專利名稱：一種中藥組合物及其制備方法與應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于中藥和天然藥物技術領域，具體涉及治療脾虛濕熱證2型糖尿病及胰島素抵抗的中藥及其制備與應用。
背景技術：
糖尿病是一種慢性代謝性疾病，其患病率呈全球性增加，已成為繼腫瘤、心血管疾病之后的第三大嚴重的慢性非傳染性疾病，被世界衛生組織列為世界三大頑癥之一。我國現有糖尿病患者人數約4，000萬左右，而糖尿病類型中2型糖尿病(T2DM)占93. 7%，其中 80% -90%有胰島素抵抗，這還不包括糖耐量受損及代謝綜合征的患者，由此可見胰島素抵抗或胰島素抵抗綜合證已構成了現代社會的重大的健康危機。目前對糖尿病的治療，主要是胰島素、磺酰脲類、雙胍類、噻唑烷酮類等治療，無論以上哪種治療，都存在一定的副作用，而且一旦停藥，疾病也很快復發，從這一方面考慮中醫藥治療糖尿病及其并發癥具有悠久歷史和不可替代的優勢，因此，研發一種有效而且能被大多數消費者接受的治療2型糖尿病的藥物已經成為消費者的需求。祖國醫學在治療2型糖尿病及胰島素抵抗上有著豐富的治療經驗，糖尿病的中醫藥研究，無論是理論研究，還是動物實驗或臨床試驗研究，在研究方法、科學性、先進性方面取得了一些令人矚目的成就和進展。中醫也對糖尿病進行了許多研究包括臟腑學研究、病因學研究、復方研究、單藥單體研究。采用滋腎養陰、益氣生津、清熱除煩等方法，在臨床上取得相當的療效，在患者中有著很高的聲譽，但由于諸多條件的限制，包括藥學制劑問題、 藥物穩定性以及臨床療效客觀評價等問題，目前治療2型糖尿病及胰島素抵抗上中藥制劑幾乎是一片空白。目前主要采用臨床治療2型糖尿病的中藥制劑，如消渴丸，適用人群有限制。鑒于上述情況，現在臨床上中醫中藥治療脾虛濕熱證2型糖尿病主要采用中草藥煎煮口服，給廣大患者帶來極大的不便，開發安全、有效的治療2型糖尿病及胰島素抵抗的中成藥，將會對該病的治療和預防起著積極推動作用。

發明內容
發明目的本發明公開了對四妙丸的改進處方，其可以治療對屬于“脾虛濕熱”證相關的2型糖尿病有明顯治療作用的中藥。本發明以2型糖尿病是“脾氣虛導致的濕熱內生”為理論基礎，以黃柏為君藥，蒼術臣藥與其它幾位藥物配伍制得。技術方案一種中藥組合物，其特征是由下列中藥材按對應的重量份制成黃柏3-12 份；蒼術 5_10 份；意該仁9-30份；
黃連2-5 份。作為一種優化方式所述的中藥組合物，其特征在于由下列中藥材按對應的重量份制成黃柏6份；蒼術10份；薏苡仁10份；黃連3份。一種中藥組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟實施按重量份計黃柏3-12 份；蒼術5_10 份；意該仁9-30份；黃連2-5 份。按上述組份稱取原料，將蒼術提取揮發油，揮發油用β -環糊精包合，提取后的藥渣與黃柏、薏苡仁、黃連合并后煮沸提取得到提取液，濃縮提取液，濃縮至稠浸膏后真空干燥，所得浸膏粉粉碎后加入蒼術揮發油包合物即得，成品。作為一種優化方式，其中揮發油用β-環糊精包合方法如下揮發油與β-環糊精的重量比例為I : 10，加4倍量水，研磨 O. 5h0作為一種優化方式，其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取 10小時。作為一種優化方式，一種中藥組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟實施按重量份計黃柏3-12 份；蒼術5_10 份；意該仁9-30份；黃連2-5 份。按上述組分稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品。作為優選方式，將上述的成品，加入成品的重量10% -30%糊精，或成品的重量 O. 5%硬脂酸鎂，或成品的重量O. 4% -O. 6%阿斯巴甜或乳糖干法制粒制得顆粒劑。制得的成品可以加入藥學上可接受的載體制備成各種制劑，本發明優選制備成顆粒劑。中藥組合物在制備治療2型糖尿病或胰島素抵抗疾病的藥物中的應用。進一步說明本發明的中藥組合物可以直接粉碎后入藥，也可以按常規方法水煎煮后服用。為了服藥方便，更為了提高藥效。有益效果本發明的中藥組合物特點是清熱燥濕，標本兼顧，通過抑制炎性刺激或反應而改善或治療胰島素抵抗，所以在臨床使用中適應癥方面較廣，不僅治療II型糖尿病胰島素抵抗，而且對肥胖癥，高血脂或動脈粥樣硬化等病患中具有胰島素抵抗傾向亦有治療和預防的作用。
本發明的中藥組合物(命名為四妙顆粒)，全方以黃柏為君，黃柏苦寒，寒以清熱， 苦以燥濕，其性沉降，長于清下焦濕熱。蒼術，辛苦溫，善能燥濕健脾，為臣藥。二藥相伍，標本兼顧，合成清熱燥濕之效。黃連苦寒，能清熱燥濕，去中焦濕熱，為佐藥；使藥薏苡仁味甘淡微寒，能清利濕熱兼能健脾。全方黃柏、黃連苦寒，蒼術性溫，使本方寒而不涼溫而不燥， 薏苡仁健脾益胃補肺，為高蛋白低脂肪易消化之品，可供給機體較多的優質蛋白。可見本方寒熱并用，攻補兼施，共奏清熱燥濕健脾之功效。可用于治脾虛濕熱證相關2型糖尿病及胰島素抵抗等疾病。本發明是四妙丸的改進方劑，四妙丸的處方為蒼術，牛膝，黃柏(鹽炒)，薏苡仁。 主治脾胃虛弱，不能運化，痰停胸臆，飲食減少，大便溏泄。用于由濕熱下注引起的兩足麻木，下肢痿弱，筋骨疼痛，足脛濕疹癢痛。通過組方改變，改變了其適用癥或治療范圍。


圖I為各實施例對胰島素刺激下3T3-L1細胞葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)的影響， 其中A為空白及實施例1-5結果，B為實施例6-15結果；圖2為各實施例對胰島素刺激下3T3-L1細胞葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)的影響， 其中A為空白及實施例1-5，B為實施例6-15。
具體實施例方式實施例I.黃連2g，黃柏3g，蒼術6g，薏苡仁9g，按照上述組份稱取原料；蒼術提取揮發油，其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取10小時揮發油與β_環糊精的重量比例為I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h，獲得蒼術揮發油包合物。蒼術藥渣與其他組份加水提取2次，每次8倍量水，提取50分鐘，濾過，合并二次濾液，濃縮至稠膏后80°C真空干燥，浸膏粉加入蒼術揮發油包合物及浸膏粉重量的20%的糊精混合均勻，干法制粒。實施例2黃連5g，黃柏12g，蒼術6g，薏苡仁30g，按照上述組份稱取原料，蒼術提取揮發油， 其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取10小時揮發油與β_環糊精的重量比例為I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h;揮發油包合后備用，藥渣與其他藥味加水提取3次，每次10倍量水，提取60分鐘，濾過，合并三次濾液，濃縮至稠膏后70°C真空干燥，浸膏粉加入蒼術揮發油包合物及浸膏粉重量的30%的糊精、浸膏粉重量的3%的乳糖，混合均勻，干法制粒。實施例3.黃連3g，黃柏6g，蒼術10g，薏苡仁IOg ;按照上述組份稱取原料，蒼術餾提取揮發油，其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取10小時揮發油與β-環糊精的重量比例為I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h。揮發油包合后備用，藥渣與其他藥味加水提取3次，每次7倍量水，提取40分鐘，濾過，合并三次濾液，濃縮至稠膏后 60°C真空干燥，浸膏粉加入蒼術揮發油包合物及浸膏粉重量的25%的糊精、浸膏粉重量的 0.3%阿斯巴甜，混合均勻，干法制粒。實施例4.
黃連4g，黃柏10g，蒼術9g，薏苡仁20g，按照上述組份稱取原料，蒼術提取揮發油， 其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取10小時揮發油與β_環糊精的重量比例為I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h。揮發油包合后備用，藥渣與其他藥味加水提取2次，每次8倍量水，提取45分鐘，濾過，合并二次濾液，濃縮至稠膏后65°C真空干燥，浸膏粉加入蒼術揮發油包合物及浸膏粉重量的20%的糊精、浸膏粉重量的5%乳糖，混合均勻，干法制粒。實施例5黃連5g，黃柏6g，蒼術6g，薏苡仁22g，按照上述組份稱取原料，蒼術提取揮發油， 其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取10小時揮發油與β_環糊精的重量比例為I : 10，加4倍量水，研磨O. 5h。揮發油包合后備用，藥渣與其他藥味加水提取2次，每次8倍量水，提取45分鐘，濾過，合并二次濾液，濃縮至稠膏后65°C真空干燥，浸膏粉加入蒼術揮發油包合物及浸膏粉重量的20%的糊精、浸膏粉重量的5%乳糖，混合均勻，干法制粒。實施例6黃連2g，黃柏3g，蒼術6g，薏苡仁9g，按照上述組份稱取原料，粉碎制得。實施例7黃連5g，黃柏12g，蒼術6g，薏苡仁30g，按照上述組份稱取原料，粉碎制得。實施例8黃連3g，黃柏6g，蒼術10g，薏苡仁IOg ;按照上述組份稱取原料，粉碎制得。實施例9黃連4g，黃柏10g，蒼術9g，薏苡仁20g，按照上述組份稱取原料，粉碎制得。實施例10黃連5g，黃柏6g，蒼術6g，薏苡仁22g，按照上述組份稱取原料，粉碎制得。實施例11黃連2g，黃柏3g，蒼術6g，薏苡仁9g，按照上述組份稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品。實施例12黃連5g，黃柏12g，蒼術6g，薏苡仁30g，按照上述組份稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品。實施例13黃連3g，黃柏6g，蒼術10g，薏苡仁IOg ;按照上述組份稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品。實施例14黃連4g，黃柏10g，蒼術9g，薏苡仁20g，按照上述組份稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品。實施例15黃連5g，黃柏6g，蒼術6g，薏苡仁22g，按照上述組份稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品。實施例16
一、熒光法檢測葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)篩選不同藥物配比四妙顆粒的活性篩選受試藥物實施例1-15實驗方法選用生長良好的3T3-L1細胞(購自中科院上海細胞庫)，以5 X IO5個細胞/ml接種于48孔培養板，每孔加入細胞懸浮液400 μ I。待細胞融合后，更換無血清HG-DMEM培養基(購自Gibco公司)使細胞同步化4h，然后進行分組I)空白對照組(Blank)；2)模型組(Control)，此組僅造模，不加藥物干預；3)藥物組造模，并加下列藥物干預，共分為15個組(實施例1_15，500μ g/ml)；4)陽性對照組5mmol/l水楊酸鈉.藥物組加藥后溫育O. 5h，加LPS刺激巨噬細胞上清液(5 μ g/ml, I I稀釋)Ih 后，KRH液洗3遍,加胰島素(l(T7mmol/l)溫育20min,KRH液洗3遍,加入2-NBDG避光溫育 20min，PBS洗3遍，加入2%多聚甲醛4°C固定5min，在熒光顯微鏡下于480nm觀察各組熒光，并拍照。結果見圖I和圖2.由圖可見ΜΦ4Μ與3T3-L1細胞共培養使胰島素刺激下的細胞攝取葡萄糖顯著減少，提示GLUT4轉位受阻，葡萄糖進入細胞內的轉運率降低。本發明不同配比的四妙顆粒均可以促進GLUT4的轉位，進而促進葡萄糖轉運，改善IR，調節糖脂代謝，其中以配比3效果最明顯。同時陽性藥水楊酸鈉效果也較明顯。二、本發明對正常小鼠糖耐量的影響I. I實驗動物健康ICR種清潔級雄性小鼠，購自揚州大學比較醫學中心，合格證號 SCXK (蘇)2007-0001，體重 18_22g。藥物實施例1-15陽性對照藥物鹽酸二甲雙胍片、消渴丸。I. 2藥物配制二甲雙胍(200mg/kg)，取一片研成粉末，稱取IOOmg粉末溶于蒸餾水，配成5ml,灌胃O. lml/10g ;消渴丸(2g/kg):取5粒研成粉末,稱取Ig粉末以蒸懼水配成 5ml,灌胃 O. lml/10g ；I. 3實驗方法與結果將健康雄性小鼠按體重隨機分成19組空白組，模型組，各實施例組，陽性藥組， 每組12只。禁食不禁水12h，眼球靜脈叢取血，此為0h，隨即灌胃給藥，劑量均為I. 2g/ kg (相當于生藥量)，空白和模型組灌胃給予蒸餾水0. lml/10g, Ih后灌胃2g/kg葡萄糖，于 30min、lh、2h取血,靜置15min, 3500rpm, 15min離心，吸取血清，用葡萄糖酶法試劑盒測血糖。結果見表l，0.5h時小鼠血糖達到峰值，模型組與空白組比較血糖明顯升高(P < 0. 05)，各實施例組與模型組比較血糖明顯降低，二甲雙胍和消渴丸也明顯降低血糖，2h 時各組血糖都恢復正常。結果提示四妙顆粒能有效的改善小鼠糖耐量。表I四妙顆粒對正常小鼠糖耐量的影響(X土 sd，η = 12)
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t檢驗，與模型組比較，*P < O. 05三、本發明各實施例對急性炎癥引起的胰島素抵抗小鼠糖耐量的影響I. I實驗材料同二I. 2實驗方法與結果從普通健康雄性小鼠提取腹腔巨噬細胞，細胞以6 X IO5接于6孔培養板，4小時細胞貼壁后換成無血清H-DMEM培養基，在每孔加入終濃度5 μ g/ml的LPS，48h后收集上清， O. 22 um濾膜過濾，儲存于_70°C冰箱中。注射用上清配制取上述所收集上清按I : 2用生理鹽水稀釋為3倍。將健康小鼠按體重隨機分成19組空白組，模型組，按照優化工藝制得各實施例組，二甲雙胍組和消渴丸組，每組12只。禁食不禁水12h后，眼球靜脈叢取血，此為O時，灌胃給藥，空白和模型組灌胃給予蒸餾水O. lml/10g, O. 5h后腹腔注射LPS刺激小鼠巨噬細胞上清液O. 2ml/只,0. 5h后灌胃2g/kg葡萄糖，于30min、lh、2h取血,靜置15min, 3500rpm, 15min離心,吸取血清,用葡萄糖酶法試劑盒測血糖。結果見表2，小鼠禁食12h后，取血后給小鼠灌藥，O. 5h后腹腔注射巨噬細胞上清液，O. 5h后灌2g/kg的葡萄糖，O. 5h，lh，2h后取血。O. 5h時小鼠血糖達到峰值，模型組與空白組比較血糖明顯升高(P < O. 05)，各實施例組與模型組比較血糖明顯降低，二甲雙胍和消渴丸也具有明顯降低血糖作用，2h時血糖都基本恢復正常。結果顯示各實施例組能有效的改善急性胰島素抵抗小鼠的糖耐量。表2四妙顆粒對急性胰島素抵抗小鼠糖耐量的影響(X土sd，η = 12)
權利要求
1.一種中藥組合物，其特征是由下列中藥材按對應的重量份制成黃柏3-12份；蒼術5-10份；薏該仁9-30份；黃連2-5份。
2.權利要求I的中藥組合物，其特征在于由下列中藥材按對應的重量份制成黃柏6份；蒼術10份；薏苡仁10份；黃連3份。
3.—種中藥組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟實施按重量份計黃柏3-12份；蒼術5-10份；薏該仁9-30份；黃連2-5份；按上述組份稱取原料，將蒼術提取揮發油，揮發油用P -環糊精包合，提取后的藥渣與黃柏、薏苡仁、黃連合并后煮沸提取得到提取液，濃縮提取液，濃縮至稠浸膏，所得浸膏粉碎后加入蒼術揮發油包合物即得。
4.根據權利要求3的一種中藥組合物的制備方法，其特征在于其中揮發油用￠-環糊精包合方法如下揮發油與￠-環糊精的重量比例為I :10,加4倍量水,研磨0. 5h。
5.根據權利要求3的一種中藥組合物的制備方法，其特征在于其中提取揮發油的方法如下加入8倍量水，水蒸汽蒸餾提取10小時。
6.一種中藥組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟實施按重量份計黃柏3-12份；蒼術5-10份；薏該仁9-30份；黃連2-5份；按上述組分稱取原料，沸水提取，提取液濃縮制得成品，或將上述組份粉碎制得。
7.根據權利要求I或2的中藥組合物在制備治療2型糖尿病或胰島素抵抗疾病的藥物中的應用。
全文摘要
本發明屬于中藥和天然藥物技術領域，具體涉及治療脾虛濕熱證2型糖尿病及胰島素抵抗的中藥及其制備與應用。一種中藥組合物，其特征是由下列中藥材按對應的重量份制成黃柏3-12份；蒼術5-10份；薏苡仁9-30份；黃連2-5份。本發明的中藥組合物特點是清熱燥濕，標本兼顧，通過抑制炎性刺激或反應而改善或治療胰島素抵抗，所以在臨床使用中適應癥方面較廣，不僅治療Ⅱ型糖尿病胰島素抵抗，而且對肥胖癥，高血脂或動脈粥樣硬化等病患中具有胰島素抵抗傾向亦有治療和預防的作用。
文檔編號A61K36/8994GK102579904SQ20121009615
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月31日 優先權日2012年3月31日
發明者劉保林, 劉康, 張寧, 成俊, 高發紅, 黃芳 申請人:成俊