本發(fā)明涉及以純的或提取物形式提供的用于改善哺乳動物中肌肉品質(qualitémusculaire)的植物蛻皮素(phytoecdysone)。更特別地，本發(fā)明提供了肥胖哺乳動物之肌肉品質的改善，并特別地提供了進行減重飲食的肥胖哺乳動物之肌肉品質的改善。本發(fā)明還提供了肌肉萎縮的(sarcopéniques)哺乳動物的肌肉品質的改善。

背景技術：
肌肉品質可主要根據(jù)肌力(forcemusculaire)定義，其與肌肉的重量、蛋白質組成和脂質組成相關。肥胖哺乳動物中的肌肉品質通過肌肉中脂質的過量攝入而改變(Magnusson等，2008)。未代謝的脂質在肌纖維中積聚(Goodpaster等，2000；Galgani等，2008)導致肌肉代謝的變化，且特別地導致蛋白質合成的降低(Anderson等，2008；Sitnick等，2009)和線粒體活性的降低(Kelley等，2002)。通過可以使得肥胖哺乳動物減重和減脂的一種方法為采用低熱量飲食。然而，這樣的飲食是肌肉重量和力量顯著喪失的原因(Bopp等，2008)。類似地，老化導致肌肉重量和力量的病理性喪失，其可繼而導致運動性的異常喪失和跌倒風險的提高(Boirie，2008，2009；Zamboni等，2008；Chérin，2009；Rolland和Vellas，2009；Pahor等，2009)。肌肉萎縮(sarcopénie)是與衰老相關的生理現(xiàn)象，由此個體喪失肌肉重量，脂肪重量相應地增長。肌肉萎縮是可導致被稱為“肌肉萎縮性肥胖”的特殊肥胖病例的一種現(xiàn)象。因此，在基于營養(yǎng)之治療的情形下，能夠限制患有肥胖、肌肉萎縮或肌肉萎縮性肥胖的哺乳動物中肌肉品質之喪失的營養(yǎng)和藥物產品的發(fā)現(xiàn)是許多實驗室和制造商追求的目標，目的在于改善由營養(yǎng)學家和臨床醫(yī)生提供的對于患有肥胖、肌肉萎縮或肌肉萎縮性肥胖的哺乳動物的治療(Lynch，2004；Bonnefoy，2008；Chérin，2009；Kim等，2010)。植物蛻皮素是植物來源的蛻皮甾類。這些為三萜家族中的天然分子在植物界中相對豐富，其中它們存在于5％的野生植物中(Báthori和Pongrács，2005)。如以本申請人名義的專利FR2924346中所描述的，已知植物蛻皮素(尤其是20-羥基蛻皮酮)降低患有肥胖化飲食之哺乳動物中體脂的增多。此外，這些分子具有抗氧化性(Kuzmenko等，2001)且沒有毒性作用。

技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明人已經發(fā)現(xiàn)了植物蛻皮素的攝取(無論是否規(guī)律)可改善患有肌肉萎縮和/或肌肉萎縮性肥胖之肥胖哺乳動物的肌肉品質和/或力量。此處之肌肉品質和/或力量的改善理解為意指例如植物蛻皮素和特別的20-羥基蛻皮酮的攝取可提高進行肥胖化飲食哺乳動物中的瘦體重以及提高相同哺乳動物中肌肉蛋白質的含量。此外，植物蛻皮素的攝取降低了進行減重飲食之哺乳動物中瘦體重的喪失。最后，通過測試評估，這樣進行減重飲食之哺乳動物的肌力也通過植物蛻皮素的攝取保持了。當個體的體重指數(shù)(indicedemassecorporel，BMI)超過30時，認為其是肥胖的。在肌肉萎縮性肥胖的情況下，由于肌肉重量的喪失和相應脂肪重量的提高，BMI可小于30。因此，本發(fā)明提出使用植物蛻皮素，以及特別是20-羥基蛻皮酮來改善或維持肥胖和/或肌肉萎縮的哺乳動物的肌力。本發(fā)明的一種特別形式使用植物蛻皮素來降低肥胖和/或肌肉萎縮的哺乳動物肌肉的脂肪含量和/或提高其蛋白質含量。本發(fā)明的一種特別形式使用植物蛻皮素來維持進行減重低熱量飲食之肥胖哺乳動物的肌力。所用的植物蛻皮素可通過從含有植物蛻皮素的植物提取獲得。所用的植物蛻皮素還可合成。植物蛻皮素應當優(yōu)選地選自20-羥基蛻皮酮、羅漢松甾酮A、24-表-羅漢松甾酮A、24(28)-脫氫-羅漢松甾酮A、20，26-二羥基蛻皮酮或者這些中兩種或更多種的混合物。所用的植物蛻皮素可以以純的形式或者以植物提取物的形式提供，所述提取物已經被或多或少程度的富集。根據(jù)本發(fā)明使用的植物蛻皮素可以有利地以植物蛻皮素豐富之植物提取物形式提供，所述提取物含有按重量計至少1％的植物蛻皮素。這樣的提取物應當優(yōu)選地含有1％至7％的植物蛻皮素，更優(yōu)選地含有1.5％至3％且更優(yōu)選地按重量計仍含有2％。根據(jù)本發(fā)明制造出提取物的植物優(yōu)選地選自藜麥(quinoa)、菠菜(épinards)和真菌(champignons)。根據(jù)本發(fā)明的植物蛻皮素豐富的植物應優(yōu)選地來自藜麥提取物。這是因為藜麥為植物蛻皮素天然豐富的可食用偽谷類(Zhu等，2001.Dini等，2005)?？赡芾缤ㄟ^將提取物引入食品(例如乳制品或飲料)來用植物蛻皮素豐富的藜麥提取物的攝取補充飲食，或將其以例如軟膠囊的形式作為飲食補充消耗。目前為止，藜麥是食用植物，其尤其在植物蛻皮素上是最豐富的。藜麥種子含有植物蛻皮素的組合(Zhu等，2001)。這些植物蛻皮素在藜麥的種皮中特別豐富。例如，藜麥種子的60克部分(干重)含有15mg至20mg的20-羥基蛻皮酮。菠菜和某些真菌也可有利地用來產生植物蛻皮素豐富的植物提取物(Findeisen，2004)。根據(jù)本發(fā)明使用的植物蛻皮素有利地以組合物的形式存在，所述組合物可經口施用。所述組合物可例如為食品(例如飲料、乳制品或其他產品)。所述組合物當然還可為以丸劑形式的藥物類型，所述丸劑包含精確劑量的植物蛻皮素。附圖簡述圖1：代表在起始實驗方案中四組小鼠尸體重量的圖。圖2：代表四頭肌的甘油三酯含量相對于在第一方案中向小鼠進行的飲食和處理繪制的圖。圖3：示出四頭肌的蛋白質含量相對于在第一方案中向小鼠進行的飲食計劃和處理繪制的圖。圖4：代表四頭肌中基因表達水平相對于在第一方案中向小鼠進行的飲食計劃和處理繪制的圖。圖5：根據(jù)在第一方案中執(zhí)行的不同處理之小鼠的平均攝食量(千卡/天)。圖6：根據(jù)在第一方案中執(zhí)行的不同處理之小鼠的平均能量消耗(瓦特)。圖7：在低熱量飲食階段持續(xù)6周后，應用第二實驗方案，在用藜麥提取物(A)或安慰劑(B)補充的肥胖對象中瘦體重的變化。圖8：在低熱量飲食階段持續(xù)6周后，應用第二實驗方案，在用藜麥提取物(A)或安慰劑(B)補充的肥胖對象中使用“抓握測試(griptest)”測量之力量的變化。圖9：存在于根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的化合物中之植物蛻皮素的化學式。詳細描述在本發(fā)明中，打算提供濃縮劑量的純植物蛻皮素或使用植物蛻皮素豐富的植物提取物來改善患有肥胖、肌肉萎縮或肌肉萎縮性肥胖之個體的肌肉狀況。根據(jù)本發(fā)明，可以來自植物(例如藜麥)之提取物的形式提供這樣劑量的植物蛻皮素，其整合到例如個體正常飲食的食物組成部分中。特別地，4克的藜麥提取物富集有按重量計0.5％的植物蛻皮素，含有20毫克的植物蛻皮素。為了從藜麥種子獲得相同量的植物蛻皮素，將需要消耗50至100克未處理的種子(Dini等，2005)。與所述提取物所來自于的藜麥種子相比，根據(jù)本發(fā)明的藜麥提取物可含有高達50倍更多的植物蛻皮素。I-植物蛻皮素豐富的藜麥提取物(提取物A)的樣品制備方法所述方法包括用水順序提取，將500g的藜麥種子添加至2升的沸水，整個在80℃維持5分鐘。將水除去，并用2升的乙醇-水混合物(1∶1)進行第二次提取并在80℃下施加持續(xù)攪動20分鐘。這種順序提取從提取物中除去了在藜麥種子中豐富的皂苷類(Muir等，2002)，并且這將賦予所述提取物苦的味道。將乙醇提取物通過MiraclothTM過濾，蒸發(fā)至干燥并在400ml的無水乙醇中吸收，剩下大量的不溶殘余物。過濾或離心乙醇級分，然后干燥。色譜分析(HPLC)顯示該提取物含有按重量計2±0.2％的20-羥基蛻皮酮(20E)。每千克經處理的藜麥種子獲得150至200毫克植物蛻皮素的量，其中85％-90％為20-羥基蛻皮酮且剩下具有非常類似結構的蛻皮甾類，例如羅漢松甾酮A、24-表-羅漢松甾酮A、24(28)-脫氫-羅漢松甾酮A或20，26-二羥基蛻皮酮。這些化合物的結構在圖9中說明。最要注意地，一種類似于提取物A的提取物以的名稱出售，所述提取物適于與本發(fā)明結合使用。II-20-羥基蛻皮酮和提取物A對進行高脂肪飲食的小鼠肌肉組成之作用的實驗性研究方案在3周中觀察植物蛻皮素對進行高脂肪飲食小鼠的作用。HF高脂肪飲食包含以豬油形式攝入大量的脂肪。對于所述研究選擇的小鼠為雄性C57BL/6J小鼠，在所述實驗開始時為6周齡。同時測試不進行高脂肪飲食的小鼠，其形成正常飲食對照組。根據(jù)對小鼠進行的飲食計劃和處理將研究中的小鼠分組：正?；驅φ诊嬍?LF)、高脂肪飲食(HF)、用藜麥提取物補充的高脂肪飲食(HFQ)以及用純20-羥基蛻皮酮補充的高脂肪飲食(HF20E)。對小鼠進行下表1中詳述的飲食計劃三周，且喂高脂肪飲食的小鼠同時用純20E或提取物A(2％20E)處理。將20E的濃度調整至等于每kg食物40mg。按照小鼠的平均攝食量，施用的20E劑量對應于在2個處理中每天每kg體重5mg的20E。對于兩個飲食計劃和所有的3個處理，每天過量提供食物。平均地，每天每籠提供40g的食物或每天每只小鼠提供6.5g食物。下表1更詳細地示出小鼠所進行的飲食組成表1.飲食的組成＊＊56％單不飽和脂肪酸，29％飽和脂肪酸和15％多不飽和脂肪酸(Ueda等，2011)。結果動物尸體重量的測量圖1示出在實驗結束時動物的瘦體重(脫脂的尸體)。與對照組相比，高脂肪飲食的施用已經降低了5％尸體重量。這個結果與這種飲食造成的肌肉蛋白質合成降低相一致(Anderson等，2008)。用提取物A的補充未導致顯著提高，但是20-羥基蛻皮酮已經產生了提高，其已經允許小鼠事實上回到了與正常飲食相同的水平。肌肉甘油三酯含量的測量在處死后，收集肌肉(四頭肌)的等分試樣用于分析。圖2包含肌肉甘油三酯含量相對于飲食和相關處理繪制的圖。如預期的，觀察到與喂對照飲食的小鼠對照組相比，喂高脂肪飲食小鼠中肌肉甘油三酯含量之較高提高的趨勢(提高30％)。在接受與高脂肪飲食相關之處理的小鼠中，純20E或提取物A的施用分別示出26％和6％較低肌肉甘油三酯含量的趨勢。肌肉蛋白質含量的測量圖3包含肌肉蛋白質含量相對于飲食和相關處理繪制的圖。與喂對照飲食的小鼠相比，高脂肪飲食示出較低(-5％)肌肉蛋白質含量的趨勢。在接受與高脂肪飲食相關之處理的小鼠中，與僅用HF處理相比，用純20E或提取物A的處理分別示出5％和13％更高肌肉蛋白質含量的趨勢。肌肉中基因轉錄物之量的測量圖4包含基因轉錄物(mRNA)的量(如在肌肉中測量的)對飲食和相關處理繪制的圖。所述量已經相對于在喂對照飲食之小鼠肌肉中測量的量進行歸一化。與在喂對照飲食之小鼠中測量的量相比，高脂肪飲食產生了編碼解偶聯(lián)蛋白UCP2和UCP3之基因轉錄物的量的急劇降低。在接受與高脂肪飲食相關之處理的小鼠中，純20E的施用造成UCP3基因轉錄物量的提高以及UCP2基因轉錄物量提高的趨向。在接受與高脂肪飲食相關之處理的小鼠中，提取物A的施用導致UCP2和UCP3基因轉錄物量的提高。高脂肪飲食導致編碼CPT-1胞內脂肪酸轉運蛋白之基因轉錄物的量相對于喂對照飲食小鼠中測量的量降低。因此，用純20E和提取物A的處理趨向于恢復轉錄物水平至對照飲食中所見的水平。這些變化與由于純20E和提取物A處理肌肉氧化能力的改善相一致。能量平衡喂高脂肪飲食的動物消耗一定量的食物提供它們與喂標準飲食的動物相同量的能量(千卡)(圖5)。這對于接受提取物A或純20E的動物也是正確的。相反地，后者的能量消耗高于(9％)僅喂高脂肪飲食動物的能量消耗(圖6)。這個差別(雖然小)具有重要的含意，因為其作用在整個實驗的持續(xù)期間是累積的。小鼠實驗的結論如同提取物A，純20E的施用防止了由高脂肪、基于豬油的飲食誘發(fā)之肌肉中的脂質沉積和蛋白質喪失。兩種處理促進了脂肪酸的代謝，所述脂肪酸由于高脂肪飲食的施用而以過量的量在肌肉中被吸收。提高的能量消耗與持續(xù)的食物攝入組合可解釋所觀察到的脂肪積聚的差別。該提高的能量消耗不是由于提高的運動活性(如在代謝籠中測量的)；因此似乎是由于提高的產熱。III-提取物A對于進行低熱量飲食6周的肥胖個體之作用的臨床雙盲研究方案研究了提取物A對低熱量飲食中瘦重量的保護作用。研究了提取物A在涉及肥胖對象雙盲臨床研究中的作用，所述對象采用低熱量飲食6周。通過使用“抓握測試”測量肌力并通過在身體組分的DXA掃描分析中評估瘦體重來評估瘦重量的保護。肌力和瘦重量數(shù)據(jù)為估計值。為考慮在低熱量飲食階段持續(xù)期間的差別，最初實際完成的每天計算抓握測試和瘦體重數(shù)據(jù)，然后乘以42天，這對應于由志愿者經歷的低熱量飲食階段的平均持續(xù)時間。在低熱量飲食階段期間瘦體重之喪失的測量在低熱量飲食時段期間研究了提取物A對瘦體重保護的作用。與安慰劑相比，該產物導致了瘦體重更大保護的輕微傾向(圖7)?？赡車栏耧嬍车拇x約束超過所有其他的考慮，且確實，在這樣的任何飲食時段之外進行的研究中，20-羥基蛻皮酮的“合成代謝”作用被蛋白質的補充攝入顯著地增強了(Simakin等，1988)。在低熱量飲食階段期間抓握測試數(shù)據(jù)的變化研究了提取物A對于進行低熱量飲食的肥胖對象之肌肉品質的作用。在飲食6周后在抓握測試結果中測量的變化(圖8)表明攝取提取物A補充物的對象(-0.55kg)比接受安慰劑的對象(-1.70kg)更大的肌力保護。結論如通過DXA掃描分析示出的，提取物A的施用向肥胖對象提供了對瘦體重增強的保護，與安慰劑相比提取物A的情況下具有較低喪失的趨勢。通過提取物A的施用還更好地保護了肌肉品質，與接受安慰劑的組相比喪失更小。參考文獻AndersonSR，GilgeDA，SteiberAL，PrevisSF.2008.Diet-inducedobesityaltersproteinsynthesis：tissue-specificeffectsinfastedversusfedmice.Metabolism7(3)：347-54.ChermnykhNS，ShimanovskyNL，ShutkoGV，Syro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