一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物、凍干粉、制備方法及應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物、凍干粉、制備方法及應用，屬于禽用飼料添加劑【技術領域】。該抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，主要由以下重量份數的組分組成：抗鴨病毒性疾病卵黃抗體85?95份、抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、a-干擾素1?5份；優選的，還包括以下重量份數的組分：黃芪多糖5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。本發明將抗鴨病毒性疾病卵黃抗體、抗鴨病毒性疾病轉移因子、a-干擾素與中藥提取物黃芪多糖、當歸多糖、枸杞多糖、甘草多糖復配，能顯著提高機體的免疫力和抗病能力，有效預防鴨病毒性疾病。將其制備成凍干粉后可在常溫下長期保存，抗體效價高、生物活性好。
【專利說明】一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物、凍干粉、制備方法及應 用

【技術領域】
[0001] 本發明具體涉及一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，同時還涉及抗鴨病毒性疾病 的凍干粉，以及該凍干粉的制備方法和應用，屬于禽用飼料添加劑【技術領域】。

【背景技術】
[0002] 鴨病毒性疾病主要包括鴨瘟、鴨病毒性肝炎等。其中鴨瘟（Duck plape)又名鴨病 毒性腸炎（Duck virus enteritis, DVE)，是鴨、鵝和其他雁形目禽類的一種急性、熱性、敗 血性傳染病。該病的特征是流行廣泛，傳播迅速，發病率和死亡率都高。早在1923年Baudet 氏在荷蘭首次發現本病，直到1940年Bos氏首次提出鴨瘟的名稱，并確認是一種不同于雞 瘟的新病毒病。以后在歐、美各國均有本病發生的報道。1957年以來，本病廣泛流行于我國 華南、華中、華東養鴨業較發達地區，造成很大的經濟損失。
[0003] 鴨病毒性肝炎簡稱鴨肝炎，主要危害20日齡以內的雛鴨，雛鴨日齡越小，死亡率 越高，最高死亡率可達90?95%，并且所有的抗菌素對本病無效。早在1958年鴨病毒性肝 炎在我國出現，20世紀80年代初期起本病在我國再次流行，1997年以來，鴨病毒性肝炎在 某些地區出現較嚴重的流行，其疫情不能被標準鴨病毒性肝炎I型弱毒疫苗完全地控制， 懷疑有I型鴨病毒性肝炎病毒變異株出現。
[0004] 目前，常見的防治鴨病毒性疾病的方法較多，主要是使用西藥、接種免疫和中草藥 防治。其中西藥的泛濫使用給鴨肉產品食用帶來了極大的安全隱患。而接種免疫的早期效 果較好，但需要多次接種，操作麻煩，成本較高，容易使雛鴨產生應激反應，且疫苗對保藏條 件要求較高，需要在2?8°C條件下冷藏，室溫條件下一段時間則失去效果。中草藥飼料添 加劑也是目前的研究方向之一，但是中草藥的種類較多，相同的中藥材對不同禽畜疾病的 作用差異很大，且中草藥對疾病的免疫效果極其有限，因此其應用也具有一定的局限性。注 射卵黃抗體也是較為常見的一種方法，但是單一注射卵黃抗體的免疫效果有時候不能滿足 實際需要。


【發明內容】

[0005] 本發明的目的是提供一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物。
[0006] 同時，本發明還提供一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉。
[0007] 再者，本發明還提供一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法。
[0008] 最后，本發明還提供一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉作為飼料添加劑的應用。
[0009] 為了實現以上目的，本發明所采用的技術方案是：
[0010] -種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，主要由以下重量份數的組分組成：抗鴨病毒 性疾病卵黃抗體85?95份、抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、α -干擾素1?5份。 [0011] 優選的，一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，還包括以下重量份數的組分：黃芪多 糖5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。
[0012] -種抗鴨病毒性疾病的凍干粉，主要由以下重量份數的組分組成：抗鴨病毒性疾 病卵黃抗體85?95份、抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、α -干擾素1?5份、防腐劑 0. 01?0. 02份、滅活劑0. 2?0. 3份、耐熱凍干保護劑3?6份。
[0013] 優選的，一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉，還包括以下重量份數的組分：黃芪多糖 5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10?30份。
[0014] 所述的抗鴨病毒性疾病卵黃抗體與抗鴨病毒性疾病轉移因子所針對的病毒種類 相同，如抗鴨瘟卵黃抗體與抗鴨瘟轉移因子、抗鴨病毒性肝炎卵黃抗體與抗鴨病毒性肝炎 轉移因子。
[0015] 所述的防腐劑為硫柳汞。
[0016] 所述的滅活劑為甲醛。
[0017] 所述的耐熱凍干保護劑由以下重量份數的組分組成：維生素C0. 5?1份、維生素 Ε1?2份、聚乙烯吡咯烷酮1?2份、甘氨酸0. 5?1份。
[0018] 所述抗鴨病毒性疾病轉移因子可以為市售商品，也可以采用以下方法制備得到：
[0019] (1)用滅菌后的生理鹽水清洗采用鴨病毒抗原免疫過的豬脾臟和/或胸腺，去其 表面筋、脂肪等組織，再用生理鹽水沖洗；
[0020] (2)將處理后的豬脾臟和/或胸腺破碎，加入2倍預冷的PBS緩沖液，用組織勻漿 儀勻質得勻漿液；
[0021] (3)將勻漿液超聲破碎處理5?lOmin得破碎液；
[0022] (4)將破碎液調至pH值為5. 3?5. 7, 5000?6000rpm離心30min，收集上清液；
[0023] (5)將上清液用微濾膜過濾，截留分子量7000道爾頓的物質，收集濾液；
[0024] (6)將濾液用除菌濾膜過濾，得到抗鴨病毒性疾病轉移因子原液，4°C保存或凍干 備用。
[0025] 所述的黃芪多糖可以為市售商品，也可以通過常規方法提取制備。其中黃芪含皂 甙、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素。主要作用于腎，有利尿作用， 能促進細胞中DNA的合成，加速肝的分化增殖，并能提高淋巴細胞的增殖，增強白細胞誘生 干擾素的能力，從而間接提高和促進機體免疫力功能。
[0026] 所述的當歸多糖可以為市售商品，也可以通過常規方法提取制備。其中當歸主要 作用于心、肝臟器，能調節氣血，增強機體免疫功能，還具有抗癌作用。
[0027] 所述的枸杞多糖可以為市售商品，也可以通過常規方法提取制備。其中枸杞主要 作用于肝、腎等臟器，可以調節機體免疫功能，有效抑制腫瘤生長和細胞突變，具有延緩衰 老、抗脂肪肝、調節血脂和血糖、促進造血功能等功效。
[0028] 所述的甘草多糖可以為市售商品，也可以通過常規方法提取制備。其中甘草主要 作用于脾臟，能補益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛，調和諸藥；用于脾胃虛弱、倦怠乏 力、心悸氣短、咳嗽痰多等，還能緩解藥物毒性。
[0029] -種抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法，包括以下步驟：
[0030] (1)分離毒株制備疫苗：取鴨感染病毒株增殖、滅活后制得乳油劑疫苗備用；
[0031] (2)免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1)制備的疫苗免疫接種健康雞群，當抗體 效價達到1:256時，收集高免蛋清理、消毒后晾干備用；
[0032] (3)分離高免蛋卵黃：取步驟（2)制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無菌水， 充分攪拌至顏色發白得卵黃溶液，將卵黃溶液置于60?65°C水浴中加熱20?30min，再加 入pH值為4. 9?5. 2的預冷酸化水，加入量為卵黃溶液體積的6?8倍，混勻后室溫下靜 置沉淀，取上清液離心分離；
[0033] (4)取步驟（3)離心后的上清液，濾過，使濾液中抗鴨病毒性疾病卵黃抗體的干重 為85?95份，濃縮，以重量份數計，在濃縮液中加入防腐劑0. 01?0. 02份、滅活劑0. 2? 〇. 3份、耐熱凍干保護劑3?6份，混勻后預凍、凍干備用；
[0034] (5)以重量份數計，在步驟（4)的干粉中加入抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、 α-干擾素1?5份即得。
[0035] 所述步驟（2)中每7天對健康雞群免疫一次，共免疫三次，于第二次免疫后開始檢 測抗體效價。優選的，第一次免疫接種滅活疫苗1. 5mL，第二次、第三次免疫增加1倍量。
[0036] 所述步驟（3)中離心分離的轉速為15000rpm，離心時間為20min。
[0037] 所述步驟（4)中濾過先采用0. 45 μ m的濾膜，以截留分子量大于200KD的大分子 物質，再采用〇. 22 μ m的濾膜過濾。
[0038] 所述步驟（5)中加入的抗鴨病毒性疾病轉移因子為經凍干處理后得到的粉末，也 可以在步驟（4)的濃縮液中加入以干重換算后的轉移因子原液。
[0039] 優選的，一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法，以重量份數計，在步驟（5)的 干粉中再加入黃芪多糖5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10? 30份。
[0040] 用法與用量：肌注，每l〇〇ml注射液中含有抗鴨病毒性疾病凍干粉lg，每日2次， 連用5日。
[0041] 一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉作為飼料添加劑的應用，包括以下步驟：以重量百 分比計，將抗鴨病毒性疾病的凍干粉以0. 2?0. 6%的量加入鴨飼料中即可。
[0042] 本發明的有益效果：
[0043] 本發明中抗鴨病毒性疾病的藥物組合物主要由抗鴨病毒性疾病卵黃抗體、抗鴨病 毒性疾病轉移因子、α-干擾素組成，其中卵黃抗體是一種免疫球蛋白，是由機體受到外界 抗原刺激而產生的一種應激產物，可以與相應抗原結合，消除病因；轉移因子攜帶有致敏淋 巴細胞的特異性免疫信息，能夠將特異性免疫信息呈遞給受體淋巴細胞，使受體無活性的 淋巴細胞轉變為特異性致敏淋巴細胞，從而激發受體細胞介導的免疫反應；α -干擾素可 通過細胞表面受體作用使細胞產生抗病毒蛋白，同時還可增強自然殺傷細胞（ΝΚ細胞)、巨 噬細胞和Τ淋巴細胞的活力，從而起到免疫調節作用，并增強抗病毒能力。本發明將上述三 者聯用可以增強機體抗病毒活性，大大提高攻守作用，對鴨病毒性疾病具有良好的防治功 效。
[0044] 本發明采用黃芪多糖、當歸多糖、枸杞多糖、甘草多糖共4種多糖類物質，具有提 高機體免疫力，增強機體適應力和抵抗力等作用，還能抗菌、抗病毒、調節機體代謝等。上述 4種物質覆蓋了機體的心、肝、脾、肺、腎、脾等臟器，保證了機體臟器之間的平衡運轉，比單 一運用的療效強，不僅能加強機體臟器機能，還能加強機體免疫能力及調節機能，保證機體 健康。
[0045] 本發明將抗鴨病毒性疾病卵黃抗體、抗鴨病毒性疾病轉移因子、α -干擾素與黃芪 多糖、當歸多糖、枸杞多糖、甘草多糖聯用，具有針對性強、抗體效價高、生物活性好等優點， 能夠顯著提高機體的免疫力和抗病能力，有效預防鴨病毒性疾病。將上述活性成分與耐熱 凍干保護劑復配，能延長凍干粉在常溫下的保存時間，保證抗體效價及生物活性，將其按一 定比例加入飼料配方中，可以預防和治療鴨病毒性疾病，提高機體免疫力和成活率，使用方 便。本發明通過試驗進一步表明，該凍干粉制劑對鴨病毒性疾病具有良好的防治功效，遠遠 大于單一使用或者兩兩聯合使用的效果。
[0046] 本發明制備抗鴨病毒性疾病凍干粉的方法簡單，易于操作，適于大規模生產及推 廣應用。采用健康雞群作為免疫對象，能降低毒株返祖的可能性，同時可以快速提高抗體效 價至1:256,通過雞強化免疫后制成的卵黃抗體對病毒性疾病的防治效果突出，見效快、療 效顯著、針對性強。

【具體實施方式】
[0047] 下述實施例僅對本發明作進一步詳細說明，但不構成對本發明的任何限制。
[0048] 實施例1
[0049] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，由以下重量份數的組分組成：抗鴨瘟 卵黃抗體85份、抗鴨瘟轉移因子5份、α -干擾素1份、黃芪多糖10份、當歸多糖5份、枸 杞多糖20份、甘草多糖10份。
[0050] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的凍干粉，由以下重量份數的組分組成：抗鴨瘟卵黃 抗體85份、抗鴨瘟轉移因子5份、α -干擾素1份、黃芪多糖10份、當歸多糖5份、枸杞多 糖20份、甘草多糖10份、硫柳汞0. 02份、甲醛0. 2份、維生素 C1份、維生素 Ε1份、聚乙烯 吡咯烷酮2份、甘氨酸0.5份。
[0051] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法，包括以下步驟：
[0052] (1)分離毒株制備疫苗：取國家標準鴨瘟病毒株增殖、滅活后制得乳油劑疫苗備 用；
[0053] (2)免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1)制備的疫苗免疫接種健康雞群，每7天 對健康雞群免疫一次，共免疫三次，第一次免疫接種滅活疫苗1. 5mL，第二次、第三次免疫增 加1倍量，于第二次免疫后開始檢測抗體效價，當抗體效價達到1:256時，收集高免蛋清理、 消毒后晾干備用；
[0054] (3)分離高免蛋卵黃：取步驟（2)制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無菌水， 充分攪拌至顏色發白得卵黃溶液，將卵黃溶液置于65°C水浴中加熱30min，再加入pH值 為5. 0的4°C酸化水，加入量為卵黃溶液體積的7倍，混勻后室溫下靜置沉淀，取上清液在 15000rpm的轉速下離心分離20min ;
[0055] (4)取步驟（3)離心后的上清液，先采用0. 45 μ m的濾膜，以截留分子量大于200KD 的大分子物質，再采用〇. 22 μ m的濾膜過濾，使濾液中抗鴨瘟卵黃抗體的干重為85份，濃 縮，在濃縮液中加入硫柳汞、甲醛、維生素 C、維生素、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸，混勻后經預 凍、凍干備用；
[0056] (5)在步驟（4)的干粉中加入抗鴨瘟轉移因子、α-干擾素、黃芪多糖、當歸多糖、 枸杞多糖、甘草多糖粉末，混勻即得。
[0057] 所述的抗鴨瘟轉移因子的制備方法為：
[0058] ( 1)用滅菌后的生理鹽水清洗采用鴨瘟病毒抗原免疫過的豬脾臟，去其表面筋、月旨 肪等組織，再用生理鹽水沖洗；
[0059] (2)將處理后的豬脾臟破碎，加入2倍預冷的PBS緩沖液，用組織勻漿儀勻質得勻 漿液；
[0060] (3)將勻漿液超聲破碎處理lOmin得破碎液；
[0061] (4)將破碎液調至pH值為5. 5, 5500rpm離心30min，收集上清液；
[0062] (5)將上清液用微濾膜過濾，截留分子量7000道爾頓的物質，收集濾液；
[0063] (6)將濾液用除菌濾膜過濾，得到抗鴨瘟轉移因子原液，凍干備用。
[0064] 所述的α -干擾素購自長春生物制品研究所。
[0065] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的凍干粉作為飼料添加劑的應用，包括以下步驟：以 重量百分比計，將抗鴨瘟凍干粉以〇. 4%的量加入鴨飼料中即可。
[0066] 實施例2
[0067] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，由以下重量份數的組分組成：抗鴨病 毒性肝炎卵黃抗體95份、抗鴨病毒性肝炎轉移因子1份、α -干擾素5份、黃芪多糖5份、 當歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30份。
[0068] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的凍干粉，由以下重量份數的組分組成：抗鴨病毒性 肝炎卵黃抗體95份、抗鴨病毒性肝炎轉移因子1份、α -干擾素5份、黃芪多糖5份、當歸 多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30份、硫柳汞0. 01份、甲醛0. 3份、維生素 C0. 5份、 維生素 Ε2份、聚乙烯吡咯烷酮1份、甘氨酸1份。
[0069] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法同實施例1，步驟（1)中采用國 家標準鴨病毒性肝炎病毒株。
[0070] 本實施例中抗鴨病毒性疾病的凍干粉作為飼料添加劑的應用，包括以下步驟：以 重量百分比計，將抗鴨瘟凍干粉以〇. 4%的量加入鴨飼料中即可。
[0071] 對比例1
[0072] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨瘟卵黃抗體85份、黃芪 多糖10份、當歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實施例1。采用常規 方法制備。
[0073] 對比例2
[0074] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨瘟轉移因子5份、黃芪 多糖10份、當歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實施例1。采用常規 方法制備。
[0075] 對比例3
[0076] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：α -干擾素1份、黃芪多糖10 份、當歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實施例1。采用常規方法制 備。
[0077] 對比例4
[0078] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：黃芪多糖10份、當歸多糖5 份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實施例1。采用常規方法制備。
[0079] 對比例5
[0080] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨瘟卵黃抗體85份、抗鴨 瘟轉移因子5份、黃芪多糖10份、當歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分 同實施例1。采用常規方法制備。
[0081] 對比例6
[0082] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨瘟卵黃抗體85份、 α -干擾素1份、黃芪多糖10份、當歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分 同實施例1。采用常規方法制備。
[0083] 對比例7
[0084] 本對比例中抗鴨瘟凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨瘟卵黃抗體5份、α -干 擾素1份、黃芪多糖10份、當歸多糖5份、枸杞多糖20份、甘草多糖10份，其他組分同實施 例1。采用常規方法制備。
[0085] 對比例8
[0086] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨病毒性肝炎卵 黃抗體95份、黃芪多糖5份、當歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30份，其他組分同 實施例1。采用常規方法制備。
[0087] 對比例9
[0088] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨病毒性肝炎轉 移因子1份、黃芪多糖5份、當歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30份，其他組分同實 施例1。采用常規方法制備。
[0089] 對比例10
[0090] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：α -干擾素5份、黃 芪多糖5份、當歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30份，其他組分同實施例1。采用常 規方法制備。
[0091] 對比例11
[0092] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：黃芪多糖5份、當 歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30份，其他組分同實施例1。采用常規方法制備。
[0093] 對比例12
[0094] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨病毒性肝炎卵 黃抗體95份、抗傳染性支氣管炎轉移因子1份、黃芪多糖5份、當歸多糖10份、枸杞多糖10 份、甘草多糖30份，其他組分同實施例1。采用常規方法制備。
[0095] 對比例13
[0096] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨病毒性肝炎卵 黃抗體95份、α-干擾素5份、黃芪多糖5份、當歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30 份，其他組分同實施例1。采用常規方法制備。
[0097] 對比例14
[0098] 本對比例中抗鴨病毒性肝炎凍干粉包括以下重量份數的組分：抗鴨病毒性肝炎轉 移因子1份、α -干擾素5份、黃芪多糖5份、當歸多糖10份、枸杞多糖10份、甘草多糖30 份，其他組分同實施例1。采用常規方法制備。
[0099] 試驗例1
[0100] 本發明實施例1、2制備凍干粉的質量檢測。
[0101] 試驗方法：取本發明實施例1、2制備的凍干粉，置于37°C培養箱中，保存24個月， 分別于1周、2周、1月、2月、4月、8月、12月、16月、20月、24月后采用瓊脂擴散(AGP)法， 測定每個時間點凍干粉樣品中卵黃抗體的效價，試驗結果詳見下表1。
[0102] 表1實施例1、2制備凍干粉中卵黃抗體的效價變化
[0103]

【權利要求】
1. 一種抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，其特征在于：主要由以下重量份數的組分組 成：抗鴨病毒性疾病卵黃抗體85?95份、抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、α -干擾素 1?5份。
2. 根據權利要求1所述的抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，其特征在于：還包括以下重 量份數的組分：黃芪多糖5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖 10?30份。
3. 根據權利要求1或2所述的抗鴨病毒性疾病的藥物組合物，其特征在于：所述的抗 鴨病毒性疾病卵黃抗體和抗鴨病毒性疾病轉移因子為抗鴨瘟卵黃抗體與抗鴨瘟轉移因子 或抗鴨病毒性肝炎卵黃抗體與抗鴨病毒性肝炎轉移因子。
4. 一種抗鴨病毒性疾病的凍干粉，其特征在于：主要由以下重量份數的組分組成：抗 鴨病毒性疾病卵黃抗體85?95份、抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、α -干擾素1?5 份、防腐劑〇. 01?〇. 02份、滅活劑0. 2?0. 3份、耐熱凍干保護劑3?6份。
5. 根據權利要求4所述的抗鴨病毒性疾病的凍干粉，其特征在于：還包括以下重量份 數的組分：黃芪多糖5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10?20份、甘草多糖10? 30份。
6. 根據權利要求4或5所述的抗鴨病毒性疾病的凍干粉，其特征在于：所述的耐熱凍 干保護劑由以下重量份數的組分組成：維生素 C0. 5?1份、維生素 Ε1?2份、聚乙烯吡咯 燒酮1?2份、甘氨酸0. 5?1份。
7. 根據權利要求4或5所述的抗鴨病毒性疾病的凍干粉，其特征在于：所述的抗鴨病 毒性疾病轉移因子的制備方法為： (1) 用滅菌后的生理鹽水清洗采用鴨病毒抗原免疫過的豬脾臟和/或胸腺，去其表面 筋、脂肪組織，再用生理鹽水沖洗； (2) 將處理后的豬脾臟和/或胸腺破碎，加入2倍預冷的PBS緩沖液，用組織勻漿儀勻 質得勻漿液； (3) 將勻漿液超聲破碎處理5?lOmin得破碎液； (4) 將破碎液調至pH值為5. 3?5. 7, 5000?6000rpm離心30min，收集上清液； (5) 將上清液用微濾膜過濾，截留分子量7000道爾頓的物質，收集濾液； (6) 將濾液用除菌濾膜過濾，得到抗鴨病毒性疾病轉移因子原液，4°C保存或凍干備用。
8. -種抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法，其特征在于：包括以下步驟： (1) 分離毒株制備疫苗：取鴨感染病毒株增殖、滅活后制得乳油劑疫苗備用； (2) 免疫健康雞群制備高免蛋：取步驟（1)制備的疫苗免疫接種健康雞群，當抗體效價 達到1:256時，收集高免蛋清理、消毒后晾干備用； (3) 分離高免蛋卵黃：取步驟（2)制備的高免蛋分離卵黃，加入等體積的無菌水，充分 攪拌至顏色發白得卵黃溶液，將卵黃溶液置于60?65°C水浴中加熱20?30min，再加入pH 值為4. 9?5. 2的預冷酸化水，加入量為卵黃溶液體積的6?8倍，混勻后室溫下靜置沉淀， 取上清液離心分離； (4) 取步驟（3)離心后的上清液，濾過，使濾液中抗鴨病毒性疾病卵黃抗體的干重為 85?95份，濃縮，以重量份數計，在濃縮液中加入防腐劑0. 01?0. 02份、滅活劑0. 2?0. 3 份、耐熱凍干保護劑3?6份，混勻后預凍、凍干備用； (5)以重量份數計，在步驟（4)的干粉中加入抗鴨病毒性疾病轉移因子1?5份、α -干 擾素1?5份即得。
9. 根據權利要求8所述的抗鴨病毒性疾病的凍干粉的制備方法，其特征在于：以重量 份數計，在步驟（5)的干粉中再加入黃芪多糖5?10份、當歸多糖5?10份、枸杞多糖10? 20份、甘草多糖10?30份。
10. -種如權利要求4或5所述的抗鴨病毒性疾病的凍干粉作為飼料添加劑的應用，其 特征在于：包括以下步驟：以重量百分比計，將抗鴨病毒性疾病的凍干粉以0. 2?0. 6%的 量加入鴨飼料中即可。
【文檔編號】A61K31/715GK104208683SQ201310463405
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2013年9月30日 優先權日:2013年9月30日
【發明者】郭俊清, 徐進, 陳建暉 申請人:鄭州后羿制藥有限公司