翠葉蘆薈提取物、制備翠葉蘆薈提取物的方法和高血糖改善劑的制作方法
【專利摘要】本發明涉及翠葉蘆薈提取物、制備翠葉蘆薈提取物的方法和高血糖改善劑。本發明提供：翠葉蘆薈提取物，其可以安全攝取、可以用作食物的材料用于預防與生活方式有關的疾病，包含非常低水平的蒽醌類(蒽醌類化合物)，并可以加入到食物中；和制備該翠葉蘆薈提取物的方法。通過超臨界流體提取法可以制備包含1.0質量％或更多的環羊毛甾烷化合物和洛飛烯醇的混合物的翠葉蘆薈提取物，并具有下列性質(1)和/或(2)：(1)環羊毛甾烷化合物和洛飛烯醇化合物的質量混合比如下：環羊毛甾烷化合物:洛飛烯醇化合物=6.3:2.7～5.1:4.9；和/或(2)蒽醌類化合物的含量是0.001質量％或更少。
【專利說明】翠葉蘆薈提取物、制備翠葉蘆薈提取物的方法和局血糖改善劑
[0001]本申請是申請號為200680006127.8 (PCT/JP2006/323095,國際申請日 2006 年 11
月20日)的專利申請“翠葉蘆薈提取物、制備翠葉蘆薈提取物的方法和高血糖改善劑”的分案申請。
【技術領域】
[0002]本發明涉及包含1.0質量％或更多的由環羊毛留燒化合物(cyclolanostane)和洛飛烯醇(ロフヱノール)化合物組成的混合物的翠葉蘆薈(aloe vera)提取物、通過超臨界流體提取法制備該翠葉蘆薈提取物的方法、以及高血糖改善劑，所述高血糖改善劑包含作為有效成分的包含1.0質量％或更多的由環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物的翠葉蘆薈提取物。
【背景技術】
[0003]已知高血糖惡化的狀態會導致很多疾病，這種狀態也稱作糖尿病。在日本，據說有超過1600萬人處于前驅糖尿病狀態(所謂的處于邊緣的患者)，從當前的生活方式考慮，預計患者的數量在未來會繼續增長。為了預防由高血糖狀態導致的糖尿病發病，必須長期控制血糖水平。
[0004]高血糖狀態是ー種血糖水平超過正常范圍的狀態，正常范圍下，空腹血糖水平:110mg/dl或更低，75g 糖負荷后I小時血糖水平:160mg/dl或更低，75g糖負荷后2小時血糖水平:120mg/dl或更低(非專利文獻I)。
[0005]血紅蛋白Alc，ー種葡萄糖和血紅蛋白的結合物，相應于高血糖的程度而增加。因為血紅蛋白Alc—旦產生就不會消除，直至紅細胞壽命(120天)完結，其在過去很長時間里作為血糖控制狀態的指標(非專利文獻I)。
[0006]同時，現在使用a-葡糖苷酶抑制劑、用作胰島素分泌促進劑的磺酰脲(sulfonylurea)藥物、用作胰島素耐受改善劑的噻唑烷衍生物等作為糖尿病的治療劑。但是，其藥效并不令人滿意，它們有很多問題，例如由于血糖水平急劇降低導致昏迷等副作用。同時，作為包含具有抑制血糖水平提高效果的天然來源的成分的藥物，現有技術參考文獻披露了包含來自大花紫薇(banaba)的成分的高血糖抑制劑(專利文獻I)，包含小麥或大麥發酵物濃縮提取物作為有效成分的高血糖抑制劑(專利文獻2)等。
[0007]植物甾醇大致分為三類:4-去甲基甾醇；4-單甲基甾醇；和4，4- 二甲基甾醇。4_去甲基留醇的例子包括一般廣泛所知的膽固醇、菜油留醇、菜子留醇、谷留醇、豆留醇和巖藻留醇，4-單甲基留醇的例子包括洛飛烯醇和foliol，4，4- 二甲基留醇的例子包括環木菠蘿烷醇和羽扇醇。
[0008]作為制備這些植物甾醇的方法，已經公開了用甲醇從菜籽油和大豆油中收集植物甾醇的方法，和包括將粗植物留醇浸潰在有機溶劑中，分離有機溶劑以分離(6-谷留醇、豆甾醇、菜油留醇和菜子留醇的方法(專利文獻3)。[0009]已經公開了制備4，4- 二甲基留醇的方法，包括:制備環阿屯醇和24-亞甲基環木菠蘿烷醇(其常用名是24-亞甲基-9，19-環羊毛留-3-醇)的方法(專利文獻4);和由Y -谷維醇制備環阿屯醇阿魏酸鹽的方法，和用其水解產物作為起始物質合成化合物的方法(專利文獻5)。但是，制備4-單甲基留醇，特別是具有洛飛烯醇骨架化合物的方法還是未知的。
[0010]作為通過超臨界流體提取法分離植物留醇的技木，已經公開了胡蘿卜素、維生素E、和其他微量成分濃縮物的一和二 -階段超臨界流體提取法。例如，已經公開了提取天然脂肪和油中的植物留醇(菜油留醇、豆留醇、(6-谷留醇)的方法(專利文獻6)、通過超臨界流體提取法制備魔芋中的植物留醇的方法和含有其的降膽固醇劑、前列腺肥大改善劑、和食物或飲料(專利文獻7)等。
[0011]百合科的蘆薈屬是ー種包括翠葉蘆薈(Aloe barbadenisis Miller)和木立蘆薈(Aloe arborescen Miller var.Natalensis Berger)等的植物，根據經驗已知它們具有各種功效。關于蘆薈屬植物功效中的改善血糖水平的現有技術包括:在美國進行的臨床研究(非專利文獻2);在動物中觀察到的降血糖作用(非專利文獻3或4);和蘆薈屬植物中的多糖類的降血糖作用(專利文獻8)。同時，也公開了蘆薈壓榨液和包含該壓榨液作為有效成分的降血糖劑(專利文獻9)。
[0012]同時，作為提取蘆薈中的具有血糖水平改善作用的有效成分的技術，已經公開了下列技木。例如，所述技術包括:一種制備翠葉蘆薈凝膠母液的方法，包括用氯滅菌，在90°C下過熱化，并過濾(專利文獻10); —種制備翠葉蘆薈凝膠壓榨液的方法，特征在于所有步驟都是在75°C以下進行的(專利文獻11);ー種通過壓榨和過濾步驟并通過活性炭、硅藻土和無菌過濾器處理得到的翠葉蘆薈壓榨液，所有生產エ序的加熱都要控制在60°C、30分鐘(專利文獻12); —種制備蘆薈產品的方法，包括:由蘆薈植物的葉子制備蘆薈汁；調節汁的pH至3~3.5 ;通過加入水溶液低級脂肪族極性溶劑析出活化物，形成不均勻溶液；和除去水溶性低級脂肪族極性溶劑和可溶物質，分離出析出的活化物(專利文獻13)。
[0013]另外公開了ー種制備具有免疫抑制改善效果的提取物的技術，包括:超離心翠葉蘆薈；收集所得上清液的こ醇溶解部分；用丁醇對該部分進行分配提取(專利文獻14)、和一種制備肥胖的預防和改善劑的技術，包括用こ酸こ酯或丁醇對蘆薈壓榨液或溶劑提取物的水溶液進行分配提取(專利文獻15)。
[0014]專利文獻1 JP2OO3-95MlA
[0015]專利文獻2JP2OO2-37IOO3A
[0016]專利文獻3:JP2002_542161A
[0017]專利文獻4 JP57-018617A
[0018]專利文獻5 JP2003-277269A
[0019]專利文獻6 JP2005-87998A
[0020]專利文獻7JP2OO3-1l33MA
[0021]專利文獻8 JP60-214741A
[0022]專利文獻9JP2OO3-286I85A
[0023]專利文獻10 JP2002-68997A
[0024]專利文獻11 JP2002-284661A[0025]專利文獻12 JP2002-205955A
[0026]專利文獻13 JP2832551B
[0027]專利文獻14 JP08-208495A
[0028]專利文獻15 JP2000-319190A
[0029]非專利文獻I:日本臨床，N0.808，Vol.2，pp.405-409，2002
[0030]非專利文獻2:Phytomedicine, vol.3, pp.245-248，1996
[0031]非專利文獻3:Phytotherapy Research, Vol.15, pp.157-161, 2001
[0032]非專利文獻4:Phytotherapy Research, Vol.7, pp.37-42，1993

【發明內容】

[0033]在用植物例如蘆薈開發功能性食品時，在使用植物時必須考慮其水分量。例如，在翠葉蘆薈凝膠(翠葉蘆薈的葉肉部分)中，水分量是約98%或更多，固體部分的大部分是由多糖類構成的。因此，由于物理的問題，可利用的食品形態受到很大限制。同時，還有ー個問題是，必須考慮翠葉蘆薈凝膠的非有效成分的含量，以確定確保其功能所需的攝取量。
[0034]如上面專利文獻8~10所述，已經研究了制備包含除去了翠葉蘆薈凝膠中的蒽醌類(蒽醌類化合物)的翠葉蘆薈凝膠的食品的技術，但是其重點是除去不想要的成分。因此，僅有這些技術并不能解決提供有效地提取目標有效成分，且不包含不想要的成分的制備方法的問題。
[0035]另外，上述專利文獻6或7公開了通過超臨界流體提取法提取植物留醇的方法，但是并沒有描述和暗示有效地回收具有高血糖改善效果的植物留醇、且得到不包含蒽醌類的提取物的方法，以及這種提取物。
[0036]也就是說，不使用有機溶劑制備以用于食品為目的的翠葉蘆薈提取物的技術還是未知的，其中，該技術可以簡便和有效地分離翠葉蘆薈中的植物留醇和蒽醌類。
[0037]基于上述目的，本發明人努力研究，目的在于得到作為功能性食品的材料發揮足夠的活性，且適合加入到食品中的翠葉蘆薈形態(組合物)。此外本發明人已經使用翠葉蘆薈壓榨液(或其干燥粉末)作為通過超臨界流體提取法進行純化的原料，結果，他們得到一種包含環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物的提取物，該提取物的組成基本反映天然翠葉蘆薈中的植物留醇混合比，且該提取物幾乎不包含蒽醌類，而且具有顯著的高血糖改善效果，從而完成了本發明。
[0038]本發明的目的在于提供:翠葉蘆薈提取物，其可以安全攝取，可以用作生活習慣病預防食品的材料，該提取物包含非常低水平的蒽醌，可以加入到食品中，包含植物留醇(包括環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物)；和制備該翠葉蘆薈提取物的方法。
[0039]本發明的另ー個目的是提供高血糖改善劑，其包含上述翠葉蘆薈提取物作為有效成分。
[0040]解決上述問題的本申請的第一方面發明涉及翠葉蘆薈提取物，其包含1.0質量％或更多的由環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物，該提取物具有下列性質
(I)和/或⑵:
[0041](I)環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物的質量混合比如下:
[0042]環羊毛甾烷化合物:洛飛烯醇化合物=6.3:2.7~5.1:4.9 ;和/或[0043](2)蒽醌類化合物的含量是0.001質量％或更少。
[0044]在下文中，上述翠葉蘆薈提取物也稱作“本發明的翠葉蘆薈提取物”。
[0045]本申請第一方面發明的優選方面是下列的(3)和/或(4):
[0046](3)環羊毛甾烷化合物是9，19-環羊毛甾-3-醇和/或24-亞甲基-9，19-環羊毛留_3_醇；和/或
[0047](4)洛飛烯醇化合物是選自4-甲基膽留-7-烯-3-醇、4-甲基麥角留_7_烯_3_醇和4-甲基豆留-7-烯-3-醇中的ー種或多種化合物。
[0048]解決上述問題的本申請第二方面的發明涉及包含本申請第一方面發明的翠葉蘆薈提取物的食品或飲料。
[0049]本發明的食品或飲料中的翠葉蘆薈提取物的優選方面與本申請的第一方面發明相同。另外，食品或飲料中的翠葉蘆薈提取物的優選含量是0.01質量％或更多。
[0050]解決上述問題的本申請的第三方面發明涉及制備翠葉蘆薈提取物的方法，包括:通過冷凍干燥或熱風干燥從翠葉蘆薈的不包括葉皮的葉肉部分除去水，制備粉末狀翠葉蘆薈葉肉；通過超臨界流體提取法從得到的粉末狀翠葉蘆薈葉肉中提取翠葉蘆薈提取物，其中超臨界流體提取法是基于下列條件(a)~(e):
[0051](a)提取溶劑是二氧化碳；
[0052](b)提取溫度是50~69°C ;
[0053](c)壓カ是 15 ~60Mpa ；
[0054](d)不使用夾帶劑；和
[0055](e)提取時間是50~70分鐘。
[0056]解決上述問題的本申請的第四方面發明涉及高血糖改善劑，其包括翠葉蘆薈提取物作為有效成分，所述翠葉蘆薈提取物包含1.0質量％或更多的由環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物，其中所述翠葉蘆薈提取物具有下列性質(5)和/或(6):
[0057](5)環羊毛甾烷化合物和洛飛烯醇化合物的質量混合比如下:
[0058]環羊毛甾烷化合物:洛飛烯醇化合物=6.3:2.7~5.1:4.9 ;和/或
[0059](6)蒽醌類化合物的含量是0.001質量％或更少。
[0060]本申請的第四方面發明的優選方面是下列的(7)和/或(8):
[0061](7)環羊毛甾烷化合物是9，19-環羊毛甾-3-醇和/或24-亞甲基-9，19-環羊毛留_3_醇；和/或
[0062](8)洛飛烯醇化合物是選自4-甲基膽留-7-烯-3-醇、4-甲基麥角留_7_烯_3_醇和4-甲基豆留-7-烯-3-醇中的ー種或多種化合物。
[0063]解決上述問題的本申請的第五方面發明涉及包含1.0質量％或更多的由環羊毛甾烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物的翠葉蘆薈提取物在制備高血糖改善劑中的用途，其中該翠葉蘆薈提取物具有下列性質(9)和/或(10):
[0064](9)環羊毛甾烷化合物和洛飛烯醇化合物的質量混合比如下:
[0065]環羊毛甾烷化合物:洛飛烯醇化合物=6.3:2.7~5.1:4.9 ;和/或
[0066](10)蒽醌類化合物的含量是0.001質量％或更少。
[0067]需要注意的是，本申請第五方面發明的優選的方面是下列的(11)和/或(12):
[0068](11)環羊毛甾烷化合物是9，19-環羊毛甾-3-醇和/或24-亞甲基-9，19-環羊毛留-3-醇；和/或
[0069](12)洛飛烯醇化合物是選自4-甲基膽甾-7-烯-3-醇、4_甲基麥角甾-7-烯-3-醇和4-甲基豆留-7-烯-3-醇中的ー種或多種化合物。
[0070]解決上述問題的本申請的第六方面發明涉及ー種方法，該方法的特征在于給要改善高血糖的對象施用包含1.0質量％或更多的由環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物的翠葉蘆薈提取物，其中該翠葉蘆薈提取物具有下列性質(13)和/或(14):
[0071](13)環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物的質量混合比如下:
[0072]環羊毛甾烷化合物:洛飛烯醇化合物=6.3:2.7~5.1:4.9 ;和/或
[0073](14)蒽醌類化合物的含量是0.001質量％或更少。
[0074]本發明的翠葉蘆薈提取物是安全的，具有顯著的高血糖改善效果，可以用作功能性食品，特別是特定保健用食品的材料。同吋，蒽醌類(蒽醌類化合物)的含量低，因此該提取物可以作為食品攝取。同時，本發明的翠葉蘆薈提取物不包含不適合作為食品添加劑的物質例如有機溶剤，因此可以用于所有食品。
[0075]同時，本發明的制備方法可以提供適合開發利用翠葉蘆薈的功能性食品的材料，促進了翠葉蘆薈在食品中的使用。
【具體實施方式】
[0076]下文將詳細描述本發明的優選實施方案。但是本發明并不僅限于下列的優選實施方案，而是可以在本發明的范圍內自由改變。應當注意，在本說明書中，除非另有說明，百分比是以質量計。
[0077]在本發明的翠葉蘆薈提取物中，由環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物的含量是1.0質量％或更多，優選1.2質量％或更多，進ー步優選2.0%或更多。
[0078]環羊毛留烷化合物是下列通式(I)表示的化合物(具有環羊毛留烷骨架的化合物)。
[0079][化I]
[0080]
【權利要求】
1.制備翠葉蘆薈提取物的方法，所述翠葉蘆薈提取物包含1.0質量％或更多的由環羊毛甾烷化合物和洛飛烯醇化合物組成的混合物， 所述方法包括: 通過冷凍干燥或熱風干燥從翠葉蘆薈的不包括葉皮的葉肉部分除去水，制備粉末狀翠葉蘆薈葉肉； 通過超臨界流體提取法從所得粉末狀翠葉蘆薈葉肉提取翠葉蘆薈提取物，其中超臨界流體提取法是基于下列條件(a)~(e): (a)提取溶劑是二氧化碳； (b)提取溫度是50~69°C; (c)壓カ是15~60MPa； (d)不使用夾帶劑；和 (e)提取時間是50~70分鐘。
2.根據權利要求1所 述的方法，其中所述提取物具有下列性質⑴和/或⑵: (1)環羊毛留烷化合物和洛飛烯醇化合物的質量混合比如下: 環羊毛甾烷化合物:洛飛烯醇化合物=6.3:2.7~5.1:4.9 ;和/或 (2)蘆薈大黃素的含量是0.001質量％或更少。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，環羊毛留烷化合物是9，19-環羊毛留-3-醇和/或24-亞甲基-9，19-環羊毛留-3-醇。
4.根據權利要求1或2所述的方法，其中，洛飛烯醇化合物是選自4-甲基膽甾-7-烯-3-醇、4-甲基麥角甾-7-烯-3-醇和4-甲基豆甾-7-烯-3-醇中的ー種或多種化合物。
5.藥物的生產方法，其包括: 通過使用根據權利要求1或2所述的方法，生產翠葉蘆薈提取物，和 將翠葉蘆薈提取物與藥物載體混合。
6.根據權利要求5所述的方法，其中所述藥物用于改善高血糖。
7.食品或飲料的生產方法，其包括: 通過使用根據權利要求1或2所述的方法，生產翠葉蘆薈提取物，和 將翠葉蘆薈提取物添加至食品或飲料的材料。
8.根據權利要求7所述的方法，其中向所述食品或飲料的材料添加所述翠葉蘆薈提取物以使所述翠葉蘆薈提取物在所述食品或飲料中的量是0.01質量％或更多。
9.根據權利要求7所述的方法，其中所述食品或飲料用于改善高血糖。
【文檔編號】A61P3/10GK103494998SQ201310334787
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2006年11月20日 優先權日:2005年11月25日
【發明者】田中美順, 山田宗夫 申請人:森永乳業株式會社