專利名稱：熱淋清顆粒提取物及其制備方法和用途的制作方法
熱淋清顆粒提取物及其制備方法和用途技術領域
本發明屬于中藥領域，用于制備中藥熱淋清顆粒的原料即藥材頭花蓼的提取物。 具體地，本發明涉及熱淋清顆粒提取物及其制備方法和用途。更具體地，本發明涉及用于制備熱淋清顆粒的原料即頭花蓼提取物及其制備方法和用途。
背景技術：
頭花蓼(Polygonum capitatum Buch-Ham ex D.Don)為蓼科蓼屬多年生草本植物。具有清熱利濕、利尿通淋之功效，在臨床上治療泌尿系統感染有著顯著的效果。以其為原料制成的中成藥制劑“熱淋清顆粒” 2002年進入國家基本藥物目錄，2004年進入國家基本醫療保險目錄。
頭花蓼是少數民族地區的常用藥，主要用于腎盂腎炎、尿道感染、利尿通淋等癥。 相關的藥理學研究少見，目前僅有任光友等幾篇報道。任光友采用大鼠細菌性腎盂腎炎模型進行實驗，結果頭花蓼水提取物組大鼠尿液中的WBC和BLD與對照組比較明顯減少，顯示頭花蓼水提物對腎盂腎炎具有一定的抗炎作用。任光友等以小鼠腹腔注射大腸桿菌菌液觀察5天內小鼠死亡情況，結果對照組死亡率為100%，頭花蓼組死亡率分別為20%和50%， 顯示頭花蓼水提物能夠對抗大腸桿菌引起的感染。任光友等以頭花蓼水提物灌胃給藥予家兔，結果，頭花蓼水提物組與對照組比較，體溫無顯著性差異，但能降低靜脈注射傷寒副傷寒菌苗引起的家兔的發熱體溫。任光友等，以頭花蓼水提物分別灌胃給藥家兔、大鼠，與空白組和速尿對照組比較尿量。結果顯示頭花蓼水提物對家兔和大鼠無明顯利尿作用。徐英春等人采用瓊脂稀釋法檢測了頭花蓼對10株淋病奈瑟球菌(淋球菌)的體外抑菌活性，結果頭花蓼對淋球菌有抑菌活性。其對10株淋球菌的最小抑菌濃度范圍為8 32g/L，平均值為 11.2g/L。
中國專利申請公開說明書CN10M899A (中國專利申請號90107810. 7，
公開日1991年10月2日)中公開了一種泌感靈沖劑、糖漿生產工藝。該生產工藝是以四季草為原料用水煎煮30-60分鐘，提取液過濾濃縮，將其上清液減壓濃縮成膏，再用60-70%乙醇提取，將乙醇提取液真空干燥，得四季紅浸膏，進一步配制成沖劑或糖漿劑，據信該具有解毒、散瘀、 利尿、通淋的功效。
中華人民共和國衛生部藥典委員會1998年編的中華人民共和國衛生部《藥品標準-中藥成方制劑》(第十七冊)中收載了名為“熱淋清顆粒”的中成藥制劑，其是通過將頭花蓼加水煎煮兩次后過濾濃縮制成的。
CN 1481832A(中國專利申請號02U9686. 3，
公開日2004年3月17日)和CN 1483466A(中國專利申請號03146381. 9，
公開日2004年3月M日)公開了頭花蓼提取物， 其基本上是由以下步驟制備的a.由頭花蓼全草的鮮品或干品用水分兩次煎煮或者用醇水混合物分二至三次回流提取，每次1-2小時，合并煎煮液，過濾濃縮至20°C時的相對密度為1. 2，噴霧干燥或減壓干燥得到；或者，b.由頭花蓼全草及其水提藥渣經二氧化碳超臨界萃取得到。據信此提取物可用于抗菌、抗炎、鎮痛、利尿、治療泌尿系統結石、治療腎盂腎炎3以及前列腺炎。
盡管目前有諸多關于制備頭花蓼提取物的報道，然而本領域技術人員仍然期待從頭花蓼獲得更為有效的產品。發明內容
本發明目的是期待從頭花蓼獲得更為有效的產品。本發明人發現，使用先將頭花蓼經水提得到濃縮干燥品，然后再用一定濃度的乙醇提取該濃縮干燥品，得到的提取物在生物活性方面具有令人期待的效果。本發明基于此發現而得以完成。
為此，本發明第一方面提供了一種頭花蓼提取物，其基本上由包括以下步驟的方法制備得到
(1)將頭花蓼地上部分鮮品或干品加水煎煮，過濾，使濾液濃縮、干燥；
(2)將步驟(1)所得干燥物用75 85%乙醇提取，過濾，使濾液濃縮、干燥，即得。
根據本發明第一方面的頭花蓼提取物，其中所述步驟(1)中，用頭花蓼干品或鮮品的5-15倍量(優選6-13倍量，更優選6-10倍量)的水提取1_2次，每次1_4小時(優選1-3小時或者優選1-2小時)。
根據本發明第一方面的頭花蓼提取物，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮至20°C時相對密度為1. 1 1.3。
根據本發明第一方面的頭花蓼提取物，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮后經噴霧干燥或減壓干燥的方式干燥。
根據本發明第一方面的頭花蓼提取物，其中所述步驟O)中，所用乙醇為80 85%乙醇，更優選81 84%乙醇，例如約82%乙醇。
根據本發明第一方面的頭花蓼提取物，其中所述步驟( 中，步驟(1)所得干燥物被粉碎成60-120目(優選80-120目，例如約100目)的細粉，然后再進行乙醇提取。
根據本發明第一方面的頭花蓼提取物，其中所述步驟O)中，使用乙醇溶液在回流處理的條件或者超聲波處理的條件下進行提取。在一個實施方案中，提取時間可以是 0. 5 5小時(例如1-4小時，例如1-3小時)。
本發明第二方面提供了制備頭花蓼提取物的方法，其基本上包括以下步驟
(1)將頭花蓼地上部分鮮品或干品加水煎煮，過濾，使濾液濃縮、干燥；
(2)將步驟(1)所得干燥物用75 85%乙醇提取，過濾，使濾液濃縮、干燥，即得。
根據本發明第二方面的方法，其中所述步驟(1)中，用頭花蓼干品或鮮品的5-15 倍量(優選8-13倍量，更優選10-13倍量)的水提取1-2次，每次1-4小時(優選1_3小時或者優選1-2小時)。
根據本發明第二方面的方法，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮至20°C時相對密度為 1. 1 1. 3。
根據本發明第二方面的方法，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮后經噴霧干燥或減壓干燥的方式干燥。
根據本發明第二方面的方法，其中所述步驟(2)中，所用乙醇為80 85%乙醇，更優選81 84%乙醇，例如約82%乙醇。
根據本發明第二方面的方法，其中所述步驟( 中，步驟(1)所得干燥物被粉碎成60-120目(優選80-120目，例如約100目)的細粉，然后再進行乙醇提取。
根據本發明第二方面的方法，其中所述步驟O)中，使用乙醇溶液在回流處理的條件或者超聲波處理的條件下進行提取。在一個實施方案中，提取時間可以是0. 5 5小時(例如1-4小時，例如1-3小時)。
本發明第三方面提供本發明第一方面所述頭花蓼提取物在制備清熱利濕用藥，利尿通淋用藥，泌尿系統感染或結石用藥，腎盂腎炎用藥，解毒、散瘀用藥，抗菌、抗炎、鎮痛用藥，前列腺炎用藥的藥物中的用途。
本發明第四方面提供了一種藥物組合物，其中包含本發明第一方面任一實施方案所述的頭花蓼提取物以及任選的藥學可接受的載體。
根據本發明第四方面的藥物組合物，其呈口服或注射給藥的制劑形式。在一個實施方案中，所述藥物組合物呈片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、口服液劑、注射劑(水針和/或粉針)等的形式。
本發明任一方面或該任一方面的任一實施方案所具有的任一技術特征同樣適用其它任一實施方案或其它任一方面的任一實施方案，只要它們不會相互矛盾，當然在相互之間適用時，必要的話可對相應特征作適當修飾。下面對本發明的各個方面和特點作進一步的描述。
本發明所引述的所有文獻，它們的全部內容通過引用并入本文，并且如果這些文獻所表達的含義與本發明不一致時，以本發明的表述為準。此外，本發明使用的各種術語和短語具有本領域技術人員公知的一般含義，即便如此，本發明仍然希望在此對這些術語和短語作更詳盡的說明和解釋，提及的術語和短語如有與公知含義不一致的，以本發明所表述的含義為準。
在本發明中，本發明方法得到“頭花蓼提取物”，該術語亦可稱為本發明的“頭花蓼有效組分”或者本發明的“頭花蓼有效部位”。
在本發明方法中，經步驟(1)獲得水提取物，該步驟的操作條件無需要作特別的限制，原因在于本發明人發現在步驟O)中采用獨特濃度的提取溶劑即乙醇水溶液，出現令人期待的藥效學提高的效果。
本發明目的在于克服現有技術的不足，提供一種高效低毒的頭花蓼抗炎有效成分 (有效部位)與應用。
發明對頭花蓼藥效作用進行聚焦，弄清其作用特點同時對頭花蓼不同提取部位的藥效作用進行篩選，采用頭花蓼不同提取部位的樣品通過抗炎、鎮痛、抗菌藥理實驗進行了頭花蓼有效組分(有效部位)與藥效作用特點的篩選。
在一個實施方案中，發明通過以下技術方案實現上述目的
發明提供了一種頭花蓼有效組分(有效部位)，是由以下步驟獲得
(1)取頭花蓼地上部分鮮品或干品，加水煎煮2 4小時，過濾，將濾液濃縮至 20°C時相對密度為1. 1 1. 3，濃縮液噴霧干燥或減壓干燥成為干燥物；
(2)干燥物粉碎成100目細粉，細粉再用8倍質量的75 85%乙醇提取1小時， 過濾，濾液干燥即得。濾液中的乙醇可以進行回收再用。
在一個實施方案中，步驟(1)所述的水的加入量為頭花蓼干品或鮮品的10-13倍； 加水煎煮分兩次進行，每次1 2小時。
在一個實施方案中，步驟( 所述的乙醇提取分兩次進行，每次0.5小時，所述的提取為攪拌提取或超聲波提取。
在一個實施方案中，步驟O)乙醇的提取過程中，乙醇的質量分數是一個重要的因素，關系到所提取的有效部位的藥用效果。乙醇濃度低，頭花蓼藥粉容易粘附，造成提取不完全，工業生產困難。乙醇濃度高極性成分提取減少，影響藥效。本發明最為優選的乙醇濃度為80 83%，更優選的為82%。
以下提供本發明的一種優選方案，頭花蓼有效組分是由以下方法獲得由頭花蓼干品用13倍水(W/W)煎煮，可分成二次煎煮，每次1 2小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至20°C時相對密度為1. 1 1. 3，濃縮液噴霧干燥或減壓干燥，減壓干燥物粉碎成100目細粉。干燥細粉再用8倍(W/W)82%乙醇提取，分二次提取(超聲波提取)，每次0.5小時，過濾，合并濾液，回收乙醇，殘留物干燥即得。
本發明所提供的頭花蓼有效組分(有效部位)，對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響實驗，按5g頭花蓼干品所得提取物/kg體重灌胃給藥，連續5天，末次給藥60min后實驗，有顯著的抗炎作用，最高炎癥抑制率可達46. 08% ；對于小鼠熱板致痛實驗，能延長小鼠熱板添足反應潛伏時間(與對照組比較P < 0. 05)，最高延時率可達16. 57%。
該頭花蓼有效組分可以與藥物制造上可以接受的輔料組合制備成各種常用制劑和緩釋劑、控釋劑、靶向制劑等。
盡管頭花蓼藥物采用水提、醇提、水煮醇提的工藝是較為公知的做法，但未見水 (煮)提干燥，粉碎，再特定濃度乙醇提取的工藝，與現有技術相比，本發明具有以下有益效果和性質的不同。
本發明先用水煮提取，獲得藥效成分然后再用極性溶劑(特定濃度的乙醇)進行濃集的方法，可以使抗炎作用比水提物明顯增強。本發明提取物與水提工藝的提取物比較， 能非常顯著地提高其抗炎效果，其實驗結果如下表所示
組別劑量(gAg)η腫脹度(mg)抑制率(％ )對照組106. 8±3. 01頭花蓼水提物2. 5105. 3±1. 3522. 06頭花蓼水提物5104. 8±1. 5529. 41本發明提取物2. 5104. 4±1. 26 *35. 29本發明提取物593. 67±1. 00**46. 08
注與對照組比較*P < 0. 05**P < 0. 01
上表中，“本發明提取物”采用的提取方法是將頭花蓼干品用13倍水(W/W)分成二次煎煮，每次1. 5小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至20°C時相對密度為1. 1，濃縮液噴霧干燥得100目以上細粉(此細粉是上表“頭花蓼水提物”的試藥)。干燥細粉再用8倍 (W/W) 82%乙醇提取，分二次提取(超聲波提取)，每次0. 5小時，過濾，合并濾液，回收乙醇，殘留物干燥即得(作為上表中“本發明提取物”的試藥)。
在本發明中，以g/kg表示試驗的給藥劑量時，如無另外說明，是指每kg動物體重給予相應試藥(例如本發明提取物)折合成頭花蓼干品的重量。
具體實施方式
為了能夠更清楚地理解本發明的技術內容，特舉以下實施例詳細說明，但本發明的實施方式不限于此。
A、提取物制備例部分
制備例1 頭花蓼水提物
取頭花蓼地上部分干品10Kg，用水洗凈，加入10倍量水(W/W)，浸泡1小時，加熱煮沸1小時，過濾，濾渣再加6倍量水煮沸1小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至20°C時相對密度達1. 3，濃縮液噴霧干燥，得干燥細粉1. 03Kg。
制備例2 本發明提取物的制備
取制備例1方法所得干燥細粉(約100目)0. ^(g，用8倍(W/W)82%乙醇分二次超聲提取，每次0. 5小時，過濾，合并濾液，回收乙醇，殘留物減壓干燥，得干燥物0. 047Kg, 此提取物用于下文試驗例部分試驗中的試藥。
制備例h 本發明提取物的制備
另外，參考以上制備例2的方法，分別用6倍(W/W) 82%乙醇、10倍(W/W) 82%乙醇進行提取并且超聲處理2次每次5小時，提取物收率與制備例2的基本相同；再將所得提取物同樣進行下文試驗例部分試驗，結果顯示與制備例2的用8倍(W/W) 82%乙醇提取所得提取物的生物學活性基本相同(相差小于10% )，表明在相同濃度提取液的條件下，提取液用量和醇處理時間等提取條件對提取物的活性無影響。
制備例3 本發明提取物的制備
取制備例1方法所得干燥細粉(約80目)0. ^(g，用8倍(W/W)75%乙醇回流提取 1次，每次1小時，過濾，合并濾液，回收乙醇，殘留物減壓干燥，得干燥物0. 068Kg。
制備例4 本發明提取物的制備
取制備例1方法所得干燥細粉(約120目)0. ^(g，用8倍(W/W) 85 %乙醇分二次超聲提取，每次3小時，過濾，合并濾液，回收乙醇，殘留物減壓干燥，得干燥物0. 052Kgo
制備例5 本發明提取物的制備
取頭花蓼地上部分鮮品20Kg，用水洗凈，加入7倍量水(W/W)，浸泡1小時，加熱煮沸1小時，過濾，濾渣再加5倍量水煮沸1小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至20°C時相對密度達1. 1，濃縮液噴霧干燥，得干燥細粉0. 63Kg。
取以上制備的干燥細粉(約100目)0. ^(g，然后參考制備例4的方法進行醇提，不同之處是所用乙醇為80%乙醇，得干燥物0. 055Kgo
對照例1 對照提取物的制備
參考制備例2的方法，不同之處是所用乙醇為70%，得干燥物0. 075Kgo
對照例2 對照提取物的制備
參考制備例2的方法，不同之處是所用乙醇為60%，得干燥物0. 083Kgo
對照例3 對照提取物的制備7
參考制備例2的方法，不同之處是所用乙醇為90%，得干燥物0. 033Kgo對照例4 對照提取物的制備參考制備例5的方法，不同之處是醇提步驟所用乙醇為72%，得干燥物0. OSlKgo對照例5 對照提取物的制備參考制備例5的方法，不同之處是醇提步驟所用乙醇為88%，得干燥物0. 036Kg。B、藥效學試驗例部分試驗例1 二甲苯致小鼠耳腫脹實驗,考察頭花蓼提取物的抗炎效果動物SPF級昆明種小鼠，體重18 22g，雌雄兼用。試藥、劑量和給藥方法以上文“A、提取物制備例部分”所得的各種制備例樣品和對照例樣品作為試藥，劑量為每kg動物體重給予相應試藥折合成頭花蓼干品的重量為5g。 各試藥臨用前用生理鹽水混懸至相當于每只動物每次灌胃給藥0. 4ml的濃度，同時設置灌胃同體積生理鹽水的對照組。試驗方法小鼠雌雄兼用，隨機分組，每一試藥組10只動物；連續給藥5天，末次給藥60min后，用二甲苯0. Iml/只涂右耳致炎，30min后處死小鼠，用直徑6mm的打孔器取左右兩耳片。立即用電子天平稱重，以兩耳片重量差作為腫脹度(mg)，以下式計算各試藥組的抑制率(％ )
權利要求
1.一種頭花蓼提取物，其基本上由包括以下步驟的方法制備得到(1)將頭花蓼地上部分鮮品或干品加水煎煮，過濾，使濾液濃縮、干燥；(2)將步驟(1)所得干燥物用75 85%乙醇提取，過濾，使濾液濃縮、干燥，即得。
2.根據權利要求1的頭花蓼提取物，其中所述步驟(1)中，用頭花蓼干品或鮮品的 5-15倍量的水提取1-2次，每次1-4小時。
3.根據權利要求1的頭花蓼提取物，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮至20°C時相對密度為1. 1 1.3。
4.根據權利要求1的頭花蓼提取物，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮后經噴霧干燥或減壓干燥的方式干燥。
5.根據權利要求1的頭花蓼提取物，其中所述步驟( 中，所用乙醇為80 85%乙醇， 更優選81 84%乙醇，例如約82%乙醇。
6.根據權利要求1的頭花蓼提取物，其中所述步驟( 中，步驟(1)所得干燥物被粉碎成60-120目的細粉，然后再進行乙醇提取。
7.根據權利要求1的頭花蓼提取物，其中所述步驟(2)中，使用乙醇溶液在回流處理的條件或者超聲波處理的條件下進行提取。
8.制備頭花蓼提取物的方法，其基本上包括以下步驟(1)將頭花蓼地上部分鮮品或干品加水煎煮，過濾，使濾液濃縮、干燥；(2)將步驟(1)所得干燥物用75 85%乙醇提取，過濾，使濾液濃縮、干燥，即得。
9.根據權利要求8的方法，其中所述步驟(1)中，用頭花蓼干品或鮮品的5-15倍量的水提取1-2次，每次1-4小時。
10.根據權利要求8的方法，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮至20°C時相對密度為 1. 1 1. 3。
11.根據權利要求8的方法，其中所述步驟(1)中，濾液濃縮后經噴霧干燥或減壓干燥的方式干燥。
12.根據權利要求8的方法，其中所述步驟O)中，所用乙醇為80 85%乙醇，更優選 81 84%乙醇，例如約82%乙醇。
13.權利要求1-7任一項所述頭花蓼提取物在制備清熱利濕用藥，利尿通淋用藥，泌尿系統感染或結石用藥，腎盂腎炎用藥，解毒、散瘀用藥，抗菌、抗炎、鎮痛用藥，前列腺炎用藥的藥物中的用途。
14.一種藥物組合物，其中包含權利要求1-7任一項所述頭花蓼提取物以及任選的藥學可接受的載體。
15.權利要求14的藥物組合物，其呈口服或注射給藥的制劑形式；例如呈片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、口服液劑、注射劑等的形式。
全文摘要
本發明涉及熱淋清顆粒提取物及其制備方法和用途。具體地，本發明涉及用于制備熱淋清顆粒的原料即頭花蓼提取物及其制備方法和用途。本發明頭花蓼提取物基本上由包括以下步驟的方法制備得到(1)將頭花蓼地上部分鮮品或干品加水煎煮，過濾，使濾液濃縮、干燥；(2)將步驟(1)所得干燥物用75～85％乙醇提取，過濾，使濾液濃縮、干燥，即得。本發明頭花蓼提取物具有如說明書所述的有益效果。
文檔編號A61P13/08GK102526219SQ20121000089
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月5日 優先權日2012年1月5日
發明者萬金志, 劉培慶, 唐靖雯, 張麗艷, 李孟林, 梁斌, 謝宇, 陳欣霞 申請人:貴州威門藥業股份有限公司