洛鉑在制備治療前列腺癌藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明涉及洛鉑在制備治療前列腺癌藥物中的應用，特別是在制備治療非激素依賴性前列腺癌藥物中的應用，所述洛鉑的有效治療量為20-50mg/m2體表面積，本發明為前列腺癌提供了新的治療藥物并拓展了洛鉑及其制劑的臨床應用。
【專利說明】洛鉑在制備治療前列腺癌藥物中的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及洛鉬在制備治療前列腺疾病癌中的應用，屬于化學藥物新用途的領域。
【背景技術】
[0002]前列腺癌，是發生于男性前列腺組織中的惡性腫瘤，是前列腺腺泡細胞異常無序生長的結果。前列腺癌的發病率具有明顯的地理和種族差異。在歐美等發達國家和地區，它是男性最常見的惡性腫瘤，其死亡率居各種癌癥的第二位；在亞洲，其發病率低于西方國家，但近年來呈迅速上升趨勢。前列腺癌的病因尚未查明，可能與遺傳、環境、性激素等多種因素有關。前列腺分泌功能受雄激素睪九酮調節，促性腺激素的黃體生成素發揮間接作用。2004年美國一項研究發現了一個能夠增加男性前列腺癌風險的基因KLF6 (Kruppe樣因子
6)。該研究表明這種與細胞生長有關的基因的一個常見變異體能夠使前列腺癌風險增加50%。前列腺癌常有排尿障礙，腰部、骶部、坐骨神經等疼痛，淋巴結或血行轉移癥狀，以及日漸虛弱、消瘦乏力、進行性、惡病質或腎功能衰竭的全身癥狀。
[0003]防治前列腺癌,有中藥治療、內分泌治療雙磷酸鹽藥物治療以及免疫治療等方法，但利用抗腫瘤藥物治療前列腺癌，是近幾年來才受到重視的，這主要是因為約20%~30%的前列腺癌不依賴雄激素。化療主要適合晚期轉移性前列腺癌病人，經內分泌治療或放射治療失敗后，可采用化療。作為輔助性治療往往可以起到內分泌治療及放療無法替代的效果。
[0004]洛鉬(Lobaplatin，D-19466)又名洛巴鉬，是繼順鉬、卡鉬之后由德國愛斯達制藥股份有限公司(ASTA Medica AG)研發的第三代鉬類抗腫瘤藥物。其化學名稱為:1，2 -二氨甲基-環丁烷-乳酸合鉬。分子式為C9H18N2O3Pt,分子量為397.34。研究表明，洛鉬對多種動物和人腫瘤細胞株有明確的細胞毒作用，與順鉬和卡鉬的抑瘤作用相當或者更好，毒性作用與卡鉬相同，且與順鉬無交叉耐藥。抗癌活性強，毒性較小，溶解度好，在水中穩定，主要用于乳腺癌、小細胞肺癌及慢性粒細胞性白血病的治療。
[0005]本發明 申請人:分別在專利申請號為CN201010556219.1、名稱為“一種以草酸鹽制備洛鉬三水合物的方法”和專利申請號為CN201010500619.0、名稱為“一種抗腫瘤藥物制劑的制備方法”的發明專利中公開了洛鉬三水合物的制備方法以及注射用洛鉬的制備方法。雖然之前的研究表明洛鉬可以用于制備治療乳腺癌、小細胞肺癌等多種病癥，但未見利用洛鉬及其制劑對前列腺癌方面的治療作用的專利文獻和研究報道。本 申請人:在隨后的研究中還意外的發現，洛鉬及其制劑可以用于前列腺癌的治療。

【發明內容】

[0006]本發明的目的是提供洛鉬的一種新用途，實質上是洛鉬在制備治療前列腺癌癥藥物中的應用，尤其是洛鉬在制備治療非激素依賴性前列腺癌藥物中的應用。
[0007]所述洛鉬的有效治療量為20-50mg/m2體表面積，優選30_40mg/ m2體表面積。
[0008]所述的應用是將洛鉬制成注射制劑，如凍干粉針劑、小容量注射液或大容量注射液。優選注射用凍干粉針劑。
[0009]在應用時，可以根據需要加入或不加入藥學上常規載體，如賦形劑、穩定劑、表面活性劑、調節劑等，按照藥學領域的常規方法制備成所需劑型。
[0010]給藥途徑為靜脈注射給藥。
[0011]本發明洛鉬及注射用洛鉬可以是上市藥品，也可以按照專利申請號為CN201010556219.1 或 CN201010500619.0 中的方法來進行制備。
[0012]為了使本領域普通技術人員更好的理解本發明，本 申請人:進行了一系列實驗研究，以證明本發明的效果:
【具體實施方式】:
[0013]實施例1、洛鉬的體外抗前列腺癌細胞的活性研究
[0014]1.1材料及試劑:
[0015]1.1.1藥物名稱和批號:洛鉬為白色凍干粉，批號20070501 ;卡鉬為白色粉末，批號20060703 ;順鉬為黃色粉末，批號36-014050704。多西他賽，白色粉末，批號268070506 ；紫杉醇，白色粉末，批號030902 ;長春瑞濱，批號080504。
[0016]提供單位:洛鉬由海南長安國際制藥有限公司提供；卡鉬為昆明貴研藥業有限公司產品；順鉬、長春瑞濱為江蘇豪森藥業股份有限公司產品；多西他賽、紫杉醇為江蘇恒瑞醫藥股份有限公司產品。
[0017]配制方法:以上藥物均用無血清培養基配成相應濃度。
`[0018]1.1.2 細胞株
[0019]PC-3、DU145、LNCAP:人前列腺癌；均購自 American Type Culture Collection(ATCC)。按照所提供的說明書培養。
[0020]1.3試劑及儀器
[0021]RPMI_1640、DMEM購自Gibco BRL公司；胎牛血清購自Hyclone公司；酶標儀:連續光譜光密度酶標儀，型號SPECTRA max 190, Molecular Devices公司；SRB購自Sigma。
[0022]1.2研究方法:MTT法；SRB法
[0023]1.2.1 SRB法:細胞以含10%胎牛血清的培養液培養，使細胞一直處于對數生長期。細胞接種于96孔培養板，密度1-5X10 Vml0 37°C，5% CO2培養箱預培養24小時加藥，藥物設5 - 7個濃度，每個濃度設2個復孔，連續作用72小時。藥物作用結束后，用三氯乙酸(TCA)固定細胞，清洗后加入SRB工作液，洗滌，用Tris base溶解與蛋白結合的SRB，SPECTRAmax 190酶標儀565nm波長下測定每個小孔的OD值?？瞻讓φ湛准?0 μ I培養液。根據OD值，計算細胞生長抑制率:
[0024]抑制率(%)=(對照組OD值-用藥組OD值)/對照組OD值X 100%
[0025]根據不同濃度下藥物對細胞生長的抑制率，以Logit方法計算IC5tl值。生物統計軟件程序來源于〈〈藥理學計算與程序 >> 一書，人民衛生出版社1988年版，張文貴主編。
[0026]1.2.2 MTT法:細胞以含10%胎牛血清的培養液培養，使細胞一直處于對數生長期。細胞接種于96孔培養板，密度1-5X10 Vml0 37°C，5% CO2培養箱預培養24小時加藥，藥物設5 - 7個濃度，每個濃度設2個復孔，連續作用72小時。藥物作用結束后，加入MTT，繼續培養4小時，加入三聯液培養過夜。然后用SPECTRA max 190酶標儀在580nm波長下測定每個小孔的OD值。空白對照孔加20 μ I培養液。
[0027]數據處理過程同SRB法。
[0028]1.3試驗結果
[0029]洛鉬和順鉬均明顯抑制體外培養的人前列腺癌細胞的生長，抑制作用具有明顯的劑量依賴性，二者活性相當，而卡鉬的活性明顯較弱，見表1。
[0030]表1洛鉬、順鉬和卡鉬對體外培養前列腺癌細胞的IC5tl總結
【權利要求】
1.洛鉬在制備治療前列腺癌藥物中的應用。
2.洛鉬在制備治療非激素依賴性前列腺癌藥物中的應用。
3.如權利要求1或2任一所述的應用，其特征在于:洛鉬的有效治療量為20-50mg/m2體表面積。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于:洛鉬的有效治療量為30-40mg/m2體表面積。
5.如權利要求1或2任一所述的應用，其特征在于:所述的應用是將洛鉬制成注射制劑，如凍干粉針劑、小容量注射液或大容量注射液。
6.如權利要求5所述的應用，其特征在于:所述注射制劑是凍干粉針劑。
7.如權利要求5所述的應用，其特征在于:所述注射制劑是通過加入或不加入藥學上常規的載體采用常規方法制備而成，載體常規如賦形劑、穩定劑、表面活性劑、調節劑。
8.如權利要求5所`述的應用，其特征在于:該洛鉬制劑的給藥途徑為靜脈注射給藥。
【文檔編號】A61K31/282GK103505450SQ201210208664
【公開日】2014年1月15日 申請日期:2012年6月25日 優先權日:2012年6月25日
【發明者】竇啟玲, 王平, 隋東虎, 馮志剛 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司