一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物及其制備方法和用途。該中藥組合物是由下述重量份配比的原料藥制成：大黃、黃芪、紅花=3-45:9-85:3-65。按照一定的提取純化工藝，制備成注射劑、凍干粉針或其他口服制劑。動物實驗證實，該中藥組合物可顯著改善慢性腎小球腎炎大鼠血液流變學(xué)指標，降低血清IL-6、IL-8和TNF-α水平；顯著降低高血壓腎病大鼠血肌酐和尿素氮等指標；顯著減少慢性腎功能衰竭大鼠血清尿素氮、血肌酐含量，增加血清白蛋白含量；還可改善慢性腎功能衰竭大鼠血液流變學(xué)各指標水平，病理結(jié)果表明本發(fā)明可以改善和抑制慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭對腎臟的損傷。
【專利說明】一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物及其制備方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中藥組合物，尤其涉及一種治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的藥物及其制備方法。具體地說屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]慢性腎臟疾病(Chronic Kidney Disease, CKD)臨床上包括慢性腎小球腎炎、腎病綜合征、膜性腎病、糖尿病腎病、高血壓腎病以及各種繼發(fā)性腎病等,具有發(fā)病率高、患發(fā)心血管病患病率高、病死率高的特點，另外社會對慢性腎臟疾病的知曉率不高，防治率低，患發(fā)心血管病的知曉率低，目前已經(jīng)成為全球公開健康問題。主要從兩個方面診斷是否患有CKD:(1)腎臟損傷(表現(xiàn)出腎臟結(jié)構(gòu)和功能異常)≥3個月，可以有或無腎小球濾過率(GRF)下降；(2)腎小球濾過率(6?10<601111/1^11/1.73m2，時間≥3個月，有或無損傷依據(jù)。
[0003]慢性腎臟疾病發(fā)展到中后期，就有可能發(fā)展成為慢性腎功能衰竭，甚至尿毒癥，從而嚴重危害患者的健康。
[0004]國內(nèi)外早有關(guān)于大黃應(yīng)用于治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的報道，其主要含有蒽醌和鞣酸類等多種成分，治療作用主要表現(xiàn)在:(I)明顯改善氮質(zhì)血癥。大量實驗證明大黃可降低慢性腎功能衰竭患者血清肌酐和尿素氮；(2)活血化瘀作用，能改善腎臟疾病人血液的高凝、高黏狀態(tài)；(3)抑制系膜細胞及腎小管上皮細胞增生；(4)減輕腎臟受損后的代償性肥大，抑制殘余腎的高代謝狀態(tài)。(5)對自由基的清除作用，以及對機體的氧化與抗氧化起到平衡的作用。
[0005]中藥黃芪含有黃芪多糖、黃酮類、黃芪皂苷、大豆皂苷等多種成分，具有顯著的免疫調(diào)節(jié)活性和抗氧化作用，可有效提高腎小球濾過率，減輕腎臟疾病理損傷，保護和改善殘余腎單位。
[0006]紅花含有紅花苷、紅花黃色素、兒茶酚等成分，中醫(yī)認為紅花味辛，是活血通經(jīng)、散瘀止痛之良藥。現(xiàn)代研究結(jié)果表明它可抑制血栓形成、降低纖維蛋白原和凝血酶作用，減輕凝血酶對內(nèi)皮細胞的損傷及刺激作用、改善腎臟的血液循環(huán)，降低血管阻力、降低紅細胞剛性指數(shù)，增強紅細胞的變形能力及攜氧能力。
[0007]現(xiàn)有技術(shù)雖然公開了大黃、黃芪配伍使用治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭，但它們的制備工藝多存在工序復(fù)雜，成本高，有效成分提取率偏低等問題。經(jīng)過本發(fā)明組方與腎康注射液和大黃、黃芪配伍組藥效學(xué)比較證實，本發(fā)明組方治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的效果明顯優(yōu)于大黃、黃芪配伍組，和腎康注射液的治療效果相當。因此，本發(fā)明較現(xiàn)有技術(shù)制備工藝更加得當，不僅大大減少了能源消耗和節(jié)省了提取時間，而且應(yīng)用本發(fā)明工藝制成的中藥制劑有較高的藥物穩(wěn)定性、生物利用度和好的治療效果，組方也更加精當。另外迄今為止，本發(fā)明人尚未見到任何報道記載本發(fā)明所述藥物的具體原料配比關(guān)系，也未見有人公開本發(fā)明所述的原料配比按照本發(fā)明制備工藝制成中藥制劑用于治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭。所以本發(fā)明是發(fā)明人創(chuàng)造性研制成功的一種治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的中藥制劑。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明人公開了一種治療慢性腎臟疾病的中藥組方制劑，該藥物由大黃、黃芪和紅花制成，全方起到通腑降濁，健脾益氣，活血化瘀的功效，可有效治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭。
[0009]本發(fā)明是由發(fā)明人經(jīng)過多年的實驗研究總結(jié)確定的，是符合中醫(yī)理論新的治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的藥物。
[0010]中醫(yī)理論認為大黃苦寒，性重濁，主沉降，力猛善行，為瀉火攻積的要藥，又具有降逆泄?jié)?，祛瘀排毒的功能，故可用于治療慢性腎臟疾病及慢性腎功能衰竭，但因藥力較猛，故需減量，配以大量甘溫益氣之黃芪緩和其藥性，大量的黃芪，既可補脾肺之氣，又可利小便，通血脈，合用可祛邪而不傷正，又佐以紅花活血養(yǎng)血，增強大黃祛瘀之功，并可改善腎臟的血液循環(huán)，降低血管阻力、降低紅細胞剛性指數(shù)，增強紅細胞的變形能力及攜氧能力。三味藥物合用，相得益彰，標本兼治，可有效治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭。
[0011]經(jīng)動物實驗驗證，結(jié)果表明本發(fā)明用于治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭療效確切、可有效降低血肌酐、尿素氮，改善血流變指標。
[0012] 本發(fā)明是由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃芪、紅花=3-45:9-85:3-65。
[0013]本發(fā)明優(yōu)選下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃芪、紅花=6-35:20-75:10-45。
[0014]本發(fā)明更優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃芪、紅花=15-20:35-60:25-40 ο
[0015]本發(fā)明還優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃苗、紅花=20:60:20。
[0016]本發(fā)明還優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃芪、紅花=20:30:60。
[0017]本發(fā)明還優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃芪、紅花=32:26:16。
[0018]本發(fā)明還優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃苗、紅花=40:40:40。
[0019]本發(fā)明還優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃苗、紅花=45:70:65。
[0020]本發(fā)明還優(yōu)選由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃苗、紅花=25:75:50。
[0021]以上重量份配比是以生藥計算的，如優(yōu)選的重量份配比大黃:黃芪:紅花=900份:1400份:1300份，其中份表示重量份，每份若以克為單位，以上組成可制成藥物制劑1000劑，所述1000劑是指制成的成品藥物制劑，如制成注射劑1000毫升，膠囊劑1000粒，片劑1000片，顆粒劑1000克，滴丸1000丸，口服液1000ml等。以上重量配比的比例是經(jīng)過科學(xué)篩選得到的，對于不同病情，不同體質(zhì)的病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成量的配比。
[0022]本發(fā)明的目的在于提供一種治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的中藥組合物。
[0023]本發(fā)明可以制成任何臨床常用制劑，包括注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、滴丸、口服液等劑型。為了更好的發(fā)揮各原料藥的藥效，本發(fā)明技術(shù)方案中優(yōu)選的制備方法如下:
(I)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加5-15倍量水浸泡10-30分鐘，第一次加熱超聲提取10-30分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取10-20分鐘，過濾，合并兩次水提液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，加入2%-5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為75%-80%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為80%-85%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到大黃、紅花提取液，備用;
(2)取黃芪切成薄片，加入5-10倍量水，第一次加熱超聲提取10-20分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取5-15分鐘，過濾，合并兩次水提液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到黃芪提取液，備用；
將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值6.7-8.2，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
[0024]本發(fā)明技術(shù)方案中更優(yōu)選的制備方法如下:
(1)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加10倍量水浸泡20分鐘，第一次加熱超聲提取20分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取10分鐘，過濾，合并兩次水提液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，加入5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為75%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為80%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)PH值7.4-7.7，得到大黃、紅花提取液，備用；
(2)取黃芪切成薄片，加入7倍量水，第一次加熱超聲提取15分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取10分鐘，過濾，合并兩次水提液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到黃芪提取液，備用；
將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值7.4-7.7，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
[0025]本發(fā)明技術(shù)方案中還優(yōu)選的制備方法如下:
(O取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加5-10倍量水，煎煮，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；先用水洗脫，收集洗脫液，然后用40%-80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，加入2%-5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為70%-80%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為75%-85%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到大黃、紅花提取液，備用;
(2)取黃芪切成薄片，加8-12倍水，煎煮，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；然后用60%-80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)PH值6.7-8.2，得到黃芪提取液，備用；
將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值6.7-8.2，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
[0026]本發(fā)明技術(shù)方案中更優(yōu)選的制備方法如下:
(O取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加6倍量水煎煮，合并提取液,過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；先用水洗脫，收集洗脫液，然后用50%-60%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，加入5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為75%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為80%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到大黃、紅花提取液，備用；
(2)取黃芪切成薄片，加入10倍量水，煎煮3次，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；然后用70%-75%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min,過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到黃芪提取液，備用；
將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值7.4-7.7，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
[0027]本發(fā)明技術(shù)方案中還優(yōu)選的制備方法如下:
(1)取紅花和粉碎成細顆粒的大黃置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為30-50L/h，萃取壓力為10-50MPa，萃取溫度為35_60°C，萃取時間為1.5-2.5h，從萃取釜流出的大黃和紅花高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為8Mpa,分離溫度I為30°C ;分離壓力II為6 Mpa,分離溫度II為25°C，收集大黃和紅花的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到大黃和紅花提取液，備用；
(2)取黃芪粉碎成細顆粒，和85%-95%的乙醇混合，置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為20-40L/h，萃取壓力為10-30MPa，萃取溫度為35_45°C，萃取時間為1.5-2.5h，從萃取釜流出的黃芪高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為6Mpa，分離溫度I為30°C ;分離壓力II為4Mpa，分離溫度II為25°C，收集黃芪的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到黃芪提取液，備用；
將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值6.7-8.2，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
[0028]本發(fā)明技術(shù)方案中更優(yōu)選的制備方法如下:
(1)取紅花和粉碎成細顆粒的大黃置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為40L/h，萃取壓力為25MPa，萃取溫度為45°C，萃取時間為2.5h，從萃取釜流出的大黃和紅花高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為8 Mpa，分離溫度I為30°C;分離壓力II為6 Mpa,分離溫度II為25°C，收集大黃和紅花的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到大黃和紅花提取液，備用；
(2)取黃芪粉碎成細顆粒，和80%的乙醇混合，置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為30L/h，萃取壓力為20MPa，萃取溫度為30°C，萃取時間為2h，從萃取釜流出的黃芪高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為6Mpa，分離溫度I為30°C ;分離壓力II為4Mpa，分離溫度II為25°C，收集黃芪的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到黃芪的提取液，備用；
將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值7.4-7.7，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
[0029]本發(fā)明還可按常規(guī)方法制備成口服制劑，包括片劑、顆粒劑或膠囊劑。
[0030]( 1)取紅花和大黃粗顆粒，經(jīng)過兩次超聲處理和兩次乙醇沉淀后，過濾，濃縮成浸膏，干燥，備用；取黃芪切片，經(jīng)兩次超聲處理后，合并提取液，濃縮成浸膏，干燥。合并浸膏，加入適當?shù)妮o料，常規(guī)方法制成片劑、顆粒劑、膠囊劑等。
[0031](2)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃、黃芪，經(jīng)過煎煮后，加入大孔樹脂中吸附分離，收集流出液，現(xiàn)用水洗脫，再用乙醇梯度洗脫，收集洗脫液，合并流出液和洗脫液，適當濃縮，加入適當?shù)妮o料，常規(guī)方法制成片劑、顆粒劑、膠囊劑等。
[0032](3)取紅花和大黃、黃芪細顆粒置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，得到的萃取液適當濃縮，加入適當?shù)妮o料，常規(guī)方法制成片劑、顆粒劑、膠囊劑等。
[0033]本發(fā)明技術(shù)方案具有創(chuàng)造性的有益效果有:
一、組方藥物的提取工藝
本發(fā)明組方由大黃、黃芪和紅花組成，其組方精簡得當，用于治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭作用顯著。在確定制備工藝過程中，發(fā)明人綜合考慮了藥材物理性質(zhì)、有效成分特性和生產(chǎn)成本等諸多要素，具體的改進有:
(1)將大黃、紅花和黃芪進行超聲提取，保證有效成分的提取率明顯高于常規(guī)的水煎煮提取方法，因為超聲提取是通過超聲波的空化作用、機械作用和熱作用，這些獨特的作用特點可促使藥材細胞組織破裂或變形，從而加速有效成分的釋放和溶出，提取的更充分，并可大大縮短提取時間和降低能耗、保護環(huán)境，有利于產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)化和推廣使用。
[0034](2)大黃、紅花和黃芪采用水提后，進入大孔樹脂柱分離純化，較之普通的水提醇沉工藝能更好的分離有效成分。并可增加產(chǎn)品的穩(wěn)定性，縮減了生產(chǎn)周期。
[0035](3)大黃、紅花和黃芪采用CO2超臨界萃取，操作簡便，且可以大大減少有機溶劑的使用，節(jié)省資源。
[0036]二、本發(fā)明用于治療慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的效果
為證實本發(fā)明的創(chuàng)造性，發(fā)明人將本發(fā)明組方制劑對慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭的治療作用，與已授權(quán)發(fā)明專利96117626.1的腎康注射液和按照本發(fā)明提取純化工藝制成的大黃、黃芪注射液進行比較，在進行對比實驗研究中，以相同的給藥劑量觀察比較三組藥物對慢性腎小球腎炎和慢性腎功能衰竭大鼠的治療效果，以闡明本發(fā)明產(chǎn)品的顯著療效，說明本發(fā)明有顯著的有益技術(shù)效果。本發(fā)明對慢性腎臟疾病和慢性腎功能衰竭大鼠的治療作用實驗資料如下:
實驗例I本發(fā)明對慢性腎小球腎炎大鼠的治療作用
1.實驗動物SD大鼠70只，雌雄各半，體重180-220g，購自第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心。新西蘭白兔6只，購自西安市迪樂普生物資源開發(fā)有限公司。
[0037]2.實驗藥物本發(fā)明藥物注射液，腎康注射液和大黃、黃芪組注射液，其中本發(fā)明和大黃、黃芪組注射液每毫升均相當于原生藥3.6g，以上藥物均由西安世紀盛康藥業(yè)有限公司提供。
[0038]3.實驗方法
(I)制備兔抗大鼠胸腺細胞血清取無菌的SD大鼠，處死，小心摘取大鼠胸腺和肝臟。將肝臟用PBS緩沖液沖洗干凈后制成肝粉待用；另將胸腺置于PBS緩沖液中，沖洗2-3次，小心分離、去除其表面的淋巴結(jié)和血管，置200目不銹鋼網(wǎng)篩上，用解剖針輕輕劃破胸腺游離出胸腺細胞，用PBS緩沖液沖洗，收集胸腺細胞懸液，離心10min，用PBS緩沖液重制2 X IO7/ ml的胸腺細胞懸液，按體積比1:2混合胸腺細胞懸液和弗氏完全佐劑，充分混勻，以混合后的懸液作為大鼠胸腺細胞免疫抗原液。將大鼠胸腺細胞免疫抗原液多點注射于6只新西蘭白兔背部皮下，每只兔子注射3ml。常規(guī)飼養(yǎng)2周后，兔耳緣靜脈注射2X IO7/ ml的胸腺細胞懸液，每只注射1.5ml。7d后心臟抽取兔子血液，收集兔血清。用免疫擴散法測兔抗大鼠胸腺細胞血清效價為1:160-1:320。兔抗大鼠胸腺細胞血清于56°C、30 min滅活后，分別用同個體大鼠肝粉吸附以去除非特異性抗體，室溫離心30min，棄去肝粉，收集兔抗大鼠胸腺細胞血清，_20°C保存?zhèn)溆谩?br> [0039] (2)慢性腎小球腎炎大鼠模型的制備取健康SD大鼠60只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，收集尿液，檢測尿蛋白，結(jié)果均為陰性。隨即分為正常對照組、模型組、本發(fā)明組、腎康注射液組和大黃、黃芪組，每組12只。除給予正常對照組大鼠尾靜脈注射2ml生理鹽水外，其余組大鼠一次性尾靜脈注射兔抗大鼠胸腺細胞血清2ml。
[0040](3)給藥方法及指標測定注射兔抗大鼠胸腺細胞血清6天后，本發(fā)明組、腎康注射液組和大黃、黃芪組大鼠尾靜脈注射相應(yīng)中藥組合物8g生藥/kg，正常對照組和模型組給予等體積生理鹽水，每天給藥一次，連續(xù)給藥2周。末次給藥24小時后，腹主動脈取血，分別測定血流變和分離血清測定IL-6、IL-8和TNF-α水平，解剖腎臟，進行病理學(xué)考察。
[0041]4.結(jié)果
(I)本發(fā)明對慢性腎小球腎炎大鼠血液流變學(xué)的影響 表1本發(fā)明對慢性腎小球腎炎大鼠血液流變學(xué)的影響(iii)
【權(quán)利要求】
1.一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于它是由下述重量份配比的原料藥制成:大黃、黃芪、紅花=3-45:9-85:3-65。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=6-35:20-75:10-45。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=15-20:35-60:25-40ο
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=20:60:20。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=20:30:60。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=32:26:16。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=40:40:40。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=45:70:65。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療慢性腎臟疾病的中藥組合物，其特征在于各原料藥的重量配比為:大黃、黃芪、紅花=25:75:50。
10.權(quán)利要求1-9任一所述治療慢性腎臟疾病的中藥組合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:(I)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加5-15倍量水浸泡10-30分鐘，第一次加熱超聲提取10-30分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取10-20分鐘，過濾，合并兩次水提液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，加入2%-5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為75%-80%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為80%-85%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到大黃、紅花提取液，備用； (2)取黃芪切成薄片，加入5-10倍量水，第一次加熱超聲提取10-20分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取5-15分鐘，過濾，合并兩次水提液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到黃芪提取液，備用； 將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值6.7-8.2，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
11.權(quán)利要求1-9任一所述治療慢性腎臟疾病的制備方法，其特征在于包括以下步驟:(1)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加10倍量水浸泡20分鐘，第一次加熱超聲提取20分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取10分鐘，過濾，合并兩次水提液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，加入5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為75%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為80%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)PH值7.4-7.7，得到大黃、紅花提取液，備用；(2)取黃芪切成薄片，加入7倍量水，第一次加熱超聲提取15分鐘，過濾；第二次加熱超聲提取10分鐘，過濾，合并兩次水提液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到黃芪提取液，備用； 將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值7.4-7.7，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
12.權(quán)利要求1-9任一所述治療慢性腎臟疾病的中藥組合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:(I)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加5-10倍量水，煎煮，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；先用水洗脫，收集洗脫液，然后用40%-80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，加入2%-5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為70%-80%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.19-1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為75%-85%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-4倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到大黃、紅花提取液，備用； (2)取黃芪切成薄片，加8-12倍水，煎煮，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；然后用60%-80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)PH值6.7-8.2，得到黃芪提取液，備用； 將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值6.7-8.2，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
13.權(quán)利要求1-9任一所述治療慢性腎臟疾病的中藥組合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:(I)取紅花和粉碎成粗顆粒的大黃，加6倍量水煎煮，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；先用水洗脫，收集洗脫液，然后用50%-60%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，加入5%明膠溶液去除鞣質(zhì)，過濾，加入乙醇使含醇量為75%，靜置，過濾，取濾液減壓濃縮至相對密度在60°C時1.21，回收乙醇，繼續(xù)加入乙醇使含醇量為80%，靜置，過濾，回收乙醇，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到大黃、紅花提取液，備用； (2)取黃芪切成薄片，加入10倍量水，煎煮3次，合并提取液，過濾，收集濾液，濃縮，進入大孔樹脂柱進行吸附分離，收集首次流出液；然后用70%-75%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇至無醇味，合并流出液，加入注射用水，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min,過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到黃芪提取液，備用； 將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值7.4-7.7，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
14.權(quán)利要求1-9任一所述治療慢性腎臟疾病的中藥組合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:(I)取紅花和粉碎成細顆粒的大黃置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為30-50L/h，萃取壓力為10-50MPa，萃取溫度為35_60°C，萃取時間為1.5-2.5h，從萃取釜流出的大黃和紅花高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為8 Mpa,分離溫度I為30°C ;分離壓力II為6 Mpa,分離溫度II為25°C，收集大黃和紅花的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)PH值6.7-8.2，得到大黃和紅花提取液，備用； (2)取黃芪粉碎成細顆粒，和85%-95%的乙醇混合，置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為20-40L/h，萃取壓力為10-30MPa，萃取溫度為35_45°C，萃取時間為1.5-2.5h，從萃取釜流出的黃芪高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為6Mpa，分離溫度I為30°C ;分離壓力II為4Mpa，分離溫度II為25°C，收集黃芪的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.2%-0.7%的活性炭，煮沸20-40min，過濾，調(diào)pH值6.7-8.2，得到黃芪提取液，備用； 將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值6.7-8.2，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
15.權(quán)利要求1-9任一所述治療慢性腎臟疾病的中藥組合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟::(I)取紅花和粉碎成細顆粒的大黃置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為40L/h，萃取壓力為25MPa，萃取溫度為45°C，萃取時間為2.5h，從萃取釜流出的大黃和紅花高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為8 Mpa，分離溫度I為30°C ;分離壓力II為6 Mpa,分離溫度II為25°C，收集大黃和紅花的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到大黃和紅花提取液，備用； (2)取黃芪粉碎成細顆粒，和80%的乙醇混合，置于萃取釜中進行CO2超臨界萃取，進入萃取釜的超臨界流體的流速為30L/h，萃取壓力為20MPa，萃取溫度為30°C，萃取時間為2h，從萃取釜流出的黃芪高壓流體，進入分離釜進行分離，分離壓力I為6Mpa，分離溫度I為30°C ;分離壓力II為4Mpa，分離溫度II為25°C，收集黃芪的萃取物，加入注射用水至藥液的2-3倍量，然后加入0.3%-0.5%的活性炭，煮沸30min，過濾，調(diào)pH值7.4-7.7，得到黃芪的提取液，備用； 將上述得到大黃和紅花提取液以及黃芪提取液合并，超濾，調(diào)PH值7.4-7.7，藥液經(jīng)裝有微孔濾膜的過濾器過濾后灌封，經(jīng)滅菌，制成小容量注射劑、大輸液，或再經(jīng)過冷凍干燥，制成凍干粉針制劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的治療慢性腎臟疾病的中藥組合物的制備方法，其特征在于按常規(guī)制劑方法制成臨床常用的所有劑型。
17.權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備治療慢性腎臟疾病及繼發(fā)性腎病的藥物中的應(yīng)用。
18.權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備治療慢性腎功能衰竭的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K9/19GK103893281SQ201210579625
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2012年12月28日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月28日
【發(fā)明者】曹鳳君, 呂延英, 詹芳, 王光建, 趙興, 王俊平 申請人:西安世紀盛康藥業(yè)有限公司