專利名稱：微生物環保劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種生物環保劑，具體地說涉及一種用于垃圾場的除臭滅蠅凈化劑，屬于微生物脫臭領域。
背景技術：
隨著經濟的快速發展，城市化進程加快，人口迅速增加，生活垃圾的惡臭污染問題越來越成為政府和民眾關注的重要環境問題。
惡臭污染屬于大氣污染的范疇。由于惡臭大部分是復雜的多組合、低濃度、低沸點各種氣體物質的混合物，惡臭物質具有閥值低、感覺強度與污染濃度對數相關的特點，因而控制技術選擇方面將不同于常規大氣污染。目前受控的惡臭物質有氨、硫化氫、甲硫醇、甲硫醚、三甲胺，而產生這些惡臭的污染源缺乏有效的治理方法，對惡臭物質目前還沒有相應有效的防治技術。目前主要防治方法有生物法、吸附法、吸收法、光催化法等。從單一的單元處理操作發展到如今的多種技術組合式應用。(針對我國城鄉垃圾中轉及填埋的分散無序狀態，使用系統設備、封閉式的降解除臭，不是解決垃圾場空氣污染的主要方法。)目前市場已有的除臭劑主要有化學除臭劑、物理除臭劑、微生物除臭劑。化學除臭劑是通過一系列的化學反應將惡臭物質或中和或置換或氧化為無臭物質，其成本高，還會造成二次污染；物理除臭劑是吸附除臭，不改變臭氣組合，只改變臭氣的相對濃度。微生物除臭滅蠅可為目前行之有效的方法。有關生物除臭的專利和文獻很多，很大部分類似以制作新型有機肥為目的，因此菌群龐雜，即包括產生各種酶的菌株，也需要高溫放線菌，還需要固氮菌、解磷解鉀的芽孢菌。雖然也有除臭效果，但是工藝復雜，生產成本高，周期長，滅蠅效果不佳。如中國專利申請號200510069596. 8，名稱為“一種生物除臭凈化劑及其用途”的專利，再如中國專利申請號200510063042. 0，名稱“生物工程處理城市生活濕垃圾的方法”。另一類微生物除臭滅蠅制劑專利，在微生物發酵完成后，為降低制劑PH加入多量的醋酸乳酸，氫離子濃度過大的培養液，會導致微生物酶失活，不能正常生長，影響使用效果，如中國專利申請號為201010124151. X，名稱為“垃圾填埋場除臭酵母及其垃圾除臭使用技術”，如中國專利申請號201110284724. X，名稱” 一種微生物廁所除臭劑及其制備方法”。
發明內容
本發明的目的是提供一種有效安全的，用于垃圾填埋場和畜禽圈舍的滅蠅蛆除惡臭的微生物環保劑，以彌補現有技術的不足。本發明為實現目的采用的技術方案是
微生物環保劑，其特征是包括沼澤紅假單孢菌、枯草芽孢菌、德氏乳酸桿菌形成的混合菌和中藥提取液；按重量比，沼澤紅假單孢菌枯草芽孢菌德氏乳酸桿菌=3:4:7 ;按體積比，中藥提取液在混合菌中的比例為1%_2%。所述的沼澤紅假單孢菌，由下列步驟制備而成a.制作搖瓶種子液將經過馴化的沼澤紅假單孢菌的單個菌落，接種到液體培養基中，于30°C培養48小時，得到搖瓶種子液；
所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液醋酸鈉O. 2克，氯化鈉O. I克，硫酸鎂
0.I克，磷酸二氫鉀O. 05克，硫酸氨O. I克，氯化鈣O. 01克，IOOml水，PH為6. 6 ;121°C滅菌30分鐘，冷卻備用；
b.生產一級種子液將步驟a得到的沼澤紅假單孢菌搖瓶種子液以10%體積比的接種量，接種到沼澤紅假單孢菌一級種子液體培養基在厭氧環境30°C培養72小時，光照強度為ΙΟΟΟΙχ，菌數達30億/ml，得到沼澤紅假單孢菌一級種子液；
所述沼澤紅假單孢菌一級種子液培養基為按下述比例配制的混合液磷酸二氫鉀I. O克，氯化鈣O. I克，碳酸氫鈣3克，醋酸鈉I克，氯化鈉I. O克，氯化鎂O. 5克，氯化胺I. O克，微量元素貯液1ml，生長輔助因子貯液1ml，水1000ml ;PH=6. 6，121°C滅菌30分鐘，冷卻備用；
所述的微量元素貯液為氯化亞鐵1800毫克，氯化鈷250毫克，氯化鎳10毫克，氯化銅10毫克，氯化錳70毫克，氯化鋅100毫克，硼酸500毫克，錳酸鉀30毫克，硒酸鈉10毫克，水 IOOOml ；
所述生長因子貯液為生物素10毫克，尼克酸35毫克，硫氨素30毫克，對氨基苯甲酸20毫克，鹽酸比多醛10毫克，泛酸鈣10毫克，維生素B12毫克，水IOOml ；
c.生產發酵(二級發酵):將步驟b得到的沼澤紅假單孢菌一級種子液以10%體積比接種到發酵培養液中，所述的發酵培養液同于步驟b的一級種子液培養基，培養條件同于步驟b，發酵96小時，檢測活菌數已達到30億/ml時停止發酵。最后對沼澤紅假單孢菌發酵液的活菌含量進行常規平板計數檢測。所述的枯草芽孢菌，由下列步驟制備而成
d.制作搖瓶種子液將經過馴化的枯草芽孢菌的單個菌落，接種到液體培養基中，于30°C培養48小時，得到搖瓶種子液；
所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液蛋白胨I. O克，葡萄糖I. O克，牛肉膏
1.O克，硫酸二氫鉀O. 5克，硫酸錳O. I克，水1000ml ；PH=7. 5 ；
e.生產一級種子液將步驟d得到的枯草芽孢菌搖瓶種子液以3%體積比的接種量，接種到枯草芽孢菌一級種子液體培養基在厭氧環境30°C培養20小時，菌數達30億/ml，得到枯草芽孢菌一級種子液；枯草芽孢菌一級種子液培養基與步驟d相同；
f.生產發酵(二級發酵)將步驟e得到的枯草芽孢菌一級種子液以5%體積比接種到發酵培養液中，所述的發酵培養液同于步驟e的一級種子液培養基，培養條件同于步驟e ；
所述的德氏乳酸菌，由下列步驟制備而成
g.制作搖瓶種子將經過馴化的德式乳酸菌單個菌落接種到德氏乳桿菌液體培養基中，37°C培養36小時，得到搖瓶種子液；
所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液酵母膏5克，蛋白胨5克，葡萄糖9克，吐溫80 O. 5克，磷酸二氫鉀2克，番茄汁100ml，水1000ml ；PH=5. 6，121°C滅菌15分鐘。h.生產一級種子液將步驟g得到的德氏乳酸桿菌種子液以5%體積比的接種量，接種于一級種子液體培養基中，于45°C培養40小時，至活菌數達到10億/ml，得到一級種子液。
所述的一級種子液體培養基配方為按下述比例配制的混合液蔗糖10克，糖蜜25克，蛋白胨5克，酵母膏5克，硫酸鎂O. 5克，氯化鈉O. I克，磷酸二氫鉀O. 5克，水IOOOml ；
i.生產發酵將步驟h得到的種子液以15%體積比的接種量，接種于發酵液培養基中，于40°C培養48小時，以殘糖降到I克L時，發酵結束；
所述發酵液培養基配方為按下述比例配制的混合液，糖蜜40克，蔗糖20克，麥根18克，蛋白胨5克，酵母膏5克，硫酸鎂O. 5克，氯化鈉O. I克，磷酸二氫鉀O. 5克，水IOOOml ；所述的中草藥提取液，由下列步驟制備而成把中藥辣寥、狼毒、威靈仙、北鮮皮、蒼耳按照重量比5:3:1:1:1混合，加入10倍體積的4°的酒精浸泡24-72小時，再將浸泡后的藥物在沸水條件下煎20-30分鐘，浙出藥液待用。所述的混合菌，由下列步驟制備而成
按重量比，沼澤紅假單孢菌枯草芽孢菌德氏乳酸桿菌=3:4:7混合后加入到混合菌液培養基中發酵15天，活菌數達到10億/ml，PH<4時混合液制備完成；
所述的混合菌培養基為為按下述比例配制的混合液糖蜜30%，硫酸鎂1%，硫酸亞鐵
O.4%，磷酸二氫鉀1%，煮沸放至室溫；
本發明的積極效果在于本發明利用多種微生物與它的代謝產物，對城市中產生惡臭的生活污染源，即垃圾轉運站及處理場中氨、硫化氫、吲哚、甲硫醇、醛類，進行吸收降解轉換，以達到除臭的目的。其中枯草芽孢菌細胞群，抗藥性強，并產生蛋白酶和幾丁質酶，有效的分解害蟲卵殼和真菌細胞壁。枯草芽孢菌是一種亞硝酸鹽轉化菌，可以將垃圾的氨態氮轉化為亞硝基氮，亞硝基氮轉化為硝基氮，硝基氮可被植物吸收。光合菌利用硝基氮形成菌體蛋白，從而減少氨態氮的生成，降低了氨氣的含量。光合菌為紅假單孢菌屬，經過馴化利用硫化物的能力增加，硫化氫可作為供氧體，可以利用氨態氮形成菌體成分。德氏乳桿菌產乳酸能力很強，可以使廨液PH〈4的酸性液體。可吸收臭味物質及抑制腐敗菌的代謝和繁殖。通過微生物及其代謝產物的綜合作用，對臭氣原有較強降解轉換能力，達到明顯的除臭效果。另外，中藥提取液的維生素促進混合菌液生長，混合菌液內的酶如皂戒酶等可以使植物的次生代謝產物如生物堿由活性較低變為活性較高的物質，從而提高藥效。綜述本發明通過復合菌液與中草藥提取液混合發酵，促使中藥成分進一步激活，與菌體孢外酶共同作用抑制蟲卵的孵化，減少了成蠅的生成。由于中草藥與菌液發酵培養基有特殊氣味，對成蠅有著誘殺作用，也可有效阻隔臭源的臭氣散發。本發明的微生物環保劑對人體無害，成本低，制備工藝簡單，操作簡便，除臭滅蠅效果顯著，較好的解決了垃圾填埋場、垃圾中轉站及廁所、化糞池的蚊蠅和惡臭問題，達到了良好的除臭滅蠅效果。
圖I本發明實施例的實施效果表。
具體實施例方式實施例I :
沼澤紅假單孢菌(pseudmonas palustris)菌的制備
a.制作搖瓶種子液將經過馴化的沼澤紅假單孢菌的單個菌落，接種到液體培養基中，于30°C培養48小時，得到搖瓶種子液；所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液醋酸鈉O. 2克，氯化鈉O. I克，硫酸鎂
0.I克，磷酸二氫鉀O. 05克，硫酸氨O. I克，氯化鈣O. 01克，IOOml水，PH為6. 6 ; 121。。滅菌30分鐘，冷卻備用；
b.生產一級種子液將步驟a得到的沼澤紅假單孢菌搖瓶種子液以10%體積比的接種量，接種到沼澤紅假單孢菌一級種子液體培養基在厭氧環境30°C培養72小時，光照強度為ΙΟΟΟΙχ，菌數達30億/ml，得到沼澤紅假單孢菌一級種子液；
所述沼澤紅假單孢菌一級種子液培養基為按下述比例配制的混合液磷酸二氫鉀I. O克，氯化鈣O. I克，碳酸氫鈣3克，醋酸鈉I克，氯化鈉I. O克，氯化鎂O. 5克，氯化胺I. O克，微量元素貯液1ml，生長輔助因子貯液1ml，水1000ml ;PH=6. 6，121°C滅菌30分鐘，冷卻備用；
所述的微量元素貯液為氯化亞鐵1800毫克，氯化鈷250毫克，氯化鎳10毫克，氯化銅10毫克，氯化錳70毫克，氯化鋅100毫克，硼酸500毫克，錳酸鉀30毫克，硒酸鈉10毫克， 水 IOOOml ；
所述生長因子貯液為生物素10毫克，尼克酸35毫克，硫氨素30毫克，對氨基苯甲酸20毫克，鹽酸比多醛10毫克，泛酸鈣10毫克，維生素B12毫克，水IOOml ；
c.生產發酵(二級發酵):將步驟b得到的沼澤紅假單孢菌一級種子液以10%體積比接種到發酵培養液中，所述的發酵培養液同于步驟b的一級種子液培養基，培養條件同于步驟b，發酵96小時，檢測活菌數已達到30億/ml時停止發酵。最后對沼澤紅假單孢菌發酵液的活菌含量進行常規平板計數檢測。枯草芽抱菌(Rhodopseudmonas palustris)的制備
d.制作搖瓶種子液將經過馴化的枯草芽孢菌的單個菌落，接種到液體培養基中，于30°C培養48小時，得到搖瓶種子液；
所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液蛋白胨I. O克，葡萄糖I. O克，牛肉膏
1.O克，硫酸二氫鉀O. 5克，硫酸錳O. I克，水1000ml ；PH=7. 5 ；
e.生產一級種子液將步驟d得到的枯草芽孢菌搖瓶種子液以3%體積比的接種量，接種到枯草芽孢菌一級種子液體培養基在厭氧環境30°C培養20小時，菌數達30億/ml，得到枯草芽孢菌一級種子液；枯草芽孢菌一級種子液培養基與步驟d相同；
f.生產發酵(二級發酵)將步驟e得到的枯草芽孢菌一級種子液以5%體積比接種到發酵培養液中，所述的發酵培養液同于步驟e的一級種子液培養基，培養條件同于步驟e ；
德氏乳酸菌(LactobaciIIus delbrueckill)的制備
g.制作搖瓶種子將經過馴化的德式乳酸菌單個菌落接種到德氏乳桿菌體培養基中，37°C培養36小時，得到搖瓶種子液；
所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液酵母膏5克，蛋白胨5克，葡萄糖9克，吐溫80 O. 5克，磷酸二氫鉀2克，番茄汁100ml，水1000ml ；PH=5. 6，121°C滅菌15分鐘。h.生產一級種子液將步驟g得到的德氏乳酸桿菌種子液以5%體積比的接種量，接種于一級種子液體培養基中，于45°C培養40小時，至活菌數達到10億/ml，得到一級種子液。所述的一級種子液體培養基配方為按下述比例配制的混合液蔗糖10克，糖蜜25克，蛋白胨5克，酵母膏5克，硫酸鎂O. 5克，氯化鈉O. I克，磷酸二氫鉀O. 5克，水IOOOml ；i.生產發酵將步驟h得到的種子液以15%體積比的接種量，接種于發酵液培養基中，于40°C培養48小時，以殘糖降到I克/ml時，發酵結束；
中藥提取液的制備
所述的中草藥提取液，由下列步驟制備而成把中藥辣寥、狼毒、威靈仙、北鮮皮、蒼耳按照重量比5:3:1:1:1混合，加入10倍體積的4°的酒精浸泡24-72小時，再將浸泡后的藥物在沸水條件下煎20-30分鐘，浙出藥液待用。環保劑的配制(混合發酵)
按重量比，沼澤紅假單孢菌枯草芽孢菌德氏乳酸桿菌=3:4:7混合后加入到混合菌液培養基中發酵15天，活菌數達到10億/ml，PH<4時；再加入I. 5%體積比的中藥提取液，即可完成。 本發明中所述的微生物均由中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)購得，其中，沼澤紅假單抱菌(Rhodo pseudmonas palustris):枯草芽抱桿菌(Rhodo pseudmonaspalustris):編號為 I. 2352,德氏乳酸菌(Lactobacillus delbrueckill):編號 I. 1482。
將此環保劑用于四川省宜賓市垃圾處理廠，經宜賓市環境監測站監測硫化氫減少50%，氨氣減少81%。(見圖I)蒼蠅顯著減少。垃圾場使用環保劑，三天就見到效果，解決了蒼蠅和臭氣兩大難題，蒼蠅和臭氣明顯減少，給垃圾場員工創造了一個良好的工作環境，周邊農民表示滿意。
權利要求
1.微生物環保劑，其特征是包括沼澤紅假單孢菌、枯草芽孢菌、德氏乳酸桿菌形成的混合菌和中藥提取液；按重量比，沼澤紅假單孢菌枯草芽孢菌德氏乳酸桿菌=3:4:7 ;按體積比，中藥提取液在混合菌中的比例為1%_2%。
2.如權利要求I所述的微生物環保劑，其特征是沼澤紅假單孢菌，由下列步驟制備而成a.制作搖瓶種子液將經過馴化的沼澤紅假單孢菌的單個菌落，接種到液體培養基中，于30°C培養48小時，得到搖瓶種子液； 所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液醋酸鈉O. 2克，氯化鈉O. 1克，硫酸鎂0.1克，磷酸ニ氫鉀O. 05克，硫酸氨O. I克，氯化鈣O. 01克，IOOml水，PH為6. 6 ;121°C滅菌30分鐘，冷卻備用； b.生產ー級種子液將步驟a得到的沼澤紅假單孢菌搖瓶種子液以10%體積比的接種量，接種到沼澤紅假單孢菌一級種子液體培養基在厭氧環境30°C培養72小時，光照強度為ΙΟΟΟΙχ，菌數達30億/ml，得到沼澤紅假單孢菌一級種子液； 所述沼澤紅假單孢菌ー級種子液培養基為按下述比例配制的混合液磷酸ニ氫鉀I. O克，氯化鈣O. 1克，碳酸氫鈣3克，醋酸鈉1克，氯化鈉1. O克，氯化鎂O. 5克，氯化胺I. O克，微量元素貯液1ml，生長輔助因子貯液1ml，水1000ml ；PH=6. 6，121°C滅菌30分鐘，冷卻備用； 所述的微量元素貯液為氯化亞鐵1800毫克，氯化鈷250毫克，氯化鎳10毫克，氯化銅10毫克，氯化錳70毫克，氯化鋅100毫克，硼酸500毫克，錳酸鉀30毫克，硒酸鈉10毫克，水 IOOOml ； 所述生長因子貯液為生物素10毫克，尼克酸35毫克，硫氨素30毫克，對氨基苯甲酸20毫克，鹽酸比多醛10毫克，泛酸鈣10毫克，維生素B12毫克，水IOOml ； c.生產發酵(ニ級發酵):將步驟b得到的沼澤紅假單孢菌ー級種子液以10%體積比接種到發酵培養液中，所述的發酵培養液同于步驟b的一級種子液培養基，培養條件同于步驟b，發酵96小時，檢測活菌數已達到30億/ml時停止發酵； 最后對沼澤紅假單孢菌發酵液的活菌含量進行常規平板計數檢測。
3.如權利要求I所述的微生物環保劑，其特征是所述的枯草芽孢菌，由下列步驟制備而成 d.制作搖瓶種子液將經過馴化的枯草芽孢菌的單個菌落，接種到液體培養基中，于30°C培養48小時，得到搖瓶種子液； 所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液蛋白胨1. O克，葡萄糖1. O克，牛肉膏1.O克，硫酸ニ氫鉀O. 5克，硫酸錳O.1克，水1000ml ；PH=7. 5 ； e.生產ー級種子液將步驟d得到的枯草芽孢菌搖瓶種子液以3%體積比的接種量，接種到枯草芽孢菌ー級種子液體培養基在厭氧環境30°C培養20小時，光照強度為ΙΟΟΟΙχ，菌數達30億/ml，得到枯草芽孢菌ー級種子液；枯草芽孢菌ー級種子液培養基與步驟d相同； f.生產發酵(ニ級發酵)將步驟e得到的枯草芽孢菌ー級種子液以5%體積比接種到發酵培養液中，所述的發酵培養液同于步驟e的一級種子液培養基，培養條件同于步驟e。
4.如權利要求I所述的微生物環保劑，其特征是所述的德氏乳酸菌，由下列步驟制備而成g.制作搖瓶種子將經過馴化的德式乳酸菌單個菌落接種到德氏乳桿菌液體培養基中，37°C培養36小時，得到搖瓶種子液；所述的液體培養基為按下述比例配制的混合液酵母膏5克，蛋白胨5克，葡萄糖9克，吐溫80 O. 5克，磷酸ニ氫鉀2克，番茄汁100ml，水1000ml ；PH=5. 6，121°C滅菌15分鐘；h.生產ー級種子液將步驟g得到的德氏乳酸桿菌種子液以5%體積比的接種量，接種于ー級種子液體培養基中，于45°C培養40小時，至活菌數達到10億/ml，得到一級種子液； 所述的ー級種子液體培養基配方為按下述比例配制的混合液蔗糖10克，糖蜜25克，蛋白胨5克，酵母膏5克，硫酸鎂O. 5克，氯化鈉O. I克，磷酸ニ氫鉀O. 5克，水IOOOml ； i.生產發酵將步驟h得到的種子液以15%體積比的接種量，接種于發酵液培養基中，于40°C培養48小吋，以殘糖降到I克/L吋，發酵結束； 所述發酵液培養基配方為按下述比例配制的混合液，糖蜜40克，蔗糖20克，麥根18克，蛋白胨5克，酵母膏5克，硫酸鎂O. 5克，氯化鈉O. I克，磷酸ニ氫鉀O. 5克，水1000ml。
5.如權利要求I所述的微生物環保劑，其特征是所述的中草藥提取液，由下列步驟制備而成把中藥辣寥、狼毒、威靈仙、北鮮皮、蒼耳按照重量比5:3:1:1:1混合，加入10倍體積的4°的酒精浸泡24-72小吋，再將浸泡后的藥物在沸水條件下煎20-30分鐘，浙出藥液待用。
6.如權利要求I所述的微生物環保劑，其特征是所述的混合菌，由下列步驟制備而成 按重量比，沼澤紅假單孢菌枯草芽孢菌德氏乳酸桿菌=3:4:7混合后加入到混合菌液培養基中發酵15天，活菌數達到10億/ml，PH<4時混合液制備完成； 所述的混合菌培養基為為按下述比例配制的混合液糖蜜30%，硫酸鎂1%，硫酸亞鐵O.4%，磷酸ニ氫鉀1%，煮沸放至室溫。
全文摘要
本發明公開了一種微生物環保劑，其特征是包括沼澤紅假單孢菌、枯草芽孢菌、德氏乳酸桿菌混合后和中藥提取液；按重量比，沼澤紅假單孢菌枯草芽孢菌德氏乳酸桿菌=3:4:7；按體積比，中藥提取液在混合菌中的比例為1%-2%。本發明的積極效果在于本發明通過復合菌液與中草藥提取液混合發酵，促使中藥成分進一步激活，與菌體孢外酶共同作用抑制蟲卵的孵化，減少了成蠅的生成。由于中草藥與菌液發酵培養基有特殊氣味，對成蠅有著誘殺作用，也可有效阻隔臭源的臭氣散發。本發明的微生物環保劑對人體無害，成本低，制備工藝簡單，操作簡便，除臭滅蠅效果顯著，較好的解決了垃圾填埋場、垃圾中轉站及化糞池的蚊蠅和惡臭問題，達到了良好的效果。
文檔編號A61L101/52GK102813949SQ20121030700
公開日2012年12月12日 申請日期2012年8月27日 優先權日2012年8月27日
發明者姜德油 申請人:宜賓市萬華生物環保有限公司