專利名稱：甾體生物堿化合物，其藥物組合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物技術領域，具體地，涉及具有抑制膽堿酯酶活性的留體生物堿類化合物，含有該類化合物的藥物組合物，該類化合物及其藥物組合物在制備抑制膽堿酯酶的藥物中的應用。
背景技術：
隨著世界人口平均壽命的逐年增加，老年性癡呆癥的發病率也隨著迅速上升，老年癡呆癥中有50% -70%為阿爾茨海默氏病(AD)，阿爾茨海默氏癥又稱早老年性癡呆癥， 患者的腦功能逐漸率退，出現記憶力、抽象思維能力和語言表達能力減退、行動不便和其它功能性障礙，影響神經系統功能，最終導致死亡。AD是一種以進行性認知和記憶力損傷為主的中樞神經系統退行性疾病，估計全球世界阿爾茨海默氏病發病人數高達1200多萬。在發達國家此病是繼心血管病和腫瘤之后引起死亡的主要疾病。治療AD的藥物主要有膽堿能類藥物、神經細胞代謝增強劑、抗氧化劑、鈣離子拮抗劑、神經生長因子、雌激素、抗炎藥、抗β淀粉樣蛋白藥物等。目前臨床上治療該病最成功的方法就是通過提高中樞神經系統內膽堿能神經遞質——乙酰膽堿的水平，改善 AD病人的癥狀。其中針對的通過抑制AChE對乙酰膽堿的降解作用而提高腦內的乙酰膽堿的水平，是改善癥狀的有效途徑。臨床上有效的藥物如他克林(Cognex，tacrine), 安理申(Aricept, donepezil),艾斯能(Exelon, rivastigmine),力口蘭他敏(Reminyl, galantamine)和石杉堿甲(HupA)均為乙酰膽堿酯酶抑制劑，它們能有效升高腦內乙酰膽堿水平，使人的認知功能得以改善2。而作為乙酰膽堿酯酶抑制劑的著名天然產物石杉堿甲，其藥效得到了臨床的充分肯定，在此基礎上中國科學院上海藥物研究所合成一系列石杉堿甲的衍生物，發現了一個新型的抗老年癡呆的治療藥物“希普林”，目前在歐洲進入了三期臨床，預計2-3年以后可以得到批準上市。可逆或不可逆地抑制乙酰膽堿酯酶(cholinesterase AChE)從而延緩乙酰膽堿分解的化合物稱為膽堿酯酶抑制劑，又稱抗乙酰膽堿酯酶藥或間接膽堿能激動劑。膽堿酯酶抑制劑能抑制AChE，因而用途較廣泛1.抑制活性物質對受體區ACh的濃度因AChE的失活而增加，對肌肉的刺激隨之增強。膽堿酯酶抑制劑用于治療重癥肌無力和青光眼，由于作用持續時間較長，在治療上優于膽堿能激動劑。2.膽堿能神經傳遞的生物化學膽堿能神經內中樞神經沖動是通過動作電位傳導的，Na+和K+是神經傳遞所涉及的重要離子。一旦接受神經沖動，ACh便從膽堿神經末梢的貯藏突觸囊泡中釋放出來。隨后人Ch與突觸后膜上的受體、運動終板或神經肌接頭結合，從而改變接頭后膜的通透性，使興奮所必需的離子得以流動，由此實現沖動的傳遞。因此新型膽堿酯酶抑制劑的發現，對開發神經系統疾病治療藥物和天然殺蟲農藥，具有重要的意義。神經生長因子(nerve growth factor, NGF)的神經營養作用，在胚胎發育的一定時期內，為效應神經元生存所必須。體外實驗證實，如果培養液中不加NGF，神經細胞即不能長出軸突，也不能存活。NGF及其受體也廣泛分布于中樞神經系統，由海馬和腦皮質產生的NGF可通過膽堿能神經逆行運輸至前腦基底核，維持膽堿能神經元的存活和功能。在胚胎發育早期，中樞NGF的含量決定膽堿能神經的密度。在無膽堿能神經支配的小腦區和下丘腦， NGF含量也較高，表明除膽堿能神經外，NGF對其他類神經元也有營養作用。基于這些認識， 本發明試圖通過發現對膽堿酯酶抑制或激活作用的活性物質，發現對NGF具有活性的天然有機化合物。

發明內容
本發明旨在提供新型的留體生物堿，該類生物堿具有抑制膽堿酯酶的活性。另一目的還在于提供以該類生物堿為活性成分組成的藥物組合物，它們的制備方法，及其它們在制備抑制膽堿酯酶的藥物中的應用。本發明的上述目的是由下述的技術方案得以實現的如下結構式(I)所示的甾體生物堿化合物，
權利要求
1.如下結構式(I)所示的留體生物堿化合物，
2.如權利要求1所述的留體生物堿化合物，為下述結構式所示的化合物1和2，
3.抑制膽堿酯酶的組合物，其含有權利要求1或2任一項的留體生物堿化合物作為有效成分，至少還包含一種藥學上可接受的載體。
4.權利要求1或2所述的任一項留體生物堿化合物在制備抑制膽堿酯酶的藥物中的應用。
5.權利要求3所述的抑制膽堿酯酶的組合物在制備抑制膽堿酯酶的藥物中的應用。
6.權利要求1或2所述的任一項留體生物堿化合物的制備方法，取毛葉板凳果 P. axillaris var. stylosa植物，晾干粉碎，用95%甲醇加熱回流提取3次，合并提取液后減壓回收，得甲醇浸膏；分5次向甲醇浸膏中加入3% HCl水溶液捏溶，酸水溶解部分加入 5% NaOH水溶液，調至pH 9后，靜置過夜，用氯仿萃取5次，回收溶劑，得生物堿部分Fr. A， 將生物堿部分Fr. A浸膏以硅膠拌樣，進行硅膠柱層析，氯仿-甲醇溶劑系統，1 0至0 1 梯度洗脫，經過TLC檢測，合并相同部分，得到四個餾分Fr. A1-A4 ；餾分Fr. Al利用硅膠柱色譜，氯仿-甲醇溶劑系統、氯仿-丙酮溶劑系統、石油醚-丙酮溶劑系統，氧化鋁柱色譜， 以石油醚-丙酮-二乙胺系統反復梯度洗脫，之后經葡聚糖凝膠LH-20柱色譜純化，得到化合物1 ；餾分Fr. A2經硅膠柱色譜，石油醚-丙酮-二乙胺系統、石油醚-丙酮系統和葡聚糖凝膠LH-20柱色譜反復層析，得化合物2。
全文摘要
具有抑制膽堿酯酶活性的式(I)的甾體生物堿類化合物，含有該類化合物的藥物組合物，該類化合物及其藥物組合物在制備抑制膽堿酯酶的藥物中的應用，
文檔編號A61P21/04GK102351934SQ20111023556
公開日2012年2月15日 申請日期2011年8月16日 優先權日2011年8月16日
發明者吳桂生, 周琳, 孫赟, 羅懷容, 胡映開, 邱明華 申請人:中國科學院昆明植物研究所