蓮子草的藥效物質的提取純化方法僅收載于1977年版《中國藥典》，其方法為水提醇沉，并用醋酸鉛沉淀，再用硫化氫脫鉛。此方法工藝落后，質量不可控， 并且非常容易引起鉛中毒，因此日后的藥典中并未將此制備工藝收錄其中。目前關于空心蓮子草的藥效物質的提取純化方法尚未見報道，而國內外有效抗病毒藥物較少，抗病毒藥物仍是國內外學者研究的熱點。空心蓮子草的自然資源十分豐富，具有廣譜抗病毒作用，而且積累了一定臨床用藥經驗，因此其開發應用前景廣闊。

發明內容
針對現有技術中存在的不足，本發明的目的在于提供了一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法。為了實現上述目的，本發明采用的技術措施如下一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，其步驟如下a.[Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb] MM (H 空心蓮子草干燥后粉碎成段，長度約1cm)，每次按照其重量的6-10倍加入50-70ν/ν%乙醇先浸泡0. 5-2小時，再加熱回流提取1-3小時后過濾得乙醇提取液，提取1-3次后合并乙醇提取液；b.將合并的乙醇提取液減壓回收乙醇，然后將剩余藥液用蒸餾水稀釋至以生藥量計濃度為0. 1-0. 2g/ml，靜置過濾后，得到濾液；c.濾液以每小時0.5-3倍柱床體積的流速通過徑高比為1 4-1 12的DlOl大孔吸附樹脂柱(樹脂重量藥材重量=1 0.4-1 0.6)，然后先用2-5倍樹脂質量的水以每小時0. 5-3倍柱床體積的流速進行洗脫并棄去水洗液，再用2-4倍柱床體積的10-30v/
的乙醇以每小時0. 5-3倍柱床體積的流速進行洗脫并棄去醇洗液，最后再用2-6倍柱床體積的40-90ν/ν%的乙醇以每小時0. 5-3倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質并收
3集此部分乙醇洗脫液；d.將步驟C收集的乙醇洗脫液進行減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為 1. 01-1. 10，濃縮液經噴霧干燥，即得到空心蓮子草有效部位群的提取物。上述提取方法的優選條件為步驟a中，每次按照藥材重量的6-10倍加入60V/V%乙醇浸泡1小時，然后回流提取，提取次數為3次，第一次為2小時，第二次為1小時，第三次為1小時；步驟b中，將合并的乙醇提取液減壓回收，然后將剩余藥液稀釋至以生藥量計濃度為 0. 15g/ml ；步驟c中，首先將濾液以每小時2倍柱床體積的流速通過徑高比為1 8的DlOl 大孔樹脂進行吸附，然后用4. 5倍樹脂質量的水以每小時2倍柱床體積的流速洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積的20v/v%的乙醇以每小時2倍柱床體積的流速洗脫并棄去醇洗液，最后用4倍柱床體積的70v/v%的乙醇以每小時2倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質并收集此部分乙醇洗脫液；步驟d中，噴霧干燥條件為進風口溫度為175°C，出風口溫度為85°C，霧化盤轉速為20000轉/分鐘。利用本發明方法制備得到的提取物中總黃酮的含量可達3-5wt%，轉移率為 50-70% ；總皂苷的含量可達15-18wt%，轉移率為40-60%。與現有技術相比，本發明方法具有以下優點1.本發明采用乙醇作為空心蓮子草的提取溶媒，提取液用DlOl大孔吸附樹脂純化得到總黃酮和總皂苷提取物，工藝流程簡單，有效物質含量較高，生產成本低，節約了能源，控制了環境污染，減少了生產中的安全隱患，符合中藥產業現代化的要求。2.本發明采用DlOl大孔吸附樹脂技術提取純化有效部位群，具有工藝簡單，成本低的優點，樹脂可反復使用，適合工業生產的特點。與77年版《中國藥典》的鉛鹽沉淀法相比，用藥更安全，質量更可控。而且本發明方法中的相關技術參數進行了細致周密的考察， 優選出最佳條件，并進行了中試驗證，證明可過渡到產業化，提高了有效物質的純度。
具體實施例方式下面結合具體的實施例對本發明方法做進一步的詳細說明。實施例1一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，步驟如下a、稱取空心蓮子草藥材，按照其重量的6-10倍加入濃度為60v/v%的乙醇先浸泡 Ih,然后回流提取，共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；第一次提取時60V/V%的乙醇加入量為藥材重量的10倍，第二次為藥材重量的8 倍，第三次為藥材重量的6倍；第一次回流提取的時間為2小時，第二和第三次回流提取的時間均為1小時。b、將乙醇提取液減壓回收乙醇，剩余的藥液稀釋至以生藥量計濃度為0. 15g/ml, 靜置后過濾，得到濾液；C、濾液首先以每小時2倍柱床體積的流速通過徑高比為1 8的DlOl大孔吸附樹脂柱進行吸附(樹脂重量藥材重量=1 0. 5)，先用4. 5倍樹脂質量的水以每小時2倍柱床體積的流速進行洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積的20v/v%的乙醇以每小時2 倍柱體積的流速洗脫并棄去醇洗液，最后再用4倍柱床體積的70v/v%的乙醇以每小時2倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質并收集此部分乙醇洗脫液；d、將步驟c收集的乙醇洗脫液進行減壓濃縮回收乙醇，藥液濃縮至相對密度為 1. 05，濃縮液經噴霧干燥，得到空心蓮子草有效部位群提取物；噴霧干燥條件為進風口溫度為175°C，出風口溫度為85°C，霧化盤轉速為20000
轉/分鐘。得到的提取物中總黃酮的含量達5wt%，轉移率為65% ；總皂苷的含量達17wt%， 轉移率為57%。實施例2中試放大試驗一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，步驟如下a、稱取12Kg空心蓮子草藥材，每次加6-10倍藥材重量的60V/V%乙醇先浸泡1小時后，再加熱回流提取，一共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；第一次提取時60V/V%乙醇加入量為藥材重量的10倍，第二次為藥材重量的8倍， 第三次為藥材重量的6倍；第一次回流提取的時間為2小時，第二和第三次回流提取的時間均為1小時；b、將乙醇提取液減壓回收乙醇，剩余藥液稀釋至體積為80L(以生藥量計濃度為 0. 15g/ml)，抽濾得上樣藥液；C、將MKg藥用級DlOl型大孔吸附樹脂用適量乙醇浸泡，濕法裝柱，處理后備用。 以2Bv/h的加樣流速進行吸附，樹脂床徑高比為1 8，吸附完畢后，用4. 5倍樹脂質量的蒸餾水以2Bv/h的流速洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積20v/v%的乙醇以每小時2倍柱床體積流速進行洗脫并棄去醇洗液，最后再用4倍樹脂柱體積的70v/v%乙醇以2Bv/h的流速進行洗脫，收集此部分乙醇洗脫液；d、將步驟c收集的乙醇洗脫液減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為1. 05，然后將濃縮液噴霧干燥(進風口溫度為175°C，出風口溫度為85°C，霧化盤轉速為20000轉/分鐘)，得到空心蓮子草有效部位群提取物。采用紫外-可見分光光度法測量提取物中有關物質的含量，計算轉移率(轉移率 =提取物中的含量/原藥材中的含量X100% )和收膏率(收膏率=提取物總重量/原藥材總重量X 100% )o采用上述方法，取12Kg空心蓮子草藥材，共3批，進行空心蓮子草有效部位群提取純化中試放大試驗，結果見下表。中試試驗結果
權利要求
1.一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，其步驟如下a.稱取空心蓮子草藥材，每次按照其重量的6-10倍加入50-70v/v%乙醇先浸泡0.5-2 小時，再加熱回流提取1-3小時后過濾得乙醇提取液，提取1-3次后合并乙醇提取液；b.將合并的乙醇提取液減壓回收乙醇，然后將剩余藥液用蒸餾水稀釋至以生藥量計濃度為0. 1-0. 2g/ml，靜置過濾后，得到濾液；c.濾液以每小時0.5-3倍柱床體積的流速通過徑高比為1 :4-1 12的DlOl大孔吸附樹脂柱，然后先用2-5倍樹脂質量的水以每小時0. 5-3倍柱床體積的流速進行洗脫并棄去水洗液，再用2-4倍柱床體積的10-30V/V%的乙醇以每小時0. 5-3倍柱床體積的流速進行洗脫并棄去醇洗液，最后用2-6倍柱床體積的40-90V/V%的乙醇以每小時0. 5-3倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質并收集此部分乙醇洗脫液；所述DlOl大孔吸附樹脂柱中樹脂重量藥材重量=1 0. 4-1:0. 6 ；d.將步驟c收集的乙醇洗脫液進行減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為 1. 01-1. 10，濃縮液經噴霧干燥，即得到空心蓮子草有效部位群的提取物。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟d中，噴霧干燥條件為進風口溫度為175°C，出風口溫度為85°C，霧化盤轉速為20000轉/分鐘。
3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟a中，每次按照藥材重量的6-10倍加入60v/v%乙醇先浸泡1小時，然后加熱回流提取，提取次數為3次，第一次為2小時，第二次為1小時，第三次為1小時。
4.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟b中，將合并的乙醇提取液減壓回收，然后將剩余藥液稀釋至以生藥量計濃度為0. 15g/ml。
5.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述步驟c中，首先將濾液以每小時2倍柱床體積的流速通過徑高比為1 :8的DlOl大孔樹脂進行吸附，然后用4. 5倍樹脂質量的水以每小時2倍柱床體積的流速洗脫并棄去水洗液，再用2倍柱床體積的20v/v%的乙醇以每小時2倍柱床體積的流速洗脫并棄去醇洗液，最后用4倍柱床體積的70v/v%的乙醇以每小時2倍柱床體積的流速洗脫樹脂上的有效物質并收集此部分乙醇洗脫液。
全文摘要
本發明公開了一種空心蓮子草有效部位群提取物的制備方法，其步驟為1、取空心蓮子草藥材用乙醇回流提取；2、將醇提液減壓回收，并將藥液稀釋后過濾；3、濾液通過D101大孔吸附樹脂柱吸附并用蒸餾水和不同濃度的乙醇洗脫；4、將洗脫液減壓回收，濃縮至相對密度1.01-1.10，干燥即得。本發明得到空心蓮子草有效部位群提取物產品中總黃酮含量可達3-5wt%，轉移率為50-70%；總皂苷含量可達15-18wt%，轉移率為40-60%。本發明所得有效部位群提取物的制備工藝國內外未見相關資料報道。其提取純化工藝簡單，有效物質含量較高，降低了生產成本，節約了能源，減少了生產中的安全隱患，符合中藥產業現代化的要求。
文檔編號A61P31/12GK102274254SQ201110222188
公開日2011年12月14日 申請日期2011年8月4日 優先權日2011年8月4日
發明者劉國慶, 劉焱文, 葉曉川, 張衛元, 張周菊, 李森, 陳樹和 申請人:武漢回盛生物科技有限公司