專利名稱：核桃楸皮提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥，具體是涉及一種核桃楸皮提取物-楸皮素及其制備方法。
背景技術(shù)：
核桃楸(Juglans mandshurica Maxim)為胡桃科胡桃屬落葉喬木，是東北闊葉紅松林的重要伴生樹種，也是東北著名的三大硬闊之一，主要分布于我國東北地區(qū)。核桃楸是我國珍惜保護(hù)植物。近年來，肝病發(fā)病率占各種傳染病法定報(bào)告第一位。全球攜帶乙肝病毒的人數(shù)超過2. 8億。我國是肝病高發(fā)區(qū)，乙肝病毒攜帶者超過0. 93億，患者人數(shù)超過1000萬，其中 25-40%以上發(fā)展為肝硬化或肝癌，世界衛(wèi)生組織把肝炎、癌癥、愛滋病列為威脅人類生存的三大“殺手”。目前，西醫(yī)治療肝病的方法主要有兩種一種是使用能抑制病毒復(fù)制的藥物，如干擾素、拉米夫定等，這些物藥對癥性強(qiáng)，治療效果明顯，但停藥后易復(fù)發(fā)，甚至有時(shí)會轉(zhuǎn)為不可逆的嚴(yán)重后果。另一種方法就是手術(shù)，這主要是針對癌癥患者。術(shù)后化療，對患者傷害更大。由于西醫(yī)西藥在這方面沒有更理想的方法，人們把目光投向中醫(yī)中藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的，是提供一種用于治療肝病，特別是肝癌的核桃楸皮提取物-楸皮
ο本發(fā)明的另一目的，是提供一種核桃楸皮提取物楸皮素的生產(chǎn)方法。技術(shù)方案是核桃楸皮提取物的中藥用活性成分主要有8-羥基-9，10-蒽醌-1-羧酸、 regiolone.4,5,8-三羥基-α -萘酮-3-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、4，5，8_三羥基-α -萘酮-3-0-(6' -0-沒食子酰基)-i3-D-吡喃葡萄糖苷、1-(4’ -羥基苯基)-7-(3”_甲氧基-4”-羥基苯基)庚烷-3-醇、4-羥基-2，6-二甲氧基苯酚-Ι-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷、4-羥基-2，6-二甲氧基苯酚-1-0-(6' -0-沒食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、香草酸-4-0-(6' -0-沒食子酰基)-β-D-批喃葡萄糖苷、香草醛、香草酸、沒食子酸、丁香酸、山萘酚、槲皮素、楊梅普和槲皮苷。核桃楸皮提取物的用途民間常用核桃楸皮煮水喝，用以治療胸脅漲滿，口苦咽干等癥狀。在這個基礎(chǔ)上， 我們對核桃楸皮的提取物進(jìn)行研究，確定化學(xué)成份和藥理實(shí)驗(yàn)。對核桃楸皮提取物進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)表明與模型對照組相比，參試藥物(15mg Ag4) 對小鼠S18tl肉瘤的生長有顯著的抑制作用，抑制率達(dá)到40%以上，給藥組瘤量均有減輕，與模型對照組相比有顯著差異(P<0. 05或P <0.01)。經(jīng)過長時(shí)間反復(fù)多次實(shí)驗(yàn)，不僅具有腫瘤的抑制作用，提示與化療藥物希羅達(dá)比較，CLI在整體動物抑瘤試驗(yàn)中，未發(fā)現(xiàn)發(fā)揮抑瘤作用的劑量對外周白細(xì)胞數(shù)有顯著影響。通過藥理實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)研究核桃楸皮提取物時(shí)，肝癌H22荷瘤小鼠的瘤體增長有顯著的抑制作用。體外試驗(yàn)表明，該藥對肝癌細(xì)胞有直接殺傷作用，而對正常細(xì)胞沒有損傷。核桃楸皮提取物可制成膠囊劑、片劑、丸劑、針劑及其粉針劑，使用方便，治療肝病及其癌癥，療效確切。服用方法口服，每日兩次，每次2片/粒/丸(針劑每次1針/瓶)，含楸皮素7_15mg。核桃楸皮提取物的制備方法，是取核桃楸皮IOOkg粉成粗粉(或破碎成小塊)，加入6-8倍量溶劑乙醇(或水)，乙醇質(zhì)量濃度為70-95% (水為飲用水)，加熱回流三次 (水提為加熱提取)，加熱溫度為80-90°C (水提100°C )，每次1小時(shí)(水提3小時(shí))，過濾， 50-60°C減壓濃縮至每Iml含藥材0. 5_lg的母液，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化后，得棕黃色油狀物 200-300mg，收率為 2%0 _3%0。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一核桃楸皮提取物的制備方法，是取核桃楸皮IOOkg磨成50-60目粗粉(或破碎成小塊)，加入6-8倍飲用水，加熱提取三次，溫度為100°C，每次3小時(shí)，過濾，50-60°C減壓濃縮至每Iml含藥材0. 5-lg的母液，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化后，得棕黃色核桃楸皮提取物油狀物200mg，收率為2%0。實(shí)施例二核桃楸皮提取物的制備方法，是取核桃楸皮IOOkg磨成40-50目粗粉(或破碎成小塊)，加入6倍量乙醇，乙醇濃度為70%，加熱回流三次，加熱溫度為80-90°C，每次1小時(shí)，過濾，50-60°C減壓濃縮至每Iml含藥材0. 5-lg的母液，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化后，得棕黃色核桃楸皮提取物油狀物200mg，收率為2%0。實(shí)施例三核桃楸皮提取物的制備方法，是取核桃楸皮IOOkg磨成粗粉(或破碎成小塊)，加入7倍量乙醇，乙醇濃度為80%，加熱回流三次，加熱溫度為80-90°C，每次1小時(shí)，過濾， 50-60°C減壓濃縮至每Iml含藥材0. 5-lg的母液，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化后，得棕黃色核桃楸皮提取物油狀物250mg，收率為2. 5%0。實(shí)施例四核桃楸皮提取物的制備方法，是取核桃楸皮IOOkg粉成粗粉(或破碎成小塊)，加入8倍量乙醇，乙醇濃度為95%，加熱回流三次，加熱溫度為80-90°C，每次1小時(shí)，過濾， 50-60°C減壓濃縮至每Iml含藥材0. 5-lg的母液，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化后，得棕黃色核桃楸皮提取物油狀物300mg，收率為3%0。核桃楸皮提取物化學(xué)成分組成經(jīng)溶劑分步萃取，反復(fù)硅膠柱色譜，聚酰胺柱色譜，ODS, Sephadex LH-20,制備薄層和反復(fù)重結(jié)晶等手段得到18個化合物，通過理化常數(shù)測定和光譜數(shù)據(jù)分析等手段鑒定其中的16個化合物的結(jié)構(gòu)，分別為(1)8-羥基-9，10-蒽醒-1-羧酸、(2)regiolone、 (3)4，5，8_三羥基-α-萘酮-3-0-β- -吡喃葡萄糖苷、(4) 4，5，8_三羥基-α -萘酮-3-0-(6’ -0-沒食子酰基)-β -D-吡喃葡萄糖苷、(5) 1-(4'-羥基苯基)-7-(3”-甲氧
4基-4”-羥基苯基)庚烷-3-醇、(6) 4-羥基-2，6-二甲氧基苯酚-1-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、(7) 4-羥基-2，6- 二甲氧基苯酚-1-0- (6 ‘ -0-沒食子酰基)-β -D-吡喃葡萄糖苷、(8) 香草酸-4-0-(6' -0-沒食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、(9)香草醛、(10)香草酸、(11) 沒食子酸、(12) 丁香酸、(13)山萘酚、(14)槲皮素、(15)楊梅普和(16)槲皮苷。其中化合物1為一新天然產(chǎn)物，其中化合物6，7和8為屬內(nèi)首次分離得到，2，9，12，13和14為本植物內(nèi)首次分離得到。鑒別情況如下化合物 1，8_hydroxy_9，10_anthraquinorie_l_carboxylic acid黃色針晶(EtOH-H2O)，1H-WR和 13C-NMR。化合物 2，regiolone白色結(jié)晶，10%硫酸-乙醇顯色為綠色斑點(diǎn)(薄層硅膠)，365nm下為明顯的綠色熒光。UV λ max (MeOH, nm) 222，260，340。UV λ —(MeCN，nm) 222，260，340。CD, Δ ε (λ max，0. lmg/ml, MeCN) :Δ ε = +1600 (219nm)，Δ ε = +400 (260nm)，Δ ε = +50 (340nm)。 1H-WR (300MHz，DMS0-d6)，δ :12. 42 (1H，s，0H-8)，7. 55 (1H，t，H_6)，7. 08(lH，d，J = 7. 5Hz, H-5)，6. 85 (1H, d, J = 8. 2Hz, H_7)，5. 64 (1H, d, J = 5. 8Hz, OH-4)，4. 76 (1H, m, H_4)，2. 76 (2H, m, CH2-2)，2. 2 (1H, dddd, H_3 β )，2. 0 (1H, dddd, H_3 α )。13C-NMR, δ 205. 4 (C-I)， 161. 6 (C-8) , 148. 8 (C_4a) , 136. 9 (C_6) , 117. 5 (C_5) , 115. 9 (C_7) , 115. 1 (C_8a)， 66. 1 (C-4)，35. 4 (C_2) ,31. 6 (C_3)。化合物 3,4, 5,8-trihydroxy- α -tetralone-5-0- β -D-glucopyranoside無定形粉末，365nm下呈亮黃色熒光，10%硫酸-乙醇顯色為綠色斑點(diǎn)(薄層硅膠)。ESI-MS :354. 9 [Μ-ΗΓ，391. 0[M+Cir，379. 1[M+Na] +。UV λ max (MeOH, nm) :230,263, 356。CD, Δ ε ( λ max，0. 01mg/ml，MeOH) :Δ ε = -25 (225nm), Δ ε = -5 (260nm), Δ ε =-3 (355nm)。1H-WR 禾口 13C_NMR。化合物 4，4，5，8-trihydroxy_a-tetralone-5-Ο-β-D_(6，-0-galloyl) glucopyranoside無定形粉末，365nm下呈亮黃色熒光，10%硫酸-乙醇顯色為綠色斑點(diǎn)(薄層硅膠)。ESI-MS :507. 0[Μ-ΗΓ，542· 9[M+Cir，531. 1[M+Na] +。1H-NMR 禾Π 13C_NMR。化合物 5,卜(4，-hydroxyphenyl)-7-(3，，-methoxy-4，，_hydroxyphenyl) hepta-3-ol黃色油狀固體，ESI-MS:329. 0[Μ-Η”，353· 2[M+Na]+，354. 2[M+Na+H]+； 329. 0 [Μ-ΗΓ 的二級負(fù)離子:313. 9,286. 9，220. 8，206. 8，192. 9，134. 8 ；353. 2 [M+Na]+ 的二級正離子:337. 2，313. 2，219. 1，189. 1，137. 0，121. 0。1H-NMR 和 13C_NMR。。化合物 6,4-hydroxy-2,6-dimethoxyphenoll-0- β -D-glucopyranoside無色結(jié)晶(MeOH-H2O)，ESI-MS330. 9 [M-H]366. 9 [M+C1]355. 1[M+Na]+ ；1H-NMR 禾口 13C-NMR0化合物 7，4-hydroxy-2，6-dimethoxyphenol-l_3-D_(6，-0-galloyl) glucopyranoside無色針晶(MeOH-H2O)，ESI-MS:483. 0[Μ-ΗΓ，518. 9 [M+Cir，485. 1[M+H]+，507. 1 [M+Na]+。1H-NMR 和 13C_NMR。化合物 8，Vanillic acid-4-O-β -D-(6，-0-galloyl) glucopyranoside無色結(jié)晶(MeOH)，ESI-MS:481. 0 [Μ-ΗΓ，505. 1 [M+Na]+。1H-WR 和 13C_NMR。化合物9，Vanillin白色針晶(MeOH)，三氯化鐵_鐵氰化鉀反應(yīng)陽性。1H-NMR, δ 10. 23 (1Η，br. s, 0H-4)，9. 77 (1H, s, CH0)，7. 43 (1H, dd, J = 8. 0，1. 8Hz, H-6)，7. 38 (1H, d, J = 1. 8Hz, H-5)， 6. 95 (1H, d, J = 8. 0Hz，H-2)，3. 83(3H，s，OCH3). 13C-NMR, δ 191. 1 (CHO), 153. 1 (C-4), 148. 2 (C-3)，128. 7 (C-I)，126. 2 (C—2), 115. 5 (C—6), 110. 7 (C—5)，55. 7 (OCH3)。化合物10，Vanillic acid白色針晶(MeOH)。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，溴酚藍(lán)反應(yīng)陽性。 1H-NMR(DMS0-d6) δ :12. 50 (1H, brs, C00H)，9. 85 (1H, brs, 0H-4)，7. 44 (1H, dd, J = 8. 7Hz, 1. 8Hz, H-6) ,7. 43 (1H, d, J = 1. 8Hz，H_2)，6. 84 (1H，d, J = 8. 7Hz，H_5)，3. 81 (3H，s, 0CHs-3)。化合物11，Gallic acid無色針晶，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，溴甲酚綠反應(yīng)陽性。1H-NMR(DMSO-Cie) δ :12. 30 (1Η，br. s，C00H)，9. 20 (3H，br. s，0H-3,4, 5), 6. 91 (2H, s, H_2，6)。化合物 12， Syringic acid無色針晶，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，溴酚藍(lán)反應(yīng)陽性。1H-NMR(DMSO-Cie)S 12. 40 (1H, br. s, C00H) ,9. 12 (1H，br. s, 0H—4)，7. 20 (2H, s, H-2,6) ,3. 80 (6H, s, 0CH3_3，
5)。13C-NMR,δ 168. O(COOH)，122. 6 (C-I)，106. 8(C_2，6)，147. 3 (C-3, 5)，139. 5 (C-4)， 55. 9(0CH3-3，5)。化合物 13，Kaempferol淡黃色粉末，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性。1H-NMR, δ 12. 49 (1Η, br. s, 0H-5)，10. 70 (1H, br. s, 0H-7)，10. 11 (1H, br. s, 0H-4，) ,9. 42 (1H, br. s, 0H-3) ,8. 05 (2H, d, J = 8. 7Hz, Η_2，，6，)，6· 92 (2Η, d, J = 8. 7Hz, H_3，，5，)，6. 44 (1H, s, H-8), 6. 19 (1H, s, H-6)。化合物 14，Quercetin黃綠色粉末，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，鹽酸鎂粉反應(yīng)陽性。1H-NMR(DMS0-d
6)δ :12. 51(lH,brs,0H-5), 10. 09 (1Η, brs, 0Η-7), 9. 37 (3Η, brs, 0Η-3, 3' ,4' ), 7. 68 (1Η, d, J = 1. 9Ηζ, Η-2' )，7. 55 (1Η, dd, J = 8. 5Ηζ, 1. 9Hz, H-6' )，6· 92 (1Η, d, J = 8. 5Ηζ, Η-5' )，6· 41 (1Η, d, J = 1. 7Ηζ, Η_8)，6· 19 (1Η, d, J = 1. 7Ηζ, Η_6)。化合物 15，Myricitrin淡黃色粉末，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，三氯化鋁反應(yīng)在紫外下熒光加強(qiáng)。 1H-NMR, δ 12. 67(1H, s, 0H-5),8-10(several protons, p-0H),6. 96(2H, s，H_2，，6，)， 6. 36(lH，d，J = 1. 9Hz，H-8)，6. 20(lH，d，J = 1. 9Hz，H_6)，5. 19 (1H, s, H-I"), 3-5 (several protons, H_2”-4”)，0. 84 (3H, d, J = 6Hz, CH3_5”)。1V-NMR, δ 157. 5(C_2)，134. 3 (C-3)， 177. 8 (C-4)，161. 4 (C_5)，98. 7 (C_6)，164. 3 (C_7)，93. 5 (C_8)，156. 5 (C_9)，104. 0 (C-10)， 119. 6(0-Γ )，107. 9(C-2' )，145. 8(C-3' )，136. 5(C-4' )，145. 8(C-5' )，107. 9(C-6')， 102. 0(C-1”)，70· 5(C-2”)，70· 6(C-3”)，71· 3(C-4”)，70· 1(C_5”)，17. 6(C_6”)。
化合物 16，Quercitrin淡黃色粉末，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，三氯化鋁反應(yīng)在紫外下熒光加強(qiáng)。 1H-NMR, δ 12.65(lH，s，0H-5)，7.26(lH，br.s，H-2' ),7. 22 (1H, br. d, J = 8. 0Hz,H-6')， 6. 82 (1H, br. d, J = 8. OHz)，6. 41 (1H, br. d, H_8)，6. 19 (1H, br. d, H_6)，5. 25 (1H, s，H_l”)， 3-5 (several protons，H_2”-4”)，0· 81 (3H，d，J = 5. 7Hz，CH3_5”)。13C-NMR, δ 156.5(d)， 133. 8 (C-3)，177. 0 (C_4)，161. 1 (C_5)，99. 3 (C_6)，164. 0 (C_7)，93. 8 (C_8)，156. 6 (C_9)， 104. O(C-IO)，120. 9 (C-Γ ) ,115. 2(C~2' )，146. 0(C-3' ) ,115. 2(C~4' )，149. 0(C-5')， 120. 9(C-6，) , 101. 7(C-1，，)，70. 3(C_2，，)，70. 4(C_3，，)，71. 2(C_4，，)，70. 0(C_5，，)， 17. 4(C-6”)。核桃楸皮提取物楸皮素藥效學(xué)通過制備小鼠肉瘤S18(1、肝癌H22、肝癌Hca-F瘤株荷瘤小鼠模型，分別考察楸皮素不同劑量對荷瘤小鼠的抑瘤作用，結(jié)果表明楸皮素7. 5、15mg · kg"1連續(xù)灌胃給藥7天對小鼠肉瘤S18Q、小鼠肝癌Hca-F荷瘤小鼠均有顯著抑瘤作用；且抑瘤作用呈現(xiàn)量效關(guān)系。楸皮素15mg · kg"1對小鼠肝癌H22荷瘤小鼠有顯著的抑瘤作用，3. 75,7. 5mg · kg—1對其有一定的抑瘤作用趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過與環(huán)磷酰胺聯(lián)合用藥發(fā)現(xiàn)，與楸皮素單獨(dú)用藥時(shí)比較，楸皮素3. 75,7. 5、15mg -kg"1連續(xù)灌胃給藥7天與CTX聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，對肉瘤S18tl模型小鼠抑瘤率均有一定提高作用，且15mg -kg"1與CTX聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，抑瘤呈現(xiàn)相加作用。通過體外制備Hela細(xì)胞(人宮頸癌細(xì)胞)、7402BEL (人肝癌細(xì)胞)和Hca-F細(xì)胞(小鼠腹水型肝癌細(xì)胞)，應(yīng)用MTT檢測方法分別對待測藥物組、陽性藥對照組和正常對照組(1640培養(yǎng)液) 進(jìn)行抑制腫瘤細(xì)胞能力的觀察。試驗(yàn)結(jié)果顯示在所選擇的劑量范圍內(nèi)，楸皮素對Hela細(xì)胞、7402BEL細(xì)胞及Hca-F細(xì)胞均具有顯著抑制作用。研究還發(fā)現(xiàn)，楸皮素15mg · kg—1連續(xù)灌胃給藥7天對小鼠肉瘤S18tl荷瘤小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)有顯著升高作用，3. 75,7. Smg-kg-1 有一定的升高作用趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示楸皮素在所選劑量范圍內(nèi)連續(xù)用藥未發(fā)現(xiàn)對荷瘤小鼠骨髓有抑制作用。楸皮素15mg -kg"1連續(xù)灌胃給藥7天可顯著提高環(huán)磷酰胺致免疫功能低下小鼠脾臟臟器系數(shù)和碳粒廓清指數(shù)，由此可見，楸皮素在體內(nèi)抗腫瘤的同時(shí)， 對網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能影響較小，不損傷小鼠的非特異免疫功能。一、抗腫瘤作用(一 )整體動物試驗(yàn)試驗(yàn)?zāi)康目疾旌颂议逼ぬ崛∥镩逼に氐捏w內(nèi)抗腫瘤作用和聯(lián)合化療藥物用藥是否產(chǎn)生協(xié)同抗腫瘤作用。試驗(yàn)方法與結(jié)果1.對小鼠肉瘤S18tl的抑制作用試驗(yàn)方法體外復(fù)蘇小鼠肉瘤S18tl瘤株細(xì)胞，復(fù)蘇三代，用無菌生理鹽水稀釋，選取健康小鼠，每只用上述細(xì)胞懸液0. 2ml腹腔注射，約一周后接種小鼠腹部明顯漲大，抽取腹水，在無菌試管中用無菌生理鹽水稀釋瘤細(xì)胞數(shù)濃度為2X IO7個/ml。用上述腹水稀釋液對購進(jìn)昆明種小鼠進(jìn)行接種，于腋窩處消毒皮膚后每只皮下接種0. anl，建立小鼠肉瘤S18tl荷瘤模
刑[1] [2] [3]將荷瘤小鼠隨機(jī)分組，每組10只，分別為模型對照組，楸皮素低、中、高給藥組(3. 75,7. 5、15mg · kg-1)，參一膠囊組(IOmg · kg-1)，復(fù)方木雞合劑組(IOml · kg-1)，希羅達(dá)組(lOOOmg.kg-1)。自造模24小時(shí)后連續(xù)灌胃給藥7天，每日1次，給藥容積20ml ·1^1[4]。本次給藥24h后，頸椎脫白法處死動物，解剖剝離瘤塊，電子天平稱瘤重。根據(jù)下面公式計(jì)算抑瘤率抑瘤率=(1-給藥組平均瘤重/對照組平均瘤重)X 100%實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值士標(biāo)準(zhǔn)差G士SD)表示。試驗(yàn)結(jié)果與模型對照組比較，楸皮素7. 5、15mg · kg—1連續(xù)灌胃給藥7天對小鼠肉瘤S18tl荷瘤小鼠有顯著的抑瘤作用楸皮素3. 75mg · kg"1有一定的抑瘤作用趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)共做3次，高劑量組抑制率均達(dá)到30%以上。結(jié)果見表1。表1楸皮素對小鼠肉瘤S18tl的抑制作用
組別劑量動物數(shù)體重(g)瘤重(g)抑瘤率(mg-kg'1)開始結(jié)束造模前處死前(χ 土 SK(%)模型一101019.3 ±1.021.2±1.11.116±0.14一楸皮素3.75101019.9 ±1.221.3 士 1.30.985+0.1711.77.5101019.0±0.621.1 士 1.00.792 ±0.36*29.015101019.8±1.021.1 ±0.90.640 ±0.32**42.7復(fù)方木雞lOml-kg"1101019.6±0.821.0 + 1.00.818±0.4626.7參一10101020.0 土 1.021·5±0.90.720 ±0.43*35.5希羅達(dá)1000101019.7 土 1.020.8 土 1.00.600±0.12**46.2與模型組比較*P < 0. 05，**P < 0. 012.對小鼠肝癌Hca-F的抑制作用試驗(yàn)方法體外常規(guī)復(fù)蘇小鼠肝癌Hca-F瘤株細(xì)胞，其它同上。試驗(yàn)結(jié)果與模型對照組比較，楸皮素7. 5、15mg · kg—1連續(xù)灌胃給藥7天對小鼠肝癌Hca-F 荷瘤小鼠有顯著的抑瘤作用；楸皮素3. 75mg · kg—1有一定的抑瘤作用趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)共做3次，高劑量組抑瘤率均達(dá)30%以上。結(jié)果見表2表2楸皮素對小鼠肝癌Hca-F的抑制作用
權(quán)利要求
1. 一種核桃楸皮提取物在制備抗肝癌的藥物中的應(yīng)用，其中所述核桃楸皮提取物制備方法如下取核桃楸皮IOOkg磨成粗粉或破碎成小塊，加入6-8倍量溶劑，溶劑為乙醇或水， 溶劑采用乙醇時(shí)，乙醇質(zhì)量濃度為70-95%，加熱回流三次，加熱溫度為80-90°C，每次1小時(shí)，溶劑采用水時(shí)，加熱提取三次，加熱溫度為100°C，每次水提2-3小時(shí)，將乙醇提取或水提取所得藥液過濾，50-60°C減壓濃縮至每ml含藥材0. 5_lg的母液，經(jīng)大孔吸附樹脂分離純化后，得棕黃色油狀物200-300g。
全文摘要
核桃楸皮提取物，主要藥用活性成份有8-羥基-9，10-蒽醌-1-羧酸、REGIOLONE、4，5，8-三羥基-α-萘酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、4，5，8-三羥基-α-萘酮-3-O-(6′-O-沒食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、1-(4’-羥基苯基)-7-(3”-甲氧基-4”-羥基苯基)庚烷-3-醇、4-羥基-2，6-二甲氧基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、4-羥基-2，6-二甲氧基苯酚-1-O-(6′-O-沒食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、香草酸-4-O-(6′-O-沒食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、香草醛、香草酸、沒食子酸、丁香酸、山萘酚、槲皮素、楊梅普和槲皮苷。上述核桃楸皮提取物對于治療肝病和抑制腫瘤生長上具有良好效果，特別是對于肝癌細(xì)胞具有直接殺傷作用。
文檔編號A61P35/00GK102349943SQ201110321400
公開日2012年2月15日 申請日期2008年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月9日
發(fā)明者張秀君 申請人:丹東藥業(yè)集團(tuán)有限公司