專利名稱：一種治療淋巴瘤的組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法，尤其是一種由傳統(tǒng)中藥組成的組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
淋巴細胞發(fā)生了惡變即稱為淋巴瘤(Malignant lymphoma,ML),按照“世界衛(wèi)生組織淋巴系統(tǒng)腫瘤病理分類標準”，目前已知淋巴瘤有近70種病理類型，大體可分為霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤兩大類。在我國，霍奇金淋巴瘤占淋巴瘤的9% 10%，是一組療效相對較好的惡性腫瘤；非霍奇金淋巴瘤占全部淋巴瘤病例的90%左右，并且近十幾年來發(fā)
病率逐年升高。目前淋巴瘤的治療以化療為主，但幾乎所有的化療藥物都有骨髓抑制、脫發(fā)、胃腸道反應(yīng)、肝腎功能損傷等副反應(yīng)，只是發(fā)生程度和側(cè)重面不同而已。近年來，臨床上出現(xiàn)了用以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)的方藥來治療本病的方法，也取得了一定的成效，但這些方藥以湯劑為主，劑型落后，質(zhì)量可控性差，不方便使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題是提供一種治療淋巴瘤的中藥組合物。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供一種組合物的制備方法，將其制成現(xiàn)代制劑，方便使用。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出了下述技術(shù)方案—種治療淋巴瘤的組合物，其特征在于所述的組合物由下列重量份數(shù)的原料制成全蝎3-9份，蜈蚣2-5份，僵蠶10-20份，貓爪草20-40份，蜀羊泉15-25份，鬼箭羽10-20份，天南星15-25份，清半夏1015份。該組合物優(yōu)選由下列重量份數(shù)的原料制成全蝎6份，蜈蚣3份，僵蠶15份，貓爪草30份，蜀羊泉20份，鬼箭羽15份，天南星20份，清半夏12份。全蝎為鉗蝎科動物東亞鉗蝎Buthus martensii Karsch的干燥體。娛!I公為娛!I公科動物少棘巨娛蟻Scolopendrasubspinipes mutilans L. Koch 的干燥體。僵蠶為蠶娥科昆蟲家蠶Bombyx mori Linnaeus. 4 5齡的幼蟲感染(或人工接種)白僵菌 Beauveria bassiana(Bals. ) Vuillant 而致死的干燥體。貓爪草為毛茛科植物小毛茛Ranunculus ternatus Thunb.的干燥塊根。蜀羊泉為爺科植物青杞Solanum septemlobum Bunge的全草。鬼箭羽為衛(wèi)矛科植物衛(wèi)矛Euonymus alatus (Thunb. ) Sieb.的具翅狀物枝條或翅狀附屬物。天南星為天南星科植物天南星Arisaema erubescens (Wall. ) Schott.、異葉天南星 Arisaema heterophyllum BI.或東北天南星 Arisaema amurense Maxim.的干燥塊莖。
清半夏為天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb. )Breit.的干燥塊莖經(jīng)炮制加工后的飲片。炮制方法如下取凈半夏，大小分開，用8%白礬溶液浸泡至內(nèi)無干心，口嘗微有麻舌感，取出，洗凈，切厚片，干燥。每IOOkg半夏，用白礬20kg。方中全蝎、蜈蚣、僵蠶息風鎮(zhèn)痙，攻毒散結(jié)，通絡(luò)止痛；貓爪草散結(jié)消腫；天南星、清半夏祛痰降逆；蜀羊泉 、鬼箭羽清熱解毒；諸藥合用，共奏攻毒散結(jié)、消腫降逆之功。針對淋巴瘤的病理特點，可有效防治該病。本發(fā)明所述中藥組合物治療淋巴瘤的技術(shù)效果可通過下列試驗體現(xiàn)。試驗I、本發(fā)明組合物對小鼠T細胞淋巴瘤細胞的抑制作用I材料與方法I. I 材料I. I. I腫瘤細胞株EL-4小鼠淋巴瘤細胞，購自中國科學院上海細胞生物研究所細胞庫。培養(yǎng)條件懸浮生長于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中(含青霉素100U/ml，鏈霉素100mg/L)，置5% C02，37°C培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。I. I. 2藥品及試劑本發(fā)明組合物(按實施例17方法自制)，體外實驗前取膠囊內(nèi)容物于研缽中研磨，并用含DMSO的RPMI-1640培養(yǎng)基(DMS0的含量不超過1% )配制成不同濃度的溶液，微孔濾膜過濾除菌，體內(nèi)抑瘤實驗前取膠囊內(nèi)容物于研缽中研磨，O. 5%CMC-Na配制成不同濃度，高壓滅菌。RPMI-1640，Hyclone公司。胎牛血清(FBS)，PAA公司。二甲基亞砜(DMSO), Sigma公司。MTT (噻唑藍),Sigma公司。I. I. 3動物4-6周齡BALB/c-nu雄性裸小鼠，體重15_17g，由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，SPF條件下飼養(yǎng)。I. I. 4耗材及儀器CO2孵育箱，電子分析天平、酶標儀。I. 2 方法I. 2. I體外抑制EL-4細胞生長的作用(MTT法)按照文獻描述的方法進行實驗。取對數(shù)生長期的EL-4細胞，用含10%胎牛血清1640培養(yǎng)基配成單個細胞懸液，計數(shù)板計數(shù)2 X IO4個細胞，于96孔培養(yǎng)板內(nèi)每孔接種180ml (每孔含2 X IO4個細胞，經(jīng)反復(fù)試驗得出較為合適的細胞數(shù)目)。本發(fā)明組合物設(shè)5個濃度，分別為5. 0、2. 5、1.25、0. 625、0. 3125g生藥/L，每孔加入藥物20ml ;對照組(培養(yǎng)液及細胞，但未加藥物)，加等量的細胞懸液；同時空白組(只有培養(yǎng)液)，加入等量培養(yǎng)液。每組設(shè)5個平行孔。將接種細胞96孔板移入培養(yǎng)箱中，在37°C，5% C02及飽和濕度條件下，分別培養(yǎng)48、72和96h后，每孔加入MTT溶液(5mg/mL) 20mL,放入孵箱繼續(xù)孵育4h。終止培養(yǎng)，1000r/min離心lOmin，小心吸除培養(yǎng)液上清。每孔加入150mLDMS0，振蕩15min，使結(jié)晶物充分溶解。于酶標儀490nm處測各孔吸光度(A)值，并計算藥物對細胞生長的抑制率，細胞增殖抑制率(％ ) = (I-本發(fā)明組合物組A值/對照組A值)X 100%。試驗重復(fù)3次。并用Logti法計算半數(shù)抑制濃度(IC50)值。I. 2. 2體內(nèi)抑瘤試驗利用MNU誘導(dǎo)C57BL/6小鼠胸腺T細胞淋巴瘤生成。按照細胞原代培養(yǎng)取材方法在超凈工作臺內(nèi)進行腫瘤組織的取材，采用機械分散法制備成單細胞懸液，將收集的淋巴瘤單細胞懸液，調(diào)整濃度為I X IO7個/mL。在每只BALB/c裸鼠右腋皮下接種O. 2mL細胞懸液。接種IOd左右,成瘤率達100%,選擇無出血、壞死、感染、腫瘤直徑為O. 5-0. 6cm的裸鼠進行實驗。將荷瘤裸鼠按腫瘤大小隨機分為5組，每組8只。生理鹽水組生理鹽水O. 2ml/只，腹腔注射，每日給藥。陽性對照組環(huán)磷酰胺20mg/kg，腹腔注射，每日給藥。本發(fā)明組合物組(高劑量38. 7g生藥/kg、中劑量19. 4g生藥/kg、低劑量9. 7g生藥/kg三個劑量組)灌胃，每日給藥。每天觀察裸鼠的活動情況及皮下瘤的生長。用藥21d后頸斷處死裸鼠，稱體重，檢測腫瘤的體積、瘤重、計算各組抑瘤率，抑瘤率=(用藥組平均瘤質(zhì)量/生理鹽水組平均瘤質(zhì)量)X 100%。I. 2. 3統(tǒng)計學方法用SPSS13. O統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果以X±SD表示，用單因素方差分析及SNK檢驗分析，用LSD法進行組間多重比較。2 結(jié)果2. I對EL-4細胞的作用試驗結(jié)果見表1，結(jié)果表明，本發(fā)明組合物對EL-4細胞具有明顯的抑制作用，并隨著劑量的增加，抑制作用越強，呈一定的時間和劑量依賴性。表I本發(fā)明組合物對EL-4細胞的作用
權(quán)利要求
1.一種治療淋巴瘤的組合物，其特征在于所述的組合物由下列重量份數(shù)的原料制成全蝎3-9份，蜈蚣2-5份，僵蠶10-20份，貓爪草20-40份，蜀羊泉15-25份，鬼箭羽10-20份，天南星15-25份，清半夏10-15份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種治療淋巴瘤的組合物，其特征在于所述的組合物由下列重量份數(shù)的原料制成全蝎6份，蜈蚣3份，僵蠶15份，貓爪草30份，蜀羊泉20份，鬼箭羽15份，天南星20份，清半夏12份。
3.權(quán)利要求I所述一種治療淋巴瘤的組合物的制備方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成取全蝎、蜈蚣、僵蠶3味藥材，加入90%乙醇悶潤24小時，以頻率為2450MHz±50MHz的微波干燥，粉碎成細粉，備用；取貓爪草、蜀羊泉、鬼箭羽、天南星、清半夏5味藥材，粉碎，混勻，按每g藥材加入15mL的比例關(guān)系加入水，煎煮2次，每次2小時，合并藥液，濾過，濃縮，噴霧干燥，加入上述全蝎、蜈蚣、僵蠶3味藥材的細粉，混勻，加入輔料，制成藥學可接受的口服制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述一種治療淋巴瘤的組合物的制備方法，其特征在于所述的口服劑型選自顆粒、片、膠囊、滴丸中的一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療淋巴瘤的組合物，該組合物由下列重量份數(shù)的原料制成全蝎3-9份，蜈蚣2-5份，僵蠶10-20份，貓爪草20-40份，蜀羊泉15-25份，鬼箭羽10-20份，天南星15-25份，清半夏10-15份。本組合物組方合理，治療淋巴瘤療效確切。本發(fā)明還涉及上述組合物的制備方法取全蝎、蜈蚣、僵蠶3味藥材，加入乙醇悶潤微波干燥，粉碎成細粉，備用；取貓爪草、蜀羊泉、鬼箭羽、天南星、清半夏5味藥材，水煎煮，濾過，濃縮，噴霧干燥，混勻，加入輔料，制成藥學可接受的口服制劑。采用該方法制備，能保證本組合物方便使用、質(zhì)量可控。
文檔編號A61P35/00GK102940748SQ20121054031
公開日2013年2月27日 申請日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者陳斌, 賈曉斌 申請人:江蘇省中醫(yī)藥研究院